فسفولیپازها، طبقه بندی و خواص آنها. اینوزیتول تری فسفات و داگ نیز پیام رسان دوم هستند.محصول فسفولیپاز c

فسفولیپازآنزیمی است که فسفولیپیدها را هیدرولیز می کند. 4 کلاس اصلی فسفولیپازها وجود دارد: A، B، C و D، که هر کدام یک پیوند خاص را در فسفولیپید هیدرولیز می کنند. فسفولیپازهای کلاس A به فسفولیپازهای A1 تقسیم می شوند که زنجیره اسیل SN-1 فسفولیپید را می شکند و فسفولیپازهای A2 که زنجیره اسیل SN-2 را می شکند. فسفولیپازهای A2 عبارتند از:

• فسفولیپازهای خارج سلولی A2 زهر مار، خزنده و حشرات
• فسفولیپاز پانکراس
• فسفولیپازهای داخل سلولی A2

فسفولیپاز پانکراس

فسفولیپاز پانکراس- کلاس A2 فسفولیپاز (EC 3.1.1.4)، یک آنزیم لیپولیتیک که چربی های غذا (تری گلیسیرید) را تجزیه می کند. این به شکل پروآنزیم پروفسفولیپاز پانکراس ترشح می شود که در روده کوچک توسط تریپسین فعال می شود (Sablin OA و دیگران). اسیدیته مطلوب برای فعالیت کاتالیزوری فسفولیپاز پانکراس PH 7.5-9.0 است. در حضور Ca 2+ (که کوآنزیم فسفولیپاز است) به عنوان یک آنزیم عمل می کند.

در طی برش هیدرولیتیک لسیتین صفرا توسط فسفولیپاز A، لیزولسیتین تشکیل می شود. متابولیسم بیشتر لیزولسیتین توسط فسفولیپاز B کاتالیز می شود که توسط اسیدهای صفراوی مهار می شود (Maev I.V. et al.)

نقش فسفولیپاز در ایجاد برخی از اشکال پانکراتیت

با نارسایی پاپیلای اصلی اثنی عشر و افزایش فشار در دوازدهه، رفلاکس صفرا یا محتویات دوازدهه به مجاری پانکراس امکان پذیر است. صفرا که وارد مجاری پانکراس می شود می تواند در معرض فسفولیپاز پانکراس قرار گیرد که قبلاً توسط تریپسین فعال شده است و منجر به تشکیل لیزولسیتین می شود که با نفوذ به فضای بین بافتی پانکراس باعث آسیب عمیق به سلول ها می شود.

آیا می دانستید که بدن ما برای زنده ماندن به اکسیژن نیاز دارد؟ در واقع هر سلول بدن ما به آن نیاز دارد. سلول ها از اکسیژن برای تولید انرژی به شکل ATP یا آدنوزین تری فسفات، یک مولکول حیاتی که «ارز انرژی سلول» نیز نامیده می شود، استفاده می کنند. سلول‌ها از آن برای «پرداخت» مولکول‌ها برای نوع خاصی از کار استفاده می‌کنند. این فرآیند مانند یک کارخانه بزرگ است که کارگران وظایف مختلفی را که برای عملکرد موفقیت آمیز آن لازم است انجام می دهند و به عنوان پرداخت مولکول های ATP را دریافت می کنند. بنابراین معلوم می‌شود که میتوکندری‌های سلول‌ها اکسیژن دریافت می‌کنند و ATP تولید می‌کنند تا حقوق کارگران را با استفاده از فرآیندی به نام فسفوریلاسیون اکسیداتیو تولید کنند، و میتوکندری‌ها به نوعی «دفترداری» کارخانه هستند، درست است؟ وقتی سلول اکسیژن کافی دریافت نمی کند، و "حفظ حساب" ATP تولید نمی کند، که باید به عنوان پرداختی برای کار کارگران به آنها منتقل شود، آنگاه کل کارخانه سلولی ممکن است آسیب ببیند. این فرآیند هیپوکسی نامیده می شود که در آن "hypo-" به معنای "زیر نرمال" و "oxia" به معنای "غنی سازی اکسیژن" است. هنگامی که اکسیژن وارد بدن می شود، معمولاً بلافاصله به «حفظ حساب»، به عبارت دیگر، در غشای داخلی میتوکندری، جایی که فرآیند فسفوریلاسیون اکسیداتیو انجام می شود، ختم می شود. اکسیژن در یکی از آخرین مراحل فرآیند استفاده می شود و به عنوان گیرنده الکترون عمل می کند. این به پایان فرآیند تولید ATP کمک می کند. به همین دلیل است که بدون اکسیژن، ما نمی توانیم فرآیند فسفوریلاسیون اکسیداتیو را کامل کنیم و بر این اساس، ATP تولید کنیم. اما چرا اگر «اداره حسابداری» تولید ATP را متوقف کند، کارخانه از هم می پاشد؟ چرا او کار را متوقف نمی کند؟ استراحت کن؟ وقتی برخی از کارگران کار خود را انجام نمی دهند، اوضاع کمی از کنترل خارج می شود. یکی از این کارگران بسیار مهم، پمپ سدیم پتاسیم است که در غشای سلولی قرار دارد و به عنوان یک "پریز" عمل می کند که میزان سدیم ورودی به سلول را تنظیم می کند. در واقع، به سادگی سدیم اضافی را که هر بار وارد سلول می‌شود، پمپ می‌کند و اختلاف غلظت‌ها را حفظ می‌کند. این فرآیند همچنین از ورود مولکول های آب به سلول جلوگیری می کند. تصور کنید: مولکول های آب می توانند آزادانه به همه جا نفوذ کنند. آنها دائماً در حال حرکت به جلو و عقب هستند، اما تمام یون‌های سدیم که در یک طرف سلول قرار دارند، از نظر فیزیکی سعی می‌کنند از ورود آب به آن جلوگیری کنند، بنابراین با گذشت زمان، مولکول‌های آب بیشتر و بیشتر در همان سمت با سدیم جمع می‌شوند. کلمات، آنها در واقع به دام افتاده اند. بنابراین، معلوم می شود که هر چه مولکول های سدیم بیشتری داشته باشیم، مولکول های آب بیشتری جمع می شوند. با این حال، پمپ ما این کار را به صورت رایگان انجام نمی دهد. او به مولکول های ATP نیاز دارد. بدون آنها، پمپ سدیم را متوقف می کند، که به نوبه خود شروع به نفوذ به داخل سلول می کند ... تا زمانی که اختلاف غلظت کاهش یابد، به نفوذ ادامه می دهد. بنابراین با کمتر شدن ذرات سدیم از خارج و جلوگیری از ورود مولکول های آب به داخل سلول، آب بعد از سدیم شروع به نفوذ به داخل سلول می کند و در نتیجه سلول متورم می شود. هنگامی که یک سلول متورم می شود، موارد زیر رخ می دهد. به طور معمول، هر غشای سلولی دارای میکروویل‌های کوچکی است که شبیه انگشتان کوچک است، که سطح سلول را افزایش می‌دهد و در نتیجه به سلول اجازه می‌دهد تا مواد بیشتری را جذب کند. همانطور که سلول متورم و متورم می شود، آب این انگشتان کوچک را پر می کند، که باعث کاهش سطح سلول می شود و به دلیل کاهش ناحیه جذب مولکول ها سخت تر می شود. سلول ممکن است به دلیل مقدار زیاد آب متورم یا تغییر شکل دهد. این نشانه آن است که اسکلت سلولی شروع به شکستن می کند و آب شروع به نفوذ به داخل چیزی می کند که شبیه یک حباب نرم است. در نهایت، شبکه آندوپلاسمی دانه‌ای یا ER دانه‌ای شروع به متورم شدن می‌کند و خود سلول نیز متورم می‌شود. در سطح ER دانه ای تعداد زیادی ریبوزوم وجود دارد که برای تولید پروتئین ضروری هستند. با این حال، هنگامی که ER دانه ای متورم می شود، ریبوزوم ها جدا می شوند و ساخت پروتئین را متوقف می کنند، بنابراین روند سنتز پروتئین متوقف می شود. اما این بدان معنا نیست که تمام مولکول های ATP بلافاصله ناپدید می شوند. هنگامی که ما کمبود اکسیژن داریم و فسفوریلاسیون اکسیداتیو متوقف می شود، سلول های ما خوشبختانه می توانند راه دیگری برای دریافت ATP پیدا کنند. به آن گلیکولیز بی هوازی می گویند که در آن «بی هوازی» به معنای «بی هوازی» است. این یک نوع مولد پشتیبان ATP است که البته کارآمد نیست، اما می تواند در هر 1 مولکول اکسیژن حدود 2 مولکول ATP تولید کند، در حالی که فرآیند فسفوریلاسیون اکسیداتیو حدود 30-36 مولکول تولید می کند. ژنراتور پشتیبان کمک می کند، اما همچنین محصول جانبی اسید لاکتیک تولید می کند که سطح pH را در سلول کاهش می دهد. یک محیط اسیدی تر می تواند خواص طبیعی پروتئین ها و آنزیم ها را تغییر دهد یا از بین ببرد. با این حال، همه چیز چندان بد نیست. پدیده بسیار مهم دیگری نیز در سلول رخ می دهد. فرآیندهایی که در آن شرکت می کند از نظر تئوری برگشت پذیر هستند. این بدان معنی است که اگر بدن ما شروع به دریافت اکسیژن و تولید مجدد ATP کند، آنگاه همه تغییرات می توانند معکوس شوند. اگرچه هنوز هم می توان صدمات جبران ناپذیری به سلول وارد کرد، اما پس از مدتی. همانطور که یک پمپ سدیم-پتاسیم وجود دارد، یک پمپ کلسیم نیز وجود دارد که به جلوگیری از ورود کلسیم اضافی به سلول کمک می کند. اما اگر این روند متوقف شود، کلسیم شروع به تجمع می کند، و این در حال حاضر بد است. اول، کلسیم آنزیم‌های خاصی را فعال می‌کند که بهتر است از آن‌ها اجتناب شود، مانند پروتئازها، که می‌توانند پروتئین‌ها را تجزیه کنند و اسکلت سلولی را که برای حفظ «کارخانه»، ساختار ساختاری آن عمل می‌کند، از بین ببرند. اندونوکلئازهایی که DNA، ماده ژنتیکی سلول ها را تجزیه می کنند، نیز می توانند فعال شوند. اما برگردیم به اسید لاکتیک. اگر مقدار زیادی از آن در سلول انباشته شود و محیط اسیدی تر شود، غشای لیزوزومی می تواند از بین برود که حاوی آنزیم های هیدرولیتیک است که برای تجزیه مولکول های بزرگ عمل می کنند. هنگامی که این آنزیم ها خارج از غشا هستند، توسط کلسیم نیز فعال می شوند. در این صورت آنها شروع به تجزیه هر چیزی که به میدان دیدشان می رسد می کنند و در واقع شروع به هضم سلول از داخل می کنند سپس فسفولیپاز فعال می شود که در واقع فسفولیپیدها را تجزیه می کند. و از آنجایی که غشاء از فسفولیپیدها ساخته شده است، می توان آن را از بین برد که مهمترین نشانه آسیب غیر قابل برگشت خواهد بود. هنگامی که غشاء از بین می رود، آنزیم هایی که به تازگی لیست کردیم به همراه سایر آنزیم ها می توانند وارد جریان خون شده و آسیب جدی به بدن وارد کنند. اما بیایید به کلسیم برگردیم. همانطور که ممکن است متوجه شده باشید، فعال شدن آنزیم تنها تاثیر کلسیم بر سلول ها نیست. کلسیم می تواند وارد میتوکندری شود و باعث ایجاد آبشاری از سیگنال ها شود و غشای میتوکندری را برای مولکول های کوچک نفوذپذیرتر کند، بنابراین مولکول هایی که به طور معمول در سیتوکروم c میتوکندری باقی می مانند به داخل سیتوزول نفوذ می کنند. این یک نشانه مطمئن است که همه چیز خوب پیش نمی رود. در واقع، این یک نوع آنالوگ از یک دکمه خود تخریبی است که فرآیندی به نام آپوپتوز را شروع می کند، به عبارت دیگر، این یک مرگ برنامه ریزی شده سلولی است. چیزی شبیه خودکشی سلولی در این مرحله سلول در بهترین شرایط نیست، درست است؟ در نتیجه، همه اینها فقط به دلیل کمبود اکسیژن یا هیپوکسی اتفاق می افتد.

محتوا
مقدمه
1. فسفولیپازها
1.1 طبقه بندی. خواص
1.2 فسفولیپاز C - سیستم اینوزیتول-3-فسفات
2. فسفولیپازهای A2
2.1 اطلاعات عمومی (واکنش، کشف، ساختار)
2.2 طبقه بندی و دارایی
2.2.1 سیتوزولی PLA2
2.2.2 ترشحی PLA2
2.2.3 FLA2 مستقل از کلسیم
2.3 ویژگی بستر
2.4 مهارکننده های PLA2
2.4.1 مهار غیر رقابتی
2.4.2 بازداری رقابتی


2.7 نقش بیولوژیکی PLA2
کتابشناسی - فهرست کتب

مقدمه
فسفولیپازها (انگلیسی فسفولیپاز) آنزیم هایی از کلاس هیدرولاز هستند که هیدرولیز فسفوگلیسریدها را کاتالیز می کنند... بسته به موقعیت پیوند قابل هیدرولیز در فسفولیپید، 4 کلاس اصلی فسفولیپاز وجود دارد: A، B، C و D.
/>
لیزوفسفولیپیدها توسط فسفولیپازهای L شکافته می شوند (وجود فسفولیپازهای L1 و L2 از نظر موقعیتی خاص ثابت نشده است). فسفولیپاز B یک نام منسوخ است. داروهایی با فعالیت از نوع فسفولیپازهای A و L.
/>
X - باقیمانده کولین، سرین، میئوینوزیتول و غیره. برای فسفولیپازها L1R2=C(O)R4، R3=H. برای فسفولیپازها L2 R2=H، R3=C(O)R4
هر یک از خانواده‌های فسفولیپازها ناهمگن هستند و شامل آنزیم‌هایی می‌شوند که از نظر وزن‌های مولکولی، ترکیب زیر واحدها و سایر ویژگی‌ها به طور قابل‌توجهی با هم تفاوت دارند. تمام فسفولیپازها به طور فعال هیدرولیز را در فصل مشترک فسفولیپید-آب کاتالیز می کنند. بسترهای محلول در آب را به آرامی هیدرولیز کنید.
فسفولیپاز A1 - (EC 3.1.1.32، انگلیسی phospholipase A1) زنجیره اسیل SN-1 را جدا می کند.
فسفولیپاز A2 - (EC 3.1.1.4، انگلیسی فسفولیپاز A2) زنجیره اسیل SN-2 را جدا می کند.
فسفولیپاز B-(لیزوفسفولیپاز، فسفولیپاز انگلیسی B) هر دو زنجیره اسیل SN-1 و SN-2 را جدا می کند. فسفولیپازی که فعالیت های فسفولیپاز A1 و A2 را دارد، یعنی می تواند زنجیره فسفولیپید آسیل را در موقعیت های sn-1 و sn-2 هیدرولیز کند.
فسفولیپاز C - (EC 3.1.4.3، انگلیسی فسفولیپاز C) پیوند بین باقیمانده گلیسرول فسفولیپید و گروه فسفات قطبی را با تشکیل دی آسیل گلیسرول و یک گروه قطبی حاوی فسفات هیدرولیز می کند.
فسفولیپاز D - (EC 3.1.4.4، انگلیسی فسفولیپاز D) پیوند بین گروه فسفات و گروه الکل را هیدرولیز می کند، در حالی که اسید فسفاتیدیک و الکل آزاد می شوند. 2 ایزوفرم از این فسفولیپاز D1 و D2 وجود دارد.
فسفولیپازها نقش مهمی در متابولیسم لیپید در موجودات زنده دارند. آنها برای تعیین ساختار فسفوگلیسریدها و محل آنها در غشاها استفاده می شوند.

1. فسفولیپازها.
1.1 طبقه بندی. خواص
در واقع، چندین فسفولیپاز از گروه A وجود دارد، آنها بخشی جدایی ناپذیر از بسیاری از بافت ها و ترشحات موجودات زنده هستند.
فسفولیپازهای A1 در اکثر موارد آنزیم های درون سلولی هستند که اغلب به غشاء متصل می شوند و در کوآنزیم مورد نیاز نیستند. وزن مولکولی آنها بین 15-90 هزار تغییر می کند؛ فعالیت کاتالیزوری مطلوب در pH 4.0 (برای آنزیم های لیزوزومی) یا 8.0-9.5 (برای آنزیم های میکروزوم ها، غشای پلاسما و سیتوزول) آشکار می شود. به طور گسترده در بافت های حیوانی (کبد، قلب، مغز) و در میکروارگانیسم ها (Bacillus subtilis، B. megateiium، Mycobacter phlei، Escherichia coli) توزیع می شود.
فسفولیپازهای A1 زنجیره آسیل فسفولیپید را در موقعیت sn-1 جدا می کنند. تحت تأثیر فسفولیپاز A1 بر روی فسفولیپید، 1-lysophospholipid و یک اسید چرب تشکیل می شود. فسفولیپاز جزء فعال زهر مار همولیتیک است.
فسفولیپازهای A2 بیشترین بررسی‌شده‌ترین نمایندگان فسفولیپازها هستند. 3 گروه از فسفولیپازهای A2 وجود دارد: 1) آنزیم های سم مار، خزنده و حشرات که به شکل تعداد زیادی ایزوفرم وجود دارد. 2) آنزیم های پانکراس پستانداران تولید شده در بدن به عنوان زیموژن (پیش سازهای با وزن مولکولی بالاتر) و فعال شده توسط تریپسین. 3) آنزیم های داخل سلولی از خون و بافت حیوانات، که در میان آنها هر دو محلول و متصل به غشاء وجود دارد.
فسفولیپازهای A2 از دو زیرگروه اول آنزیم های محلول در آب با وزن مولکولی 11-19 هزار هستند (بعضی از آنها به عنوان دایمر فعال هستند) به دلیل تعداد زیاد (7-6) پیوندهای دی سولفیدی پایداری بالایی دارند. فعالیت کاتالیزوری بهینه در pH 7.5-9.0. pI از 4.0 تا 10.5؛ کوآنزیم - Ca2+. برای بسیاری از نمایندگان این زیر گروه های فسفولیپازها، ساختارهای اولیه و فضایی شناخته شده است. بقایای هیستیدین و اسید آسپارتیک در محل فعال یافت شد. خواص فسفولیپازهای داخل سلولی A2 (سومین زیر گروه) به محلی سازی درون سلولی آنزیم بستگی دارد. وزن مولکولی آنها 12-75 هزار است. فعالیت کاتالیزوری مطلوب در pH 4.2-9.0 برخی از آنزیم های این زیر گروه حاوی کوآنزیم نیستند.
فسفولیپازهای B جدا شده از گیاهان، میکروارگانیسم ها، زهر زنبور عسل و بافت پستانداران. آنزیم های این گروه بسیار غیر اختصاصی هستند، هیدرولیز پیوندهای استری مختلف را کاتالیز می کنند و اثر لیتیک (مخرب) بر غشاهای بیولوژیکی دارند (که باعث سمیت آنها می شود). وزن مولکولی فسفولیپازهای B15-65 هزار، آنها نسبت به فسفولیپازهای A پایدارتر هستند. فعالیت کاتالیزوری مطلوب آنها در pH از 4.5 (آنزیم لیزوزومی) تا 10.0 (آنزیم های سمی) آشکار می شود. فسفولیپازها کوآنزیم ندارند و توسط اتیلن دی آمین تتراستیک اسید مهار نمی شوند. برخی از فسفولیپازهای B توسط دی ایزوپروپیل فلوروفسفات و بنزوئیک اسید p-chloromercuric مهار می شوند. مهارکننده های جهانی برای تمام فسفولیپازهای B - سورفکتانت ها.
فسفولیپاز B قادر است زنجیره آسیل فسفولیپید را در موقعیت های sn-1 و sn-2 هیدرولیز کند. به عنوان یک قاعده، فسفولیپاز بر روی لیزولسیتین (لیزوفسفاتیدیل کولین) اثر می کند که در نتیجه عمل فسفولیپاز A1 نالسیتین (فسفاتیدیل کولین) ایجاد می شود. .
فسفولیپازها در باکتری های کلستریدیوم، باسیلوس و سودوموناس و همچنین در سلول های پستانداران (کبد، مغز، پانکراس) یافت می شوند. برخی از آنها با توجه به گروه الکل مولکول سوبسترا با ویژگی دقیق مشخص می شوند، به عنوان مثال، به باقی مانده کولین (فسفولیپاز Cx) و میئوینوزیتول (فسفولیپاز C). وزن مولکولی فسفولیپازهای C از 23 تا 51 هزار است. یونهای Zn2+ برای آنها کوآنزیم و تثبیت کننده هستند. فعالیت کاتالیزوری مطلوب برای فسفولیپازهای Cx حدود pH 7 و در pH است.
فسفولیپاز C که پیوند فسفودی استر بین باقی مانده گلیسرول فسفولیپید و گروه فسفات قطبی را هیدرولیز می کند، به فسفودی استرازها و همچنین فسفولیپاز D تعلق دارد.
فسفولیپاز C توسط زیر واحدهای Gαq یا Gβγ پروتئین G فعال می شود. بنابراین، بخشی از یک گیرنده جفت شده با پروتئین G و مسیر سیگنال دهی مربوطه، یا بخشی از یک گیرنده گذرنده با فعالیت تیروزین کیناز ذاتی یا مرتبط است.
فسفولیپاز C فسفاتیدیل لینوزیتول (PIP2) را به دو واسطه ثانویه اینوزیتول تری فسفات (IP3) و دی آسیل گلیسرول (DAG) هیدرولیز می کند. این واسطه ها در مراحل بعدی مسیرهای سیگنال دهی درگیر می شوند. به طور خاص، آنها به ترتیب کانال های کلسیم شبکه آندوپلاسمی و پروتئین کیناز C را تعدیل می کنند.
فسفولیپاز D متعلق به گروهی از آنزیم های مهم است که عملکردهای مختلفی را در سیستم های زنده از جذب مواد مغذی تا سنتز ترکیبات فعال بیولوژیکی انجام می دهد. در گیاهان (سبزیجات، جلبک ها)، میکروارگانیسم ها در بافت های حیوانی یافت می شود. وزن مولکولی آنها 90-116 هزار است.فعالیت کاتالیزوری مطلوب در pH 4.7-8.0. سورفکتانت های کاتیونی فسفولیپازهای D را مهار می کنند، آنیونی - فعال می شوند.
فسفولیپاز D، اول از همه، فعالیت هیدرولیتیکی را نشان می دهد، که منجر به جدا شدن پیوند استری بین باقی مانده اسید کامپاتیدیک و الکل در مولکول های فسفولیپید (PL) می شود. در این مورد، دومی با هیدروژن جایگزین می شود، اما انتقال باقی مانده اسید فسفاتیدیک به انواع گیرنده های حاوی هیدروکسیل امکان پذیر است، که برای بیوتکنولوژی بسیار جالب است، زیرا فعالیت ترانس فسفاتیدیل کننده فسفولیپاز می تواند برای سنتز انواع مختلف استفاده شود. مواد مخدر
فسفولیپاز D به طور خاص فسفاتیدیل کولین را به نافسفاتیدیک اسید و کولین می شکافد و دومی را در سیتوپلاسم آزاد می کند.
/>/>/>
فسفاتیدیل کولین فسفاتیدیک اسید کولین
1.2 فسفولیپاز C - سیستم اینوزیتول-3-فسفات
فعال شدن غشای گوانیلات سیکلاز نه تحت تأثیر مستقیم مجموعه هورمونی گیرنده، بلکه به طور غیرمستقیم از طریق کلسیم یونیزه شده و سیستم های غشایی اکسیدان رخ می دهد. تحریک فعالیت گوانیلات سیکلاز، که اثرات استیل کولین را تعیین می کند، از طریق Ca2+ نیز انجام می شود. از طریق فعال سازی گوانیلات سیکلاز، اثر هورمون درون ادراری دهلیزی، یک آتریوپپتید، مشخص می شود. با فعال کردن پراکسیداسیون، گوانیلات سیکلاز هورمون اندوتلیال دیواره عروقی، اکسید نیتریک، یک عامل آرامش بخش اندوتلیال را تحریک می کند. تحت تأثیر گوانیلات سیکلاز، cGMP از GTP سنتز می شود که پروتئین کینازهای وابسته به cGMP را فعال می کند، که سرعت فسفوریلاسیون زنجیره های سبک میوزین را در عضلات صاف دیواره عروق کاهش می دهد و منجر به شل شدن آنها می شود.
در بیشتر بافت ها، اثرات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی cAMP و cGMP مخالف است. به عنوان مثال می توان به تحریک انقباضات قلب تحت تأثیر cAMP و مهار آنها توسط cGMP، تحریک انقباض عضلات صاف روده توسط cGMP و سرکوب cAMP اشاره کرد. cGMP تحت تأثیر فوتون های نوری، هیپرپلاریزاسیون گیرنده های شبکیه را فراهم می کند. هیدرولیز آنزیمی cGMP، و در نتیجه، خاتمه اثر هورمونی، با کمک یک فسفودی استراز خاص انجام می شود.
/>
واسطه سیگنال هورمونی توسط سیستم فسفولیپاز C-اینوزیتول-3-فسفات.
تشکیل یک مجتمع هورمونی گیرنده با مشارکت یک پروتئین G تنظیمی، فسفولیپاز C غشایی را فعال می کند که باعث هیدرولیز فسفولیپیدهای غشایی با تشکیل دو پیام رسان دوم می شود: اینوزیتول-3-فسفات و دی آسیل گلیسرول. اینوزیتول-3-فسفات منجر به آزادسازی Ca2+ از انبارهای درون سلولی می شود. اتصال کلسیم یونیزه شده به پروتئین تخصصی کالمودولین، پروتئین کینازها را فعال می کند و باعث فسفوریلاسیون پروتئین ها و آنزیم های ساختاری داخل سلولی می شود. دی اسیل گلیسرول میل ترکیبی پروتئین کیناز C را برای Ca2+ افزایش می دهد و به فعال شدن آن کمک می کند، که همچنین با فرآیندهای فسفوریلاسیون پروتئین به پایان می رسد. دی اسیل گلیسرول به طور همزمان راه دیگری برای واسطه اثر هورمونی، فعال کردن فسفولیپاز A2 و تشکیل پروستانوئیدها را درک می کند.
مجتمع گیرنده هورمونی با مشارکت پروتئین G تنظیمی منجر به فعال شدن آنزیم غشایی فسفولیپاز C می شود که باعث هیدرولیز فسفولیپیدهای غشاء با تشکیل دو پیام رسان دوم می شود: اینوزیتول-3-فسفات و دی آسیل گلیسرول. اینوزیتول-3-فسفات باعث آزاد شدن Ca2 + از انبارهای درون سلولی، عمدتاً از شبکه آندوپلاسمی می شود، کلسیم یونیزه شده به پروتئین تخصصی کالمودولین متصل می شود، که فعال شدن پروتئین کینازها و فسفوریلاسیون پروتئین های ساختاری داخل سلولی و آنزیم ها را تضمین می کند. به افزایش شدید میل پروتئین کیناز C به کلسیم یونیزه کمک می کند ، دومی بدون مشارکت کالمودولین فعال می شود که همچنین با فرآیندهای فسفوریلاسیون پروتئین به پایان می رسد.
دی اسیل گلیسرول به طور همزمان روش دیگری را برای واسطه اثر هورمونی با فعال کردن فسفولیپاز A2 اعمال می کند. تحت تأثیر آخرین فسفولیپیدهای غشایی، اسید آراشیدونیک تشکیل می شود که منبع تأثیرات متابولیکی و فیزیولوژیکی قوی مواد - پروستاگلاندین ها و لکوترین ها است. در سلول های مختلف بدن، یک یا مسیر دیگری برای تشکیل پیام رسان دوم غالب است که در نهایت اثر فیزیولوژیکی هورمون را تعیین می کند. از طریق سیستم در نظر گرفته شده از واسطه های ثانویه، اثرات آدرنالین (در ارتباط با گیرنده سالفا-آدرنرژیک)، وازوپرسین (در ارتباط با گیرنده V-1)، آنژیوتانسین-I، سوماتوستاتین و اکسی توسین تحقق می یابد.

2. فسفولیپازهای A2
2.1 اطلاعات عمومی (واکنش، کشف، ساختار)
فسفولیپاز A2 (K.F.3.1.1.4.) - آنزیمی که جدا شدن باقی مانده اسید چرب - لسیتین، سفالین - را از فسفولیپیدها کاتالیز می کند و آنها را به ترکیبات سمی تبدیل می کند که کشش سطحی را تا حد زیادی کاهش می دهد. این ترکیبات گلبول های قرمز و سایر ساختارهای سلولی و زیر سلولی را در خود حل می کنند و به همین دلیل به آن لیزولسیتین و لیزوکفالین می گویند.
در مولکول فسفولیپید، فسفولیپاز زهر زنبور عسل اسید چرب را از محل دوم مولکول جدا می کند و بنابراین فسفولیپاز A2 نامیده می شود. از سال 1897 (لانگر) به عنوان یک عامل افزایش دهنده فعالیت همولیتیک زهر زنبور عسل پس از افزودن لسیتین شناخته شده است. فسفولیپاز آنزیم مورد مطالعه در زهر زنبور عسل است. فسفولیپاز به عنوان یک آنزیم گوارشی در سال 1900 کشف شد. اکنون مشخص شده است که فسفولیپاز A2 (PLA2) بیش از یک آنزیم گوارشی است. این به طور گسترده ای در اکثر سلول ها و بافت های پستانداران وجود دارد و به عنوان تنظیم کننده متابولیسم، حفظ هموستاز غشایی و تشکیل پیش سازهای ایکوزانوئید عمل می کند.
بسته به وزن مولکولی، محلی سازی سلولی و حضور یون های Ca2+، PLA2 سیتوزولی، PLA2 یا PLA2 ترشحی و مستقل از کلسیم غشای خارجی مشخص می شود.
PLA2 شامل چندین خانواده پروتئین غیر مرتبط با فعالیت آنزیمی مشترک است. دو خانواده مهم، فسفولیپازهای ایتوزولی A2 ترشح می شوند.
سیتوزولی PLA2:
فسفولیپازهای داخل سلولی و همچنین خارج سلولی آنزیم های وابسته به کلسیم هستند. با این حال، از نظر ساختاری، آنها در فسفولیپازهای برش بسیار متفاوت هستند. به عنوان یک قاعده، آنها بسیار بزرگتر هستند (بیش از 700 اسید آمینه) و حاوی یک دامنه C2 هستند که آنزیم را به غشای سلولی هدایت می کند. این فسفولیپازها عمدتاً در مسیرهای پیام رسانی سلولی مانند پاسخ التهابی نقش دارند. تحت تأثیر PLA2، اسید آراشیدونیک، پیش ساز ایکوزانوئیدها، مانند مولکول های سیگنالینگ فعال مانند لکوترین ها و پروستاگلاندین ها، می تواند در سلول تشکیل شود.
غشای خارجی FLA2:
باکتری های گرم منفی حاوی PLA2 در غشای خارجی با طیف وسیعی از ویژگی هستند. در E.coli (اشریشیا کلی)، این آنزیم به دلیل افزایش نفوذپذیری غشاء با افزایش سطح لیزوفسفولیپیدها و اسیدهای چرب در غشاء، در آزادسازی سم باکتریوسین از سلول نقش دارد.
PLA2 ترشح شده:
اشکال خارج سلولی فسفولیپازها از مارهای سمی مختلف، زنبورها و زنبورها جدا شده است. آنها همچنین در تمام بافت های پستانداران و در باکتری ها یافت می شوند. فعالیت این فسفولیپازها مستلزم وجود کلسیم است.
/>
فسفولیپاز A2 زهر زنبور عسل در فضای خارج سلولی نزدیک لایه لیپیدی. گروه های قطبی فسفولیپیدها بین صفحات زرد و قرمز قرار دارند. زنجیره های آسیلی غیر قطبی - بین صفحات قرمز و سیاه.
فسفولیپاز پانکراس یک آنزیم گوارشی است و در هضم لیپیدهای رژیم غذایی نقش دارد. فسفولیپازهای سمی به دلیل لیز شدن سلول های قربانی در بی حرکتی قربانی نقش دارند.
2.2 طبقه بندی و خواص
2.2.1 سیتوزولی PLA2
تاریخچه فسفولیپازهای سیتوزولی گروه A2 در سال 1991 آغاز شد، زمانی که یک پروتئین با وزن مولکولی 85 کیلو دالتون از سیتوزول سلول های حیوانی مختلف جدا و کلون شد، که علاوه بر وزن مولکولی، با فسفولیپازهایی که در آن زمان شناخته شده بود، متفاوت بود. عدم وجود پل های دی سولفیدی و حساسیت به کلسیم. بعدها، غربالگری پایه نوکلئوتیدی دو پارالوگ دیگر، cPLA2b و cPLA2g را نشان داد. اولین پروتئین یافت شده cPLA2a نام داشت. این آنزیم که "سیتوزولی" نامیده می شود، با این وجود بر روی غشای شبکه سیتوپلاسمی و هسته عمل می کند. این ایزوفرم PLA2 در بسیاری از سلول ها و بافت ها وجود دارد: مغز، کلیه، طحال، ریه ها، ماکروفاژها، نوتروفیل ها، سلول های اپیتلیال آلوئولی و غیره. این آنزیم در نتیجه فسفوریلاسیون توسط پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن و پروتئین کیناز C فعال می شود. سیتوکین‌های خارج سلولی، میتوژن‌ها، هورمون‌ها، انتقال‌دهنده‌های عصبی، رشد فاکتورها، آنتی‌ژن‌ها، اندوتوکسین‌ها، و همچنین شرایط فیزیکی و استرس‌زای خاصی از جمله نور فرابنفش و استرس اکسیداتیو، باعث فعال‌سازی و سنتز سیتوزولی PLA2 می‌شوند.
ویژگی اصلی این ایزوتیپ آنزیمی این است که به طور فعال سوبستراهای فسفولیپیدی حاوی اسید آراشیدونیک را در موقعیت دوم هیدرولیز می کند. این انتخاب سوبسترا، عملکرد اصلی آنزیم را در سلول تعیین می کند.
ساختار فضایی این آنزیم با روش تشدید مغناطیسی هسته ای مشخص شد. داده های ساختاری اشعه ایکس کمی بعد ظاهر شد. آنزیم پیوند استری را در موقعیت sn-2 هیدرولیز می کند. برای تجلی حداکثر فعالیت آنزیمی، غلظت نسبتاً کم یون های Ca2+ (حدود 500 نانومول در لیتر) مورد نیاز است. علاوه بر این، حضور یون‌های Ca2+ نه برای تجلی فعالیت آنزیمی، بلکه برای اتصال پروتئین به سطح غشاهای داخل سلولی یا در مورد سیستم‌های مدل، به ذرات لیپیدی ضروری است. این آنزیم عملاً گروه ها را در موقعیت sn-1 متمایز نمی کند، اما برای فسفولیپیدهای حاوی اسید آراشیدونیک در موقعیت sn-2 ویژگی دارد. اسیدهای اولئیک (18:1) و لینولئیک (18:2) تحت تأثیر cPLA2a به طور ضعیفی از فسفولیپیدهای مربوطه جدا می شوند، اما اسیدهای a-linoleic (18:3) و ایکوزاپنتانوئیک (20:5) نسبت به اسید آراشیدونیک برتری دارند. . از آنجایی که این اسیدها در غلظت های بسیار کم در سلول ها یافت می شوند، فسفولیپیدها با اسید آراشیدونیک در موقعیت sn-2 به سوبسترای اصلی تبدیل می شوند. آنزیم برای جانشین در موقعیت sn-3 اختصاصیتی نشان نمی دهد، اما با این وجود، دی اسیل گلیسرول سوبسترای آن نیست. علاوه بر فعالیت اصلی، آنزیم همچنین فعالیت لیزوفسفولیپاز را نشان می دهد، به عنوان مثال، می تواند آسیل را از موقعیت sn-1 فعالیت لیزوفسفولیپید جدا کند. اهمیت بیولوژیکی این فعالیت در حال مطالعه است.
پارالوگ های سیتوزولی PLA2 اخیراً شرح داده شده است و اطلاعات در مورد خواص آنها محدود است. مشخص شده است که پروتئین cPLA2g حاوی یک دامنه اتصال دهنده کلسیم نیست و به یون های Ca2+ بستگی ندارد. تنها 29 درصد شباهت با توالی اسید آمینه پروتئین cPLA2a دارد. از طریق یک محل پالمیتیک به غشاء متصل می شود و عمدتاً فعالیت ایزوفسفولیپاز را نشان می دهد. مشارکت آن در توسعه آپوپتوز ماکروفاژ نشان داده شده است. پروتئین cPLA2b دارای یک دامنه اتصال به کلسیم است، اما همچنین عمدتاً خواص PLA1 را نشان می دهد، به عنوان مثال. پیوند sn-1 را هیدرولیز می کند.
آنزیم cPLA2a در حال حاضر تنها فسفولیپازی است که برای اسید آراشیدونیک خاص است و به جای اینکه به صورت مونومر در محلول باشد، سوبستراهای موضعی در غشاء را ترجیح می دهد. شاید این ویژگی ها را بتوان با وجود یک "درپوش" آمفی دوست (باقی مانده اسید آمینه 413) توضیح داد. -457) از ورود باقی مانده اسید چرب فسفولیپید به تونل محل فعال در صورت عدم موضع گیری پروتئین روی غشاها جلوگیری می کند. "درب" زمانی باز می شود که پروتئین با لیپیدهای سانیون غشاء تعامل کند. کاتالیز سطحی انجام شده توسط این آنزیم به شدت در حال مطالعه است.
کشف سیتوزولی PLA2 در اواخر دهه 1980. انگیزه ای برای مطالعه تنظیم سنتز ایکوزانوئید در بدن در طی یک پاسخ حاد به محرک های مختلف التهابی ایجاد کرد. تنظیم فسفولیپاز ترشحی در سطح بیان آن اتفاق می افتد و فعالیت فسفولیپاز سیتوزولی در سلول نیز در سطح فعالیت آنزیم تنظیم می شود. عوامل اصلی موثر بر فعالیت سیتوزولی فسفولیپاز غلظت Ca2+ داخل سلولی و فسفوریلاسیون این آنزیم توسط پروتئین کینازها می باشد.غلظت یون های Ca2+ و فعالیت پروتئین کینازهای مختلف در سلول پارامترهای بسیار حساسی هستند که در عرض چند ثانیه تغییر می کنند. پس از اتصال لیگاندهای آگونیست به گیرنده های سلولی مربوطه، که تنظیم موثر تولید سلولی اسید آراشیدونیک و بر این اساس، سنتز ایکوزانوئیدها را ممکن می سازد.
در سلول‌های غیرفعال، غلظت Ca2+ داخل سلولی معمولاً بین 30-100 نانومول در لیتر است. هنگامی که گیرنده های مختلف فعال می شوند، غلظت یون های Ca2+ می تواند به 1-3 میکرومول در لیتر برسد. در تعدادی از مطالعات، نشان داده شد که افزایش فعالیت سیتوزولی PLA2 در محدوده غلظت یون های Ca2 + 150-800 نانومول در لیتر رخ می دهد. با افزایش غلظت یون های Ca2 + فسفولیپاز به غشاها مهاجرت می کند و به آنها می چسبد و پس از آن هیدرولیز فسفولیپیدها آغاز می شود.
اتصال فسفولیپاز به غشاء به دلیل وجود دامنه C2 در پروتئین رخ می دهد:
/>
دامنه C2 با دامنه های مشابه پروتئین کیناز C، GTPase و فسفولیپاز C همولوگ است. همه این پروتئین ها در حضور یون های Ca2+ به غشاها متصل می شوند. وجود غلظت کافی از یون های Ca2+ برای جهت گیری فسفولیپاز و اتصال آن ضروری است. . در غیاب یون های Ca2+، آنزیم نسبت به سوبستراهای محلول مانند 1-palmityl-2-lysophosphatidylcholine فعال باقی می ماند.
بسته به نوع آگونیست، غلظت یون های Ca2+ در سلول به روش های مختلف متفاوت است. برخی از آگونیست ها باعث رشد کوتاه مدت داخل سلولی آن می شوند. تحت تأثیر این آگونیست ها، غلظت یون های Ca2+ پس از افزایش شدید در عرض 1-2 دقیقه به سطح اولیه باز می گردد. برخی دیگر باعث افزایش طولانی مدت غلظت یون های Ca2+ می شوند و افزایش غلظت یون های Ca2+ از 5-30 دقیقه در سلول باقی می ماند. بر روی سلول های اپیتلیال نشان داده شد که برای اتصال پایدار PLA2 به سطح غشاهای بیولوژیکی، غلظت یون های Ca2+ به مدت 5 دقیقه افزایش یافته و با افزایش کوتاه در 1-2 دقیقه، تجزیه معکوس پروتئین به سیتوزول بدون آزاد شدن قابل توجه اسید آراشیدونیک رخ می دهد. اگر غلظت بالای یون های Ca2+ به مدت 5 دقیقه یا بیشتر باقی بماند، آنگاه فسفولیپاز سیتوزولی PLA2 روی غشاء باقی می ماند و هیدرولیز فسفولیپیدها حتی پس از بازگشت غلظت Ca2+ داخل سلولی به مقادیر طبیعی ادامه می یابد.
برای تجلی حداکثر فعالیت فسفولیپاز با افزایش کوتاه مدت غلظت یون های Ca2+ در داخل سلول، فسفوریلاسیون پروتئین توسط کینازها نیز ضروری است. آزمایشات آزمایشگاهی نشان داده اند که فسفولیپاز سیتوزولی را می توان توسط پروتئین کیناز C، پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن p42/p44 یا پروتئین کیناز A فسفریله کرد، اما تنها فسفوریلاسیون توسط پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن (MAPKs) منجر به افزایش قابل توجهی در فعالیت فسفولیپاز می شود. . پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن، فسفولیپاز را در Ser-505 فسفریله می کنند. در برخی موارد، فسفوریلاسیون است که تظاهرات فعالیت فسفولیپاز را در سلول تعیین می کند.
بنابراین، سیتوزولی فسفولیپاز هم در تنظیم سنتز ایکوزانوئید در طی یک پاسخ حاد سلولی به محرک های مختلف پیش التهابی و هم در برخی موارد در یک پاسخ تاخیری نقش دارد.عوامل اصلی تنظیم کننده فعالیت سیتوزولی فسفولیپاز غلظت Ca2+ داخل سلولی و فعالیت پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن فعالیت آنزیم می تواند در اولین دقایق پس از تحریک سلول به میزان قابل توجهی افزایش یابد. جابجایی آنزیم در طول فعال سازی به دو دلیل مهم است: 1) به آنزیم اجازه می دهد تا با فسفولیپیدهای غشایی تعامل کند. 2) لیپاز انتخابی اسید آراشیدونیک را به محل آنزیم ها برای سنتز پروستاگلاندین ها (PG) و لکوترین ها (LT) می رساند، یعنی به طور بالقوه امکان تشکیل محفظه ای وجود دارد که در آن اسید آراشیدونیک آزاد شده مستقیماً متابولیزه می شود.
2.2.1 ترشحی PLA2
PLA2 ترشحی دارای وزن مولکولی حدود 14 کیلو دالتون است، با نیاز مطلق به یون های Ca2+ در غلظت های میلی مولار برای فعالیت کاتالیزوری مشخص می شود، pH بهینه در محدوده 7-9 است.
در حال حاضر ده نوع PLA2 ترشحی (IV، IIA، IIC، IID، IIE، IIF، III، V، X، XII) توصیف شده است که در ساختار اولیه و محل پل های دی سولفیدی متفاوت است. همه انواع فسفولیپازهای ترشحی پروتئین های کروی غنی از سیستئین (5-8 پل دی سولفیدی) هستند که ثبات آنزیم از جمله مقاومت در برابر پروتئولیز و دناتوره شدن را تضمین می کند. آنزیم انتخابی برای ترکیب اسیدهای چرب فسفولیپیدها نشان نمی دهد، اما ترجیحاً فسفولیپیدهای دارای بار منفی (اسید فسفاتیدیک و فسفاتیدیل گلیسرول) را هیدرولیز می کند.
برای مدت طولانی، تنها یک PLA2 به وفور در مایع پانکراس (نوع IB) وجود داشت. در سال 1989، فسفولیپاز نوع IIA کشف و شبیه سازی شد که در گرانول های ترشحی پلاکت ها ذخیره می شود و در محل های التهابی مانند مایع سینوویال در آرتریت روماتوئید به شدت افزایش می یابد. این پروتئین ها بسیار شبیه به پروتئین های زهر مار هستند. در میان پروتئین‌های زهر زنبور عسل و مارمولک، فسفولیپازهای دیگری یافت شده‌اند که به نوع III اختصاص دارند. در پستانداران، پروتئین مربوط به این نوع تنها در سال 2000 کشف شد ... دوره جدیدی در مطالعه فسفولیپازهای ترشحی در سال 1994 آغاز شد، زمانی که پروتئین های انواع IIC و V کشف شد. این کشف منجر به تجدید نظر در نقش این خانواده از پروتئین ها در تنظیم عملکرد سلولی و جستجوی فشرده برای پروتئین های مشابه جدید. پروتئین های نوع X، IID، IIE و IIIF، XII کشف شده اند.
همه این پروتئین ها (به جز پروتئین نوع III) دارای وزن مولکولی 14-17 کیلو دالتون هستند، حاوی هیستیدین در محل کاتالیزوری هستند و فعالیت فسفولیپاز را در حضور غلظت های میلی مولار کلسیم از خود نشان می دهند. آنها دارای توالی اسید آمینه بسیار حفاظت شده در ناحیه کاتالیزوری (DXCCXXHD) و ناحیه حلقه اتصال کلسیم (XCGXGG) و همچنین 6-8 پل سولفیدی حفاظت شده هستند. مرکز فعال همچنین حاوی آسپارتات است که همراه با حلقه اتصال کلسیم به عنوان یک محفظه برای یون Ca2+ عمل می کند.
آنزیم های این خانواده هیچ ویژگی خاصی برای گروه مرتبط با باقیمانده اسید فسفاتیدیک و یا برای گروه کاتیونی در موقعیت sn-2 نشان نمی دهند. وجود اشکال اکسید شده اسیدهای چرب در فسفولیپیدها باعث افزایش فعالیت فسفولیپازهای ترشحی می شود که نشان دهنده دخالت آنها در تنظیم ویسکوزیته غشاء تحت استرس اکسیداتیو است. از داده های تجزیه و تحلیل پراش اشعه ایکس دو گروه اول پروتئین ها، وجود یک کانال آبگریز، که مولکول فسفولیپید پس از اتصال سطحی پروتئین در سطح فسفولیپید وارد آن می شود، به دست می آید.
PLA2 ترشحی به طور اساسی در سلول‌های مختلفی که در ایجاد پاسخ‌های ایمنی و التهابی نقش دارند یافت می‌شود: ماکروفاژها، ماست سل‌ها، فیبروبلاست‌ها و بافت‌های اندام‌هایی مانند کبد، طحال، تیموس، مغز استخوان و روده. فعالیت آنزیم در سطح سلول با القای آن توسط محرک های التهابی مختلف (اینترلوکین-1 و اینترلوکین-6، فاکتور نکروز تومور، لیپوپلی ساکارید، اینترفرون-g، استرهای فوربول، فاکتور رشد عصبی) تنظیم می شود. مطابق با القای محرک‌های مختلف، پروموتر ژن IIA حاوی توالی‌های نوکلئوتیدی TATA و CAAT و همچنین توالی‌های اتصال فاکتورهای رونویسی مانند AP-1، C/EBP، CREB، NF-kB، STAT، PPA Rg است. . در برخی سلول ها، بیان PLA2 به فعال سازی اولیه فسفولیپاز سیتوزولی PLA2a بستگی دارد و فرض بر این است که محصولات مسیر 12/15-لیپوکسیژناز در تنظیم فسفولیپاز IIA نقش دارند. گلوکوکورتیکوئیدها (داروهای ضد التهابی استروئیدی) سرکوب کننده بیان فسفولیپاز IIA هستند.
تغییر در بیان فسفولیپاز IIA در بسیاری از موارد با مدولاسیون شاخه پروستاگلاندین آبشار اسید آراشیدونیک همراه است. بنابراین، تحریک با اینترلوکین-1 و فاکتور نکروز تومور، هر دو سنتز ترشح فسفولیپاز و سنتز پروستاگلاندین E2 و پروستاسیکلین را به ترتیب در سلول‌های مزانژیال یا اندوتلیال فعال کرد. هنگامی که آنتی بادی های فسفولیپاز به سلول ها اضافه شد، سنتز پروستاسیکلین تا حدی سرکوب شد. از نتایج به‌دست‌آمده در سال‌های اخیر، چنین استنباط می‌شود که فسفولیپازهای ترشحی (IIA و مشابه V, X) در فرآیندهای تولید سریع و تأخیری اسید آراشیدونیک و پروستانوئیدها نقش دارند.
لازم به ذکر است که افزودن فسفولیپازهای ترشحی به محیط خارج سلولی منجر به آزادسازی فعال اسید آراشیدونیک و سنتز پروستانوئیدها توسط سلول های فعال می شود، اما عملاً بر هیدرولیز فسفولیپیدها در غشای سلول های در حال استراحت تأثیر نمی گذارد.
علاوه بر نقش آنزیم مسئول حضور آراشیدونیک اسید، فسفولیپازهای ترشحی می توانند به عنوان مواد فعال فیزیولوژیکی عمل کنند. بنابراین، در ماست سل ها، مهارکننده های خاص فسفولیپازهای ترشحی بیان سیکلواکسیژناز-2 تحریک شده توسط فاکتور رشد عصبی را کاهش دادند. این اثر به خواص آنزیمی فسفولیپاز بستگی ندارد. مکانیسم این فرآیند مشخص نیست. این امکان وجود دارد که عملکرد PLA2 ترشحی به عنوان لیگاند گیرنده های خاص درگیر باشد.
در واقع، در سال 1995 نشان داده شد که پروتئین های خاصی وجود دارند که به فسفولیپاز نوع IB متصل می شوند (ثابت تفکیک کمپلکس حاصل 1 نانومول در لیتر است) و اثرات بیولوژیکی مختلفی از خود نشان می دهند. در طی 10 سال آینده، پروتئین های بسیار بیشتری، محلول و متصل به غشاء، کشف شد که قادر به اتصال فسفولیپاز ترشحی هستند. با این حال، تنها یکی از این پروتئین‌ها ویژگی‌های گیرنده «کلاسیک» را نشان می‌دهد که سیستم انتقال سیگنال درون سلولی را هنگامی که توسط یک یلیگاند متصل می‌شود، فعال می‌کند. این یک پروتئین نوع M یا sPLA2R است. ژن این پروتئین در کروموزوم دوم قرار دارد. توالی پروتئین دارای 75% همسانی در میان تعدادی از گونه های پستانداران است. این ژن 1 کپی دارد و هیچ شباهتی به ژن های دیگر ندارد. این پروتئین دارای وزن مولکولی 180-200 کیلو دالتون است، بخش قابل توجهی از آن در ناحیه خارج سلولی قرار دارد، در سیتوزول دنباله ای از 40 باقی مانده اسید آمینه وجود دارد. پروتئین بدون این ناحیه سیتوزولی به صورت محلول وجود دارد و نقش آن به عنوان یک مهارکننده اثرات فسفولیپازهای ترشحی نشان داده شده است. در انسان، پروتئین در پانکراس، ریه ها و کلیه ها بیان می شود. نقش مهم فعال شدن این گیرنده در ایجاد شوک اندوتوکسیک نشان داده شده است.
شکل، طرح مشارکت گیرنده فسفولیپاز ترشحی را در اجرای نقش بیولوژیکی آنزیم در سطح سلول نشان می دهد.
/>
این طرح نشان می‌دهد که چگونه اشکال فعال فسفولیپاز sPLA2-IB یا sPLA2-X فعالیت آنزیمی خود را نشان می‌دهند، که منجر به ظهور واسطه‌های لیپیدی می‌شود، و همچنین لیگاندهای با میل ترکیبی بالا برای گیرنده‌ای هستند که در غشای پلاسما قرار دارند. برهمکنش فسفولیپاز با گیرنده غشایی منجر به القای پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن (MAPK) و مسیر سیگنال دهی درون سلولی مربوطه می شود که واکنش های مختلف سلولی را تحریک می کند: تکثیر و مهاجرت سلولی و سنتز مواد فعال فیزیولوژیکی. هنگامی که تماس با غشا از بین می رود، گیرنده توانایی اتصال فسفولیپاز را حفظ می کند، که تنظیم فعالیت دومی را به عنوان یک آنزیم و به عنوان لیگاند ممکن می سازد.
بنابراین، فسفولیپازهای ترشحی نقش اساسی در توسعه و گسترش فرآیندهای التهابی در بدن دارند. بیان فسفولیپازهای ترشحی در انواع بیماری های التهابی به طور قابل توجهی افزایش می یابد. به همین دلیل، مهارکننده‌های انتخابی فعالیت آنزیمی پروتئین‌های این خانواده به‌عنوان یک کلاس بالقوه جدید از مواد ضد التهابی در حال توسعه هستند. برای جستجوی بازدارنده‌های فسفولیپازهای ترشحی، استفاده از روش‌های مدل‌سازی کامپیوتری امیدوارکننده است، زیرا این پروتئین‌های با وزن مولکولی کم (وزن مولکولی آنها در حدود 14 کیلو دالتون است) در حالت کریستالی به دست آمده‌اند، ساختار سه‌بعدی آنها شناخته شده است. دلایلی وجود دارد که باور کنیم در 5-10 سال آینده، بر اساس نتایج این مطالعات، فناوری های درمانی جدید و داروهای جدید ایجاد خواهد شد.
2.2.3 PLA2 مستقل از کلسیم
PLA2 کلاسیک مستقل از کلسیم (iPLA2-VIA) به شکل ولگومری وجود دارد و دارای چندین نوع اتصال است که حداقل دو مورد از آنها (VIA-1 و VIA-2) دارای فعالیت آنزیمی هستند. پروتئین iPLA2-VIA-1 دارای وزن مولکولی 85 کیلو دالتون است. حاوی 8 تکرار ankyrin در ناحیه N-پایانه، یک دامنه کاتالیزوری با یک توالی اسید آمینه مشخصه GXSXG، که در آن S-serine-465 به عنوان مرکز کاتالیز عمل می کند.همچنین یک توالی اتصال به ATP GXGXXG وجود دارد. در نزدیکی انتهای C (در ناحیه باقیمانده اسید آمینه 694-705) یک ناحیه اتصال برای کالمودولین وجود دارد. تشکیل کمپلکس پروتئینی iPLA2-VIA با کالمودولین فعال شده (یعنی در حضور یون های Ca2+) منجر به غیر فعال شدن این فسفولیپاز می شود. اگرچه هر دو شکل اتصال VIA-1 و VIA-2 دارای توالی های اتصال به ATP هستند، نشان داده شده است که فقط پروتئین iPLA2-VIA-2، اما نه iPLA2-VIA-1، چندین بار در حضور ATP فعال می شود.
تکرارهای آنکیرین در چندین صد پروتئین مانند فاکتورهای رونویسی، تنظیم کننده های چرخه سلولی یافت می شوند. اعتقاد بر این است که این موتیف در فعل و انفعالات پروتئین-پروتئین نقش دارد. فرض بر این است که پروتئین iPLA2-VIA در سلول ها به عنوان یک تترامر وجود دارد و احتمالاً موتیف های آنکیرین در الیگومریزاسیون پروتئین نقش دارند. فسفولیپاز iPLA2-VIA مخصوص ماهیت اسیدهای چرب در موقعیت sn-2 و جایگزین در موقعیت sn-3 فسفولیپید نیست. در غیاب کلسیم کاملاً فعال است و کاتالیز بین سطحی را انجام می دهد. این آنزیم همچنین فعالیت لیزوفسفولیپاز را در موقعیت sn-1، فعالیت ترانس اسیلاز و فعالیت مشخصه پروتئین PAF-AH نشان می دهد.
پروتئین iPLA2-VIB حاوی موتیف لیپاز GVSTG است که در آن سرین-483 در مرکز کاتالیزوری قرار دارد. موتیف اتصال ATP؛ موتیف محلی سازی سیگنال در پراکسی زوم ها در انتهای C مولکول. انتهای C مولکول‌ها، از جمله تکرار اتصال ATP و محل کاتالیزوری، پروتئین‌های iPLA2-VIB و iPLA2-VIA مشابه هستند. تفاوت‌هایی در انتهای N پروتئین مشاهده می‌شود، جایی که پروتئین iPLA2-VIB موتیف‌های غیر تانکیرین دارای باقی‌مانده‌های سرین و ترئونین زیادی است که برخی از آنها می‌توانند توسط پروتئین کینازهای A و C فسفریله شوند. همچنین پنج سر-پرو وجود دارد. سایت هایی که هدف پرولین کینازها هستند. یکی از این توالی ها (PTSP، باقی مانده های 269-272) محل فسفوریلاسیون پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن است. فعالیت این ایزوفرم به یون های کلسیم بستگی ندارد.وجود محل های مختلف فسفوریلاسیون در پروتئین های گروه iPLA2-VI نشان می دهد که نقش پروتئین های iPLA2-VIA و iPLA2-VIB در سلول ها ممکن است متفاوت باشد. هر دو فسفولیپاز مستقل از کلسیم (iPLA2-VIA و iPLA2-VIB) پروتئین های متصل به غشاء هستند.
2.3 ویژگی بستر
کاتالیز PLA2 با ویژگی سطحی، موقعیتی و فضایی آنزیم مشخص می شود. فسفولیپاز واکنش را در سطح مشترک لیپید/آب کاتالیز می کند. از یک سو، برای اکثر آنزیم های لیپولیتیک، از جمله PLA2، فعالیت آنزیم در حضور سوبستراها به شکل سنگدانه ها (میسل، میسل مخلوط، تک لایه و دولایه) به طور قابل توجهی بیشتر از تحت اثر سوبستراهای محلول در آب است. به شکل تک مولکولی
از سوی دیگر، PLA2 روی مولکول های لیپیدی در ترکیب دانه های لیپیدی فشرده و در نتیجه دسترسی به آن سخت عمل نمی کند. معمولاً برای ایجاد رابط فاز در این موارد از مواد شوینده (تریتون x-100، سدیم دی اکسی کولات) استفاده می شود. ثابت شده است که وجود بسترهای انباشته با طول معینی از زنجیره آسیل برای تجلی بهینه ویژگی سطح آنزیم ضروری است.
با کشف ویژگی فضایی و موقعیتی PLA2، حداقل الزامات نسبتاً دقیق برای آنزیم به سوبسترا فرموله شد: در موقعیت sn-2 باقیمانده گلیسرول، لیپید باید دارای یک گروه استر باشد و در sn-3 موقعیت، یک گروه فسفات. بعداً نشان داده شد که باقیمانده اسید فسفریک را می توان با یک سولفونیوم جایگزین کرد: سولفولیپید یک بستر خوب PLA2 است، فسفولیپیدهای مربوطه، جایی که پیوند C-O-P با یک پیوند C-P جایگزین می شود، نیز توسط آنزیم هیدرولیز می شوند. ، اما به میزان کمتر. بنابراین، حداقل نیاز آنزیم به سوبسترا در حال حاضر به این واقعیت کاهش می یابد که گلیسروفسفولیپید دارای یک پیکربندی طبیعی L است و دارای یک پیوند استری در موقعیت sn-2 گلیسرول است، و همچنین حاوی گروهی با خواص آنیونی قوی است. فاصله پنج تا شش اتم از کربن کربوکسیل. اعتقاد بر این است که گروه فسفات باید یک عملکرد اسید آزاد داشته باشد.
در یک فسفولیپید با دو پیوند استری حساس - دی فسفاتیدیل گلیسرول (کاردیولیپین) - هر دو می توانند هیدرولیز شوند. مشخص شد که β-لستین ها (1،3-دیاسیل-sn-glpcero-2-phosphocholing) توسط PLA2 از مار Crotalusadaincniteus هیدرولیز می شوند، اگرچه با سرعت نسبتاً پایینی. PLA2 پیوند آمیدی اسفنگولیپیدها را هیدرولیز نمی کند. آنالوگ های تیول فسفاتیدیل کولین ها سوبستراهای خوبی هستند که امکان نظارت بر فرآیند هیدرولیز را به روش اسپکتروفتومتری فراهم می کند. د هاس و همکاران دریافتند که بار منفی روی گروه فسفات یک نیاز مطلق برای یک بستر نیست.
به دلیل ویژگی فضایی و موقعیتی، PLA2 یک ابزار ارزشمند در شیمی لیپید و بیوشیمی است. آنها برای ایجاد توزیع موضعی اسیدهای چرب در تجزیه و تحلیل فسفوگلیسریدها، جداسازی مخلوط های راسمیک لیپیدها، و در سنتز لیپیدها برای به دست آوردن فسفوگلیسریدها با ترکیب اسیدهای چرب مخلوط استفاده می شوند.
ویژگی سوبسترای PLA2 سلولی هنوز به طور کامل مشخص نشده است، با این حال، داده هایی در مورد ساختار سوبستراهای PLA2 در سلول های خونی و سیستم ایمنی جمع آوری شده است، به ویژه، ویژگی این آنزیم ها به فسفاتیدیل کولین های حاوی آراشیدونات در sn- موقعیت 2 گلیسرول ثابت شده است.
2.4 مهارکننده های PLA2
2.4.1 بازدارنده های غیر رقابتی
کاهش فعالیت کاتالیزوری PLA2 ممکن است به دلیل عدم تعادل در یک یا چند مرحله از واکنش آنزیمی رخ دهد، بنابراین مهار کننده های شناخته شده این آنزیم را می توان به شرح زیر تقسیم کرد.
الف) اتصال با یک بازدارنده آنزیم (E) می تواند تعادل E↔E* را به سمت چپ تغییر دهد و غلظت E* فعال کاتالیزوری را کاهش دهد. این زمانی اتفاق می‌افتد که وزیکول‌های یک آنالوگ سوبسترای غیرقابل هیدرولیز به وزیکول‌های سوبسترا اضافه می‌شوند، که آنزیم به آن‌ها متصل می‌شود اما نمی‌تواند به سرعت دفع شود. نیاز به حضور یون‌های کلسیم زمانی که PLA2 به سطح سطحی متصل می‌شود دلیلی برای طبقه‌بندی عوامل کیلیت مانند EDTA به عنوان بازدارنده می‌دهد.
ب) ترکیبات لیپوفیل خواص فاز لایه ها را تغییر می دهند و چگالی بار را در سطح سطحی کاهش می دهند و تعادل E↔E* را به سمت چپ تغییر می دهند. نشان داده شده است که چنین تغییراتی توسط حلال‌های آلی، شوینده‌ها، الکل‌ها و همچنین آمفی‌فیل‌های کاتیونی، فنوتیازین‌ها و بی‌حس کننده‌های موضعی با ماهیت شیمیایی مختلف ایجاد می‌شوند. سایر مهارکننده ها - اسیدهای چرب، مپاکرین، اسید آریستولوکیک - نیز بر مرحله اتصال-واجذبی E↔E* تأثیر می گذارند بدون اینکه بر عملکرد کاتالیزوری آنزیم روی سطح سطحی تأثیر بگذارند.
ج) برخی از انواع مهار غیر اختصاصی. تحت شرایط خاص، سرعت هیدرولیز تحت عمل PLA2 فسفولیپیدهای تحت پراکسیداسیون به طور قابل توجهی افزایش می یابد. بنابراین، آنتی اکسیدان ها به طور بالقوه قادر به کاهش فعالیت آنزیم در نظر گرفته می شوند. پروتئین های تیپالیکورتین و کالپاکتین فسفولیپیدهای سطح سطحی را حل می کنند و در نتیجه فعالیت PLA2 را کاهش می دهند. آنیون های محلول در آب مانند هپارین با مسدود کردن محل اتصال آنیونی آنزیم، اتصال PLA2 به سطح مشترک را مهار می کنند.
د) تغییرات کووالانسی باقیمانده اسید آمینه PLA2. 1-Bromooctan-2-one و n-bromphenacil bromide به طور کووالانسی به His-48 در مرکز کاتالیزوری آنزیم متصل می شوند و فعالیت کاتالیزوری را کاملاً مهار می کنند. سرعت چنین تغییراتی به طور قابل توجهی کاهش می یابد زمانی که آنزیم از قبل به سطح سطحی متصل شده باشد. نرخ اصلاح در مورد آنزیمی که قبلاً به سطح سطحی متصل شده است افزایش می یابد.مانوآلید ترپنوئید غیراستروئیدی جدا شده از یک اسفنج دریایی و مانوآلوگ آنالوگ مصنوعی آن به روشی مشابه عمل می کنند.
ه) سایر ترکیبات. احتمالاً بسیاری از ترکیبات دیگر، از جمله برخی داروها، فعالیت PLA2 را در داخل بدن مهار می کنند، با این حال، مکانیسم اثر مهاری آنها هنوز مشخص نشده است. از جمله این مواد می توان به بیوفلاونوئیدها و رتینوئیدها، اسیدهای هیدروکسی ایکوزاتترانوئیک، فنوفتول (آگونیست گیرنده β-آدرنرژیک)، گابکسات مزیلات، نیجرگولین، پاپاورین، سیناریزین و آمپرون اشاره کرد.

2.4.2 بازدارنده های رقابتی
بازدارنده های رقابتی PLA2 آنالوگ های بسترها، محصولات واکنش یا کمپلکس های حالت گذار هستند. آنها با اتصال به محل فعال مولکول E* با بستر رقابت می کنند و به طور موثر غلظت کمپلکس ES* را کاهش می دهند. این مکانیسم مهار به طور تجربی در مطالعه کاتالیز فسفولیپیدها تحت عمل PLA2 بر اساس نوع "scooting" تایید شد.
یک استراتژی رایج برای طراحی بازدارنده ها، جایگزینی پیوند استری حساس به PLA2 با یک گروه غیر قابل هیدرولیز است. در این حالت، بازدارنده باید آنالوگ ساختاری نزدیک بستر باقی بماند و باعث تغییر در غشاهای لیپیدی نشود. در حال حاضر، مقایسه داده‌های موجود در مورد مهارکننده‌های رقابتی امکان‌پذیر نیست، زیرا یک نظریه یکپارچه و توصیف کمی از لیپولیز در سطح مشترک لیپید/آب هنوز ایجاد نشده است.
آمینواسیل فسفولیپیدها در میان فسفاتیدیل کولین ها با اصلاح پیوند sn-2-استر، دسته ای از مهارکننده های رقابتی قوی PLA2، آنالوگ های sn-2-آمید، کشف شده است. جایگزینی پیوند sn-2-استر با پیوند اتری یا با باقیمانده هیدروکربنی نیز منجر به مهار رقابتی PLA2 شد، اما به میزان کمتر.
تأثیر آنالوگ‌های آمینواسیل فسفولیپیدها بر فعالیت آنزیمی PLA2 عمدتاً در آزمایش‌های مدل با میسل‌های مخلوط تحت شرایط زیر مورد مطالعه قرار گرفت:
1) غلظت کل لیپیدها (بازدارنده و بستر) [I] + [S] باید ثابت باشد تا کسر مولی بازدارنده محاسبه شود، α = [I]/([I] + [S]).
2) مولکول های بستر و بازدارنده باید همان ناحیه را در سطح سطحی اشغال کنند.
3) سطح سطحی میسل ها باید به اندازه ای بزرگ باشد که آنزیم فقط به صورت متصل وجود داشته باشد.
برای ارزیابی اثر یک بازدارنده بر فعالیت PLA2، از مقدار شرطی نیروی بازدارنده (Z) استفاده شد که معیاری از نسبت ثابت‌های تفکیک سطحی برای بستر و بازدارنده است و با عبارت:

Rv = I + αZ،
که در آن Rv نسبت سرعت واکنش در K≠Km به سرعت واکنش در Ki=Km است، α کسر مولی بازدارنده در میسل است.
اثر مهاری آنالوگ های (R) -1-آلکیل-2-آسیلامینو-1،2-dideoxyglycero-3-phosphocholine بر روی فسفولیپازهای پانکراس پستانداران نیز مورد مطالعه قرار گرفت. در بین مهارکننده‌های دارای زنجیره اسیدهای چرب اشباع، آنالوگ‌های دارای زنجیره C10-acyl بیشترین فعالیت را داشتند. رفتار آنالوگ‌های غیراشباع در هر دو بازدارنده آنیونی و zwitterionic پیچیده‌تر بود، افزایش تعداد پیوندهای دوگانه سیس در مکان خاص آنها از زنجیره vacyl منجر به افزایش پارامتر Z شد.
در جریان مطالعات با آنالوگ های تیوآمید سوبستراها، مشخص شد که آنالوگ تیوآمید فسفاتیدیل اتانول آمین با lC50 = 4.5 * 10-7M قوی ترین مهار کننده PLA2 شناخته شده است.
مطالعات انجام شده با مهارکننده‌های آمینواسیل جنبه‌های مختلفی از برهمکنش آنزیم/لیپیدی را نشان داده‌اند:
1) معرفی یک باقیمانده آمید در موقعیت sn-2 فسفولیپید به طور قابل توجهی اتصال آن به مرکز کاتالیزوری PLA2 را افزایش می دهد: هر چه اکسیژن هسته دوست گروه آمید بتواند قوی تر با مرکز الکتروفیل این مرکز تعامل کند. احتمالاً Ca2+). گروه آمید فرصت های بهتری را برای پیوند هیدروژنی نیز فراهم می کند.
2) گروه α-متیلن باقیمانده آسیل در موقعیت sn-2 فسفولیپید مسئول اتصال فسفولیپید به مرکز کاتالیزوری آنزیم است.
3) افزایش آبگریزی گروه عاملی sn-1 موقعیت فسفولیپید باعث افزایش میل ترکیبی بین آنزیم و سوبسترا می شود.
4) ثابت شد که فسفاتیدیل اتانول آمین ها مهارکننده های قوی تری نسبت به فسفاتیدیل کولین ها هستند.
رویکرد به سنتز 1-آسیل-2-آسیلامینو-2-دئوکسی گلیسروفسفوکولین های فعال نوری مبتنی بر حفظ کایرالیته ترکیب اولیه (ال-سرین) در طول سنتز است. توالی انتخاب شده برای معرفی جانشین ها نشان می دهد که استفاده از حداقل تعداد گروه های محافظ یک روش stereospecific برای سنتز 1-alkyl-2-acylamino-2-deoxyglycerophosphocholines با شروع از L-سرین نیز توسعه داده شده است. معرفی یک گروه آلکیل آلیفاتیک با برهمکنش متان سولفونات اسید چرب با یک دی اکسی گلیسرید محافظت شده با اگزازولین انجام می شود. آسیلامینوآنالوگهای زنجیره بلند راسمیک فسفولیپیدها پیشنهاد شد که از 2-آمینوپروپانول تهیه شوند. سنتز آنالوگ تیوآمید فعال نوری فسفاتیدیل کولین شرح داده شده است.
آنالوگ های فتارکتون آنالوگ های بستر حاوی گروه های کتون پلاریزه، از جمله گروه های فلوروکتون و 1،2-دیکتون، قبلاً آنزیم های هیدرولیتیک را مهار می کنند. بهترین بازدارنده جایگزین فسفواتانول آمین با یک باقیمانده آسیل بود، علیرغم این واقعیت که آنزیم بسترهایی با دو باقی مانده آسیل را ترجیح می دهد.
از آنجایی که گروه دی فلوروکتون به راحتی در محلول آبی هیدراته می شود، بازدارنده ها از نظر ساختاری شبیه به واسطه چهار وجهی هستند که در طی لیپولیز تشکیل می شود.
در میان آنالوگ های فلوروکتون، مهارکننده های انتخابی PLA2 سیتوزولی داخل سلولی یافت شده است. آنالوگ های کتون الکتروفیلیک اسید آراشیدونیک چنین مهارکننده هایی هستند.
قوی ترین بازدارنده α-تری فلورومتیل کتون اسید آراشیدونیک بود. ساختار کمپلکس این ماده با PLA2 توسط طیف‌سنجی l9F و 13C NMR آنالیز شد. نتایج این فرضیه را تأیید کرد که اتصال به محل فعال آنزیم یک همیکتال با باقیمانده سرین یا ترئونین مولکول پروتئین را تشکیل می دهد، که دلیل آن توانایی آلفا فلوروکتون ها برای هیدراته شدن آسان در محلول های آبی است.
آنالوگ های فسفات بیش از 100 آنالوگ sn-2-فسفات فسفاتیدیل کولین ها برای مطالعه ماهیت مهار PLA2 از منابع مختلف و تأثیر جانشین ها بر توانایی مهاری سنتز شد. ترکیبات این کلاس فقط آنزیمی را که قبلاً به سطح سطحی متصل شده است مهار می کند و بر دفع آنزیم تأثیر نمی گذارد. مهارکننده های فسفات از طریق یون کلسیم از طریق پیوند هماهنگی E-Ca…O=P به محل فعال آنزیم متصل می شوند و با سوبستراها رقابت می کنند. این برهمکنش توسط جانشین های مولکول بازدارنده تعدیل می شود. جایگزینی اتم O برای S، NH2 در این کمپلکس، جایگزینی گروه 0=P به جای O=C-O، و حضور یک گروه فسفات با بار منفی به طور قابل توجهی میل ترکیبی را برای آنزیم کاهش داد. توانایی بازدارندگی فسفوسترها به شدت به ویژگی‌های استریوشیمیایی و ساختاری بستگی داشت: کایرالیته موقعیت sn-2، طول زنجیره آلکیل در موقعیت sn، و وجود یک جایگزین آبگریز در sn-3-. موقعیت گلیسرول سولفونات، آمید، اکسیم حاوی، آنالوگهای فسفومونواستر دیانیونی خاصیت بازدارندگی از خود نشان ندادند.
آلکیل فسفاتیدیل کولین ها برای استفاده دارویی، ظاهراً امیدوارکننده ترین موادی هستند که قادر به مهار PLA2 بدون ایجاد اختلال در سازمان ساختاری غشاء هستند. در این زمینه لیپیدهایی با پیوند اتری ساده مورد توجه هستند. در مولکول‌های لیپیدی این دسته، جانشین‌های آبگریز از طریق پیوند اتری FLA2 غیرقابل هیدرولیز به باقیمانده آب دوست متصل می‌شوند. در عین حال، در رفتار آنها در ترکیب لیپیدهای غشایی با پیوند اتری ساده، عملاً با آنالوگ های دی اسیل خود تفاوتی ندارند. اثر فسفاتیدیل کولین‌های متصل به اتر با زنجیره بلند بر اختلال غشاء توسط PLA2 توسط طیف‌سنجی P-NMR مورد مطالعه قرار گرفت و امکان استفاده از لیپیدها در واکنش‌های التهابی موضعی مورد بررسی قرار گرفت.
تقریباً نتایج مشابهی برای مهارکننده های مورد مطالعه به دست آمد: ورود ترکیبات به ترکیب لایه لیپیدی از فسفاتیدیل کولین تخم مرغ در نسبت مولی 1: 1 منجر به تثبیت مؤثر غشاها شد که هیچ گونه بازآرایی ساختاری تحت عمل مشاهده نشد. از این آنزیم
در میان فسفولیپیدهای این دسته، مهارکننده های سیتوزولی PLA2 یافت شد: دارای خواص ضد التهابی و ضد حساسیت.

2.5 اهمیت برای بدن در صورت اختلال در فعالیت
فعال شدن بیش از حد PLA2 نقش مهمی در پاتوژنز آسیب سلولی دارد. اسیدهای چرب غیر اشباع (آراشیدونیک، پنتانوئیک و غیره) که تحت تأثیر فسفولیپاز آزاد می شوند، صرف تشکیل ترکیبات فعال فیزیولوژیکی - پروستاگلاندین ها و لکوترین ها می شوند. قسمت باقی مانده از مولکول فسفولیپید (لیزوفسفولیپید) فقط یک اسید چرب "دم" دارد که در نتیجه توانایی تشکیل میسل را دارد و یک شوینده بسیار قوی است. آسیب به غشای سلولی در شرایط فعال شدن بیش از حد PLA2 با عملکرد شوینده لیزوفسفولیپیدها همراه است.
خواص دارویی و سمی فسفولیپاز به دلیل فعالیت بیوشیمیایی آن. با کمک لیزولسیتین سمی خود، ساختارهای خون و بافت را تجزیه می کند و به غشای سلولی و اندامک های آنها آسیب می رساند. فسفولیپاز با از بین بردن اجزای انعقادی که حاوی فسفولیپیدها هستند، لخته شدن خون را کاهش می دهد. به غشاهای میتوکندری آسیب می رساند، و دومی اندامک مهم سلول، حامل سیستم های آنزیمی پیچیده است. آنها در متابولیسم و ​​فرآیندهای ردوکس نقش دارند. آسیب به ساختار فسفولیپیدی رشته های عصبی احتمالاً به دلیل فسفولیپاز است که هدایت بین بافت عصبی و عضلانی را مسدود می کند.
ورود فسفولیپاز به زیر پوست باعث التهاب موضعی می شود و تزریق داخل وریدی با کاهش فشار خون در حیوانات آزمایشی، ادم ریوی، خونریزی در آلوئول ها همراه است. در حیواناتی که چندین ساعت زنده مانده اند، هموگلوبین گلبول های قرمز تخریب شده در ادرار یافت می شود. علاوه بر این، ثابت شده است که فسفولیپاز زهر زنبور عسل، تزریق زیر پوست، توسعه فرآیندهای التهابی مدل با علل مختلف را افزایش می دهد.
پیشنهاد شده است که ملیتین با اثر کاهش کشش سطحی خود، فسفولیپیدها را برای فعالیت آنزیمی فسفولیپاز آماده می کند. از بین تمام اجزای زهر زنبور عسل، فسفولیپاز قوی ترین آنتی ژنیک و تحریک کننده آلرژی زا است. در خون زنبورداران مصون از زهر زنبور عسل آنتی بادی هایی با تیتر بالا علیه سم وجود دارد.بیماران حساس به زهر زنبور عسل در آزمایشات آزمایشگاهی برای واکنش های آلرژیک به شدت به فسفولیپاز واکنش نشان دادند.
خواص سمی و آلرژیک فسفولیپاز، که فرآیندهای التهابی را تقویت می کند، آن را به عنوان جزئی از زهر زنبور عسل مشخص می کند که برای بدن انسان مضر است.
فعال شدن PLA2 وابسته به کلسیم است. با تحریک سلول‌های آدرنال، که منجر به تسریع گردش آراشیدونیل فسفاتیدیل‌نوزیتول می‌شود، اتفاق می‌افتد. این اثر همچنین توسط یک یونوفور کلسیم ایجاد می‌شود و ممکن است منعکس‌کننده افزایش سطح کلسیم داخل سلولی و تحریک ثانویه PLA2 به عنوان یک واکنش اولیه همراه با تعامل گیرنده باشد. مشخص است که عمل ناستروئیدوژنز در غدد فوق کلیوی به کلسیم بستگی دارد و نه تنها به تشکیل cAMP. حداقل بخشی از نیاز کلسیم ممکن است به دلیل گردش فسفولیپیدهای غشایی با واسطه PLA2 در طی فعال شدن قشر آدرنال باشد.
مکانیسم فعال‌سازی فسفولیپاز ممکن است منعکس‌کننده ویژگی کلی سلول‌های ترشحی تنظیم‌شده با هورمون باشد؛ با تحریک هورمونی سلول‌های هدف خاص، سایر مراحل متابولیسم فسفولیپید نیز تغییر می‌کند. بنابراین، در سلول‌های گرانولومای تخمدان، جایی که LH تولید پروستاگلاندین، هورمون را افزایش می‌دهد. تشکیل اسید آراشیدونیک را افزایش نمی دهد، اما در مراحل بعدی با افزایش فعالیت پروستاگلاندین سنتتاز عمل می کند. این اثر LH بر سنتز پروستاگلاندین در فولیکول گرافیان (فولیکول حباب دار تخمدان) به نظر نمی رسد که واسطه عمل استروئیدوژنیک گنادوتروپین باشد، اما نقش مهمی در توسعه تخمک گذاری دارد.
2.6 استفاده از PLA2 در پزشکی
PLA2 ترشحی به عنوان یکی از عوامل بیماری زا در شکل گیری تعدادی از بیماری ها در نظر گرفته می شود: آرتریت روماتوئید، آترواسکلروز. در سال های اخیر، اطلاعاتی در مورد دخالت این آنزیم در آسیب شناسی ریه ظاهر شده است. زنجیره پاتوژنتیک "sPLA2 - سندرم زجر تنفسی حاد (ARDS) - سورفکتانت ریه" از اهمیت ویژه ای برخوردار است.
سندرم دیسترس تنفسی حاد در بزرگسالان در نتیجه اثرات مستقیم بر ریه ها (آسپیراسیون، استنشاق مواد سمی، اکسیژن 100٪، تهویه مکانیکی ناکافی) و اثرات غیرمستقیم (سپسیس، شوک با هر علت، پلی تروما، از دست دادن خون) رخ می دهد. . با وجود سال ها تحقیق فشرده، مکانیسم ایجاد ARDS نامشخص است و میزان مرگ و میر آن بالا است (~50٪). اعتقاد بر این است که منشا این وضعیت ریه ها کاهش تولید و فعالیت سورفکتانت است.
سورفکتانت ریه یک کمپلکس لیپوگلیکوپروتئینی است که توسط آلوئولوسیت های نوع II سنتز می شود. این شامل 80-90٪ فسفولیپیدها، 5-10٪ لیپیدهای خنثی و 5-10٪ پروتئین است. علاوه بر خواص فعال سطحی لازم برای تنفس طبیعی، دارای اثرات ضد التهابی و تنظیم کننده سیستم ایمنی است. نقض یکپارچگی آن منجر به افزایش نیروهای کشش سطحی نه تنها در آلوئول ها، بلکه در برونشیول ها و برونش های کوچک می شود.
ویژگی بستر سیتوزولی PLA2 برای سوبستراهای حاوی آراشیدونویل نشان می دهد که این ایزوفرم خاص نقش عمده ای در پاتوژنز آسم ایفا می کند. مشخص شده است که لکوترین های B4، C4، D4، E4 گروه اصلی واسطه هایی هستند که در فرآیند التهابی پیچیده نقش دارند و منجر به تظاهرات بالینی آسم می شوند. عمل لکوترین ها کاهش عضلات صاف برونش، افزایش میزان مخاط تولید شده، تحریک نفوذپذیری عروق و ایجاد ادم است. همه این علائم مشخصه آسم هستند. لوکوترین ها در پاسخ به قرار گرفتن در معرض یک آلرژن یا یک واکنش غیر اختصاصی که منجر به فعال شدن cPLA2 می شود، سنتز می شوند.
Chilton F. H. وجود محصولات فعالیت فسفولیپاز را در مایع لاواژ برونکوآلوئولار بیماران آسم 5-30 دقیقه، 6، 20 ساعت پس از تحریک آنتی ژن مورد مطالعه قرار داد. غلظت محصولات لیزو 7 برابر بیشتر از گروه کنترل بود. از این رو، پیشنهاد شد که هیدرولیز فسفولیپیدهای سورفکتانت منجر به تولید لیزوفسفاتیدیل کولین سیتوتوکسیک می شود که می تواند اثر شوینده مستقیم بر روی غشاء داشته باشد و بر فعالیت کانال ها و پروتئین های غشایی تأثیر بگذارد. علاوه بر این، تبدیل به یک عامل فعال کننده پلاکت، باعث نقض نفوذپذیری سد آلوئولی-مویرگی، برونکواسپاسم و تجمع پلاکتی می شود.
همچنین فرض بر این است که cPLA2 در شروع و توسعه فیبروز ریوی، یک ضایعه بینابینی پارانشیم ریه که تا به امروز ناشناخته است، نقش دارد. پاتوژنز این بیماری شامل تولید بیش از حد واسطه های پیش التهابی، التهاب آلوئولی، تکثیر فیبروبلاست و تجمع کلاژن است. مدل تجربی کلاسیک برای این بیماری، فیبروز ریوی ناشی از تزریق داخل تراشه یا داخل صفاقی بلئومایسین است.
نقش فسفولیپاز در ایجاد برخی از اشکال پانکراتیت بسیار زیاد است.
با نارسایی پاپیلای اصلی اثنی عشر و افزایش فشار در دوازدهه، رفلاکس صفرا یا محتویات دوازدهه به مجاری پانکراس امکان پذیر است. صفرا با ورود به مجاری پانکراس می تواند در معرض فسفولیپاز پانکراس قرار گیرد که قبلاً توسط تریپسین فعال شده است و در نتیجه لیزولسیتین تشکیل می شود که با نفوذ به فضای بین بافتی پانکراس باعث آسیب عمیق به سلول ها می شود.
همچنین، دکتر هایدی می ثابت کرد که PLA2 مرتبط با لیپوپروتئین، خطر مرگ عروق کرونر را پیش بینی می کند.
داده‌های به‌دست‌آمده در سال‌های اخیر در مورد دخالت PLA2 ایزوکرتوری سیتوزولی در تشکیل آسیب‌شناسی ریه، چشم‌انداز رویکردهای جدیدی را برای درمان چنین بیماری‌هایی باز می‌کند. با این حال، ابتدا لازم است به وضوح جایگاه این آنزیم ها در زنجیره بیماری زایی رویدادهای مولکولی مشخص شود. در اینجا، رویکرد "سندرمیک" ممکن است نقش مهمی ایفا کند. به عنوان مثال، هنوز هیچ اطلاعاتی در مورد وضعیت PLA2 در هنگام هایپرترمی و هیپوکسی، در طول فعال شدن سلول های تولید کننده وجود ندارد. در همین حال، بیشتر بیماری های ریوی با این شرایط مشخص می شوند که تا حد زیادی تصویر بالینی، دوره و نتیجه فرآیند پاتولوژیک را تعیین می کند.
2.7 نقش بیولوژیکی PLA2
تا به امروز، سموم ترشح شده PLA2 و غدد پانکراس پستانداران کاملاً مشخص و مورد مطالعه قرار گرفته است. در مقابل، غلظت نسبتاً پایین در داخل بدن PLA2 خارج سلولی درون سلولی و غیر پانکراسی، مطالعات این دسته از آنزیم ها را به طور جدی پیچیده می کند.
مشخص شده است که PLA2 متصل به غشاء نقش مهمی در فرآیندهای تنظیمی متابولیسم سلولی دارد. چندین مسیر برای تنظیم این آنزیم ها شناخته شده است، اما مکانیسم کلی بسیار پیچیده است و به طور کامل شناخته نشده است. PLA2 در انتقال سیگنال های شیمیایی از طریق غشاها در پاسخ به تاثیرات خارجی نقش دارد.این آنزیم به طور موثر فسفولیپیدهای حاوی پراکسیدهای اسید چرب را هیدرولیز می کند و خواص ساختاری و عملکردی غشای سلولی را بازیابی می کند. ظاهراً تغییر در ترکیب مولکولی لیپیدهای اکسید شده دسترسی آنزیم به پیوند sn-2-ester را تسهیل می کند.
تا به امروز مشخص شده است که فسفولیپازهای A2 نقش مهمی در توسعه فرآیند التهابی دارند. سهم آنزیم شروع سنتز تنظیم کننده های چربی این واکنش است - یکی از گروه های به اصطلاح واسطه های التهابی شیمیایی. آنها در کانون التهابی تشکیل، فعال یا بسیج می شوند و نسبت آنها ماهیت روند فرآیند پاتولوژیک را تعیین می کند. واسطه های التهاب ماهیتی لیپیدی توسط اسیدهای چرب و مشتقات آنها (پروستاگلاندین ها، لکوترین ها، ترومبوکسان ها) و همچنین فاکتور فعال کننده پلاکت فسفولیپید (PAF) نشان داده می شوند. اعتقاد بر این است که PLA2 سیتوزولی داخل سلولی در فرآیند التهابی نقش دارد، اسیدهای پلی انوئیک را از موقعیت sn-2 باقیمانده گلیسرول فسفولیپیدهای غشایی آزاد می کند. اسیدهای چرب پلین، از جمله آراشیدونیک، فعالیت بیولوژیکی خاص خود را دارند. افزایش نفوذپذیری عروق، ایجاد تجمع پلاکتی، اثر وازواکتیو.
سایر محصولات واکنش هیدرولیز فسفولیپاز، لیزوفسفولیپیدها هستند که خاصیت سمیت سلولی و شوینده مشخصی دارند. این ترکیبات در بیماری هایی مانند کوله سیستیت، انفارکتوس میوکارد، آب مروارید، پسوریازیس و ... یافت می شوند. اگر اسید چرب از فسفاتیدیل کولین 1-O-alkyl آزاد شود، لیزوفسفولیپید حاصل به عنوان پیش ساز PAF، واسطه التهاب، واکنش آلرژیک، شوک سپتیک و آسم عمل می کند. این ترکیب در حال حاضر به شدت در حال مطالعه است و تعداد زیادی از انتشارات به آگونیست ها و آنتاگونیست های PAF اختصاص داده شده است.
اهمیت PLA2 متصل به غشا در تنظیم سلولی و همچنین افزایش سطح آن در تعدادی از فرآیندهای پاتولوژیک، نیاز به تنظیم فعالیت این آنزیم را به دنبال دارد. بنابراین، جستجو برای کلاس‌های جدید مهارکننده‌های لیپید و توسعه روش‌های مناسب برای سنتز آنها در حال حاضر مورد توجه عملی است.

کتابشناسی - فهرست کتب
1. Bragina N.A.، Chupin V.V.، Bulgakov V.G. مهارکننده های لیپیدی فسفولیپاز A2، M.، 1999، ص. 83-96
2. Brokerhof X., Jensen R., Lipolytic enzymes, trans. از انگلیسی، م.، 1978، ص. 242-356

فسفوگلیسریدبسته به محل اثر روی بستر (ویژگی موقعیتی)، فسفولیپازهای A 1 , A 2 , Cu D متمایز می شوند (پیوندهای شیمیایی، به چاودار هیدرولیز این F.، در f-le I نشان داده شده است). لیزوفسفولیپیدهاتحت تأثیر F. L (f-la II؛ وجود F از نظر موقعیتی خاص. L 1 و L 2 ثابت نشده است). اف. AT -نام منسوخ داروهای با فعالیت نوع F. A و L.

X - باقی مانده کولین، سرین، myo-اینوزیتول و غیره؛ برای F. L1R2 =C(O)R4، R3 =H. برای F. L 2 R 2 \u003d H, R 3 \u003d C (O) R 4

هر یک از خانواده های F. ناهمگن هستند و شامل آنزیم هایی هستند که از نظر مول به طور قابل توجهی با هم تفاوت دارند. توده ها، ترکیب زیر واحد، و غیره. سنت شما. همه F. naib. کاتالیز فعال هیدرولیز بر روی سطح فسفولیپید جداسازی فاز - . بسترهای محلول در آب را به آرامی هیدرولیز کنید.

F. A 1 در بیشتر موارد - آنزیم های درون سلولی که اغلب به غشاء متصل هستند، به کوآنزیم نیاز ندارند. درخواست آنها توده ها در 15-90 هزار تغییر می کنند. کاتالیزور بهینه خود را در pH 4.0 (برای آنزیم های لیزوزومی) یا 8.0-9.5 (برای آنزیم های میکروزوم ها، غشاهای پلاسما و سیتوزول) نشان می دهد. به طور گسترده در بافت های حیوانی (کبد، قلب، مغز) و در میکروارگانیسم ها (Bacillus subtilis، B. megateiium، Mycobacter phlei، Escherichia coli) توزیع می شود.

F. A 2 - بیشترین نمایندگان مورد مطالعه F. وجود دارد 3 گروه F. A 2: 1) آنزیم سموم مارها، خزندگان و حشرات، که به شکل تعداد زیادی ایزوفرم وجود دارد (نگاه کنید به. ایزوآنزیم ها) 2) آنزیم های پانکراس پستانداران که در بدن به شکل زیموژن ها (پیش سازها با وزن مولکولی بالاتر) تولید می شوند و توسط تریپسین فعال می شوند. 3) آنزیم های داخل سلولی از خون و بافت های حیوانات، که در میان آنها هم p-rime و هم به غشاء متصل است. اف. 2 > دو زیر گروه اول آنزیم های محلول در آب با مول هستند. 11-19 هزار متر (برخی به شکل دایمر فعال هستند)، به دلیل تعداد زیاد (6-7) پیوندهای دی سولفیدی، پایداری بالایی دارند. کاتالیزور بهینه فعالیت در pH 7.5-9.0. pI از 4.0 تا 10.5؛ کوآنزیم - Ca 2+. برای بسیاری از نمایندگان این زیر گروه ها F. ساختار اولیه و فضایی شناخته شده. در مرکز فعال، بقایای هیستیدین و اسید آسپارتیک یافت شد. F. A 2 درون سلولی سنت جزایر (زیرگروه سوم) به محلی سازی درون سلولی آنزیم بستگی دارد. درخواست آنها متر 12-75 هزار. کاتالیزور بهینه فعالیت در pH 4.2-9.0. آنزیم های nek-ry این زیر گروه حاوی کوآنزیم نیستند.

F. L جدا شده از گیاهان، میکروارگانیسم ها، زهر زنبور عسل، بافت پستانداران. آنزیم های این گروه بسیار غیر اختصاصی هستند، آنها هیدرولیز decomp را کاتالیز می کنند. پیوندهای استری، اثر لیتیک (مخرب) در رابطه با بیول دارند. غشاها (چه چیزی باعث آنها می شود). مول. m. F. L 15-65 هزار، آنها از F. A پایدارتر هستند. کاتالیزور بهینه آنها فعالیت در pH از 4.5 (آنزیم لیزوزومی) تا 10.0 (آنزیم های سمی) آشکار می شود. F. L کوآنزیم ندارند، توسط اتیلن دی آمین-تترااستیک اسید مهار نمی شوند. برخی از F. L توسط دی ایزوپروپیل فلوروفسفات و اسید p-chloromercurbenzoic مهار می شوند. جهانی برای همه F. L-سورفاکتانت.

F. در باکتری های کلستریدیوم، باسیلوس و سودوموناس و همچنین در سلول های پستانداران (کبد، مغز، پانکراس) یافت می شود. به عنوان مثال، برخی از آنها با توجه به گروه الکل مولکول سوبسترا با ویژگی دقیق مشخص می شوند. به باقی مانده کولین (F. C x) و myo-اینوزیتول (F. C و). مول. m. F. C از 23 تا 51 هزار، Zn 2+ برای آنها کوآنزیم و تثبیت کننده است. کاتالیزور بهینه فعالیت در pH تقریبا 7 برای F. C x و در pH< 7 для Ф. С и.

F. D در گیاهان (سبزیجات، جلبک ها)، میکروارگانیسم ها و بافت های حیوانی یافت می شود. درخواست آنها متر 90-116 هزار. کاتالیزور بهینه فعالیت در pH 4.7-8.0. سورفکتانت های کاتیونی F را مهار می کنند . دی، آنیونی - فعال کردن.

علاوه بر هیدرولیتیک f-tion F. دارای فعالیت ترانس آسیلاز (F. A 1، A 2 و L) و ترانس فسفاتیدیلاز (F. Si D) هستند.

F. نقش مهمی در متابولیسم لیپید در موجودات زنده دارد. آنها برای تعیین ساختار فسفو گلیسریدها و محل آنها در غشاها استفاده می شوند.

روشن:بروکرهوف ایکس، جنسن آر، آنزیم های لیپولیتیک، مطابق. باانگلیسی، م.، 1978، ص. 242-356; Van den Bosch H.، "Biochim. et Biophys. Acta"، 1980، v. 604، شماره 2، ص. 191-246; Dennis E. A., in: The enzymes, 3 ed., v. 16، N.Y.-L.، 1983، ص. 307-53. تی وی رومانوا.

دایره المعارف شیمی. - م.: دایره المعارف شوروی. اد. I. L. Knunyants. 1988 .

ببینید "فسفولیپاز" در فرهنگ های دیگر چیست:

آنزیم های کلاس هیدرولاز؛ هیدرولیز فسفوگلیسریدها را کاتالیز می کند. بسته به محل اثر روی فسفوگلیسرید، F. A، B، C و D متمایز می شوند. F. A باقیمانده اسید چرب را در موقعیت 2 جدا می کند (لیزوفسفاتید سمی حاصل هیدرولیز می شود ... فرهنگ لغت دایره المعارف زیستی

فسفولیپاز (انگلیسی فسفولیپاز) آنزیمی است که فسفولیپیدها را هیدرولیز می کند. بسته به موقعیت پیوند قابل هیدرولیز در فسفولیپید، 4 کلاس اصلی فسفولیپازها متمایز می شوند: A، B، C و D. طبقه بندی طرح فسفولیپید و موقعیت های استر ... ... ویکی پدیا

- آنزیم های (سین. لسیتیناز) از کلاس هیدرولاز (EC 3.1.4.3. و 3.1.4.4)، کاتالیزور برش پیوندهای استری در فسفولیپیدها ... فرهنگ لغت بزرگ پزشکی

فسفولیپاز A2 زهر زنبور عسل در فضای خارج سلولی نزدیک لایه لیپیدی. گروه های قطبی فسفولیپیدها بین صفحات زرد و قرمز قرار دارند. زنجیره های آسیل غیر قطبی بین هواپیماهای قرمز و سیاه ... ویکی پدیا

1

وضعیت فرآیندهای پراکسیداسیون لیپیدی و محتوای فسفولیپاز A2 در خون محیطی زنان باردار سه ماهه سوم با تشدید عفونت ویروس هرپس بسته به تیتر آنتی بادی های IgG به ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 در این کار مورد بررسی قرار گرفت. مشخص شده است که تشدید عفونت ویروس هرپس در طول دوره بارداری به فعال شدن فرآیندهای پراکسیداسیون لیپیدی کمک می کند که توسط محتوای محصولات فعال TBA (مالون دی آلدئید) ثبت شده است، افزایش محتوای فسفولیپاز A2، که بیشتر است. هنگامی که تیتر آنتی بادی های IgG به HSV-1 1: 12800 است تلفظ می شود و علت فرآیندهای مخرب در ترکیب لیپیدهای گلبول قرمز است.

بارداری

عفونت ویروس هرپس

فسفولیپاز A2

پراکسیداسیون لیپیدی

1. Bratus V.V.، Talaeva T.V. التهاب و اختلالات پرواتروژنیک متابولیسم لیپوپروتئین: رابطه و علت (بررسی ادبیات) // مجله روماتولوژی اوکراین. - 2002. - V. 7، No. 1. - S. 13–22.

2. Vladimirov Yu.A., Archakov R.M. پراکسیداسیون لیپیدی در غشاهای بیولوژیکی - M.: Nauka، 1972. - 252 ص.

3. Gavrilov V.G.، Gavrilova A.R.، Mazhul L.M. تجزیه و تحلیل روش های تعیین محصولات پراکسیداسیون لیپیدی در سرم خون طبق آزمایش با اسید تیوباربیتوریک // سوالات شیمی پزشکی. - 1987. - شماره 1. - S. 118-121.

4. Dorofienko N.N., Ishutina N.A. تغییرات در طیف لیپیدی سرم خون در زنان در دوران بارداری زمانی که بدن تحت تأثیر عفونت ویروس تبخال قرار می گیرد بولتن فیزیولوژی و آسیب شناسی تنفس. - 2008. - شماره. 28. - ص 25-28.

5. دوراسووا N.A. حاملگی و عفونت ویروس هرپس // کتاب راهنمای پیراپزشکی و ماما. - 2010. - شماره 8. - ص 24–29.

6. سیستم جنینی جفتی در عفونت تبخال / M.T. لوتسنکو، I.A. دوژیکوا، A.S. سولوویوف [من دکتر]. - بلاگوشچنسک، 2003. - 200 ص.

7. تغییرات در متابولیسم لیپید در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی / O.V. پورشینا، ع.ن. کیلدیوشوف، L.V. Ledyaykina [و همکاران] // بولتن فناوری های جدید پزشکی. - 2009. - T. 16, No. 1. - S. 103-105.

8. تأثیر لیپیدهای LDL بر فعالیت فسفولیپاز ترشحی A2 گروه IIA / E.V. سامویلوا، A.A. پیرکوا، N.V. پروکازووا [و همکاران] // بولتن زیست شناسی تجربی و پزشکی. - 2010. - T. 150، شماره 7. - S. 45–47.

9. Titov VN ارزش تشخیصی تعیین محتوای فسفولیپاز A2 در لیپوپروتئین های پلاسما و روابط عملکردی با پروتئین واکنشی C // تشخیص های آزمایشگاهی بالینی. - 2010. - شماره 8. - ص 3–16.

10. تجزیه و تحلیل طیف فسفولیپیدها و فعالیت پلاکت فسفولیپاز A2 در زنان باردار مبتلا به سمیت دیررس، بیماران مبتلا به فشار خون بالا / M.M. شختمان، یو.جی. رسول زاده، ک.م. Khaidarova [و دیگران] // مامایی و زنان. - 1997. - شماره 4. - ص 15–17.

مطالعات متعدد اخیر حاکی از اهمیت روزافزون بیماری‌های ویروس هرپس در ایجاد پاتولوژی مامایی است. اهمیت اولیه به ویروس هرپس سیمپلکس (HSV) و سیتومگالوویروس و توانایی آنها در آلوده کردن جنین داده می شود. نقش مهمی در پاتوژنز عفونت ویروس هرپس (HVI) توسط تشدید فرآیندهای پراکسیداسیون لیپیدی (LPO) ایفا می شود. LPO به عنوان یکی از فرآیندهای بیولوژیکی مهم در بدن، امکان شناسایی انتقال احتمالی تغییرات برگشت پذیر به تغییرات غیرقابل برگشت را فراهم می کند. بی ثباتی فرآیندهای بیولوژیکی در BBVI با تجمع محصولات LPO ثانویه در بدن رخ می دهد که دارای اثر سمی هستند که اصلی ترین آنها مالون دی آلدئید (MDA) است، با توجه به محتوای این متابولیت در پلاسما، شدت LPO در بدن است. مورد قضاوت قرار می گیرد، به ویژه هنگامی که فرآیندهای مخرب در آن رخ می دهد، بنابراین، شدت واکنش های پاتولوژیک را تعیین می کند.

تحت تأثیر محصولات نهایی پراکسیداسیون لیپیدی، آنزیم فسفولیپاز A2 فعال می شود که بستر آن فسفولیپیدهای غشای سلولی است، پس از هیدرولیز و جداسازی اسیدهای چرب آزاد از فسفولیپیدها، واسطه های طیف وسیعی از فرآیندهای سلولی ماهیت پیش التهابی شکل می گیرد. در نتیجه، تشکیل محصولات هیدرولیز فسفولیپید با مشارکت فسفولیپاز A2 به التهاب بافت و اختلال در هموستاز کمک می کند.

در ادبیات موجود، ما اطلاعاتی در مورد مطالعه فسفولیپاز A2 در زنان باردار مبتلا به BBVI پیدا نکردیم. بنابراین، هدف از این مطالعه بررسی فعالیت فسفولیپاز A2 در خون محیطی زنان باردار سه‌ماهه سوم با تشدید BBVI، بسته به فعالیت فرآیندهای LPO و تیتر آنتی‌بادی‌های IgG به HSV-1 بود.

مواد و روش تحقیق

این کار بر اساس نتایج بالینی و آزمایشگاهی مطالعات 60 زن باردار با تشدید BBVI در سه ماهه سوم بارداری است. بسته به تیتر آنتی بادی های IgG به HSV-1، زنان باردار به دو گروه تقسیم شدند. گروه اول شامل 30 زن با تیتر آنتی بادی IgG به HSV-1 1:3200، گروه دوم - با تیتر آنتی بادی IgG به HSV-1 1:12800. به عنوان گروه کنترل، 30 زن باردار عملا سالم در همان دوره مورد بررسی قرار گرفتند.

فعالیت فسفولیپاز ترشح شده A2 در خون محیطی زنان باردار با روش ایمونواسی آنزیمی با استفاده از کیت‌های معرف شرکت Cayman Chemical (ایالات متحده آمریکا) تعیین شد. شدت فرآیندهای LPO با تجمع محصولات TBA-active (MDA) مورد قضاوت قرار گرفت که غلظت آن با روش مرسوم با استفاده از تیوباربیتوریک اسید مطابق با روش V.B تعیین شد. گاوریلووا و همکاران .

تیتر آنتی‌بادی‌های HSV-1 با دینامیک آنتی‌بادی‌های IgG با استفاده از سیستم‌های تست استاندارد Vector-Best JSC (Novosibirsk) روی یک میکروپلیت‌خوان Stat-Fax 2100 (ایالات متحده آمریکا) تعیین شد. همه مطالعات با در نظر گرفتن الزامات بیانیه هلسینکی انجمن جهانی "اصول اخلاقی برای انجام تحقیقات علمی پزشکی در مورد انسان" به عنوان اصلاح شده در سال 2000 و "قوانین تمرین بالینی در فدراسیون روسیه"، تایید شده توسط دستور انجام شد. شماره 226 وزارت بهداشت فدراسیون روسیه مورخ 19 ژوئن 2003. همه شرکت کنندگان در مطالعه پروتکل های رضایت آگاهانه داوطلبانه را امضا کردند.

پردازش داده های آماری با استفاده از "سیستم خودکار معاینه بالینی" (دارنده حق چاپ FGBU "DSC FPD" SB RAMS، 2005، نسخه 2.5) انجام شد. نرمال بودن توزیع با استفاده از آزمون کولماگروف اسمیرنوف مورد آزمایش قرار گرفت. داده های مورد تجزیه و تحلیل در مقاله دارای توزیع نرمال بود. بنابراین میانگین حسابی (M) و میانگین حسابی خطای (m) محاسبه شد. فرضیه معناداری آماری دو نمونه مختلف با استفاده از آزمون t استودنت مورد آزمون قرار گرفت و در p< 0,05.

نتایج تحقیق و بحث

تجزیه و تحلیل نتایج مطالعه نشان داد که در طول تشدید BBVI در دوران بارداری در خون محیطی زنان باردار با تیتر آنتی بادی IgG نسبت به HSV-1 1:3200، تشدید جزئی پراکسیداسیون لیپیدی وجود داشت که با افزایش غیرقابل اطمینان مشهود است. در محتوای محصولات فعال TBA (MDA)، در مقایسه با شاخص های مشابه گروه کنترل (جدول).

توجه داشته باشید. p - سطح معنی داری تفاوت بین شاخص ها با گروه کنترل.

در زنان باردار گروه دوم (تیتر آنتی بادی های IgG به HSV-1 1:12800)، محتوای محصولات فعال TBA (MDA) در خون محیطی 34 درصد از سطح قابل قبول فیزیولوژیکی فراتر رفت.< 0,001), по сравнению с контролем (см. таблицу).

لازم به ذکر است که فسفولیپاز A2 جایگاه ویژه ای در بین آنزیم های دخیل در متابولیسم لیپیدها دارد. به دلیل افزایش فعالیت این آنزیم، سطح اسیدهای چرب غیراشباع در شرایط افزایش تشکیل آنها از فسفولیپیدها کاهش می یابد. مطالعه محتوای فسفولیپاز A2 در خون محیطی زنان باردار در سه ماهه سوم با تشدید BBVI نشان داد که با تیتر آنتی بادی IgG به HSV-1 1: 12800، در برابر پس زمینه افزایش محتوای محصولات فعال TBA (MDA) (جدول را ببینید) و با کاهش مقدار آنتی اکسیدان α-توکوفرول، غلظت این ترکیب در مقایسه با شاهد 56 درصد افزایش یافت (جدول را ببینید). هنگامی که تیتر آنتی بادی های IgG نسبت به HSV-1 در خون محیطی زنان باردار 1:3200 بود، هیچ تغییر آماری معنی داری در محتوای این آنزیم مشاهده نشد (جدول). محصولات هیدرولیز فسفولیپیدها توسط فسفولیپاز A2 (لیزوفسفاتیدیل کولین و اسید آراشیدونیک) می توانند به طور مستقیم یا غیر مستقیم در سنتز تعداد قابل توجهی از مواد فعال بیولوژیکی پیش التهابی - پروستاگلاندین ها، ترومبوکسان ها، لکوترین ها شرکت کنند. لیزوفسفاتیدیل کولین دارای خواص جذب شیمیایی برای مونوسیت های در گردش است. می تواند باعث ایجاد پدیده لیز در غشای پلاسمایی سلول های اندوتلیال شود و مرگ آنها را با آپوپتوز آغاز کند. بنابراین، افزایش فعالیت فسفولیپاز A2 در خون محیطی زنان باردار با تشدید BBVI با محتوای محصولات پراکسیداسیون لیپیدی مرتبط است و ممکن است یک عامل پیش آگهی در ارزیابی میزان تغییرات مخرب در دستگاه غشایی، از جمله گلبول های قرمز باشد.

نتیجه

تشدید BBVI در دوران بارداری منجر به تشدید فرآیندهای LPO، افزایش فعالیت آنزیم پیش التهابی فسفولیپاز A2، هیدرولیز فسفولیپیدهای غشایی با تشکیل محصولات سمی لیزوفسفاتیدیل کولین و اسید آراشیدونیک می شود. علت نقض وضعیت ساختاری و عملکردی گلبول های قرمز خون محیطی زنان باردار است. هنگامی که تیتر آنتی‌بادی‌های IgG در برابر HSV-1 1:12800 باشد، تغییرات آشکار شده بیشتر آشکار می‌شوند. نتایج مطالعه نشان می دهد که تغییرات در ترکیب چربی های خون محیطی و فعالیت فسفولیپاز A2 در BBVI می تواند به عنوان معیاری برای درمان اصلاحی هدفمند در زنان باردار با تشدید BBVI باشد.

پیوند کتابشناختی

ایشوتینا N.A. فعالیت فسفولیپاز A2 و وضعیت فرآیندهای پراکسیداسیون لیپید در خون محیطی در زنان باردار مبتلا به عفونت ویروسی هرپس // موفقیت های علوم طبیعی مدرن. - 2013. - شماره 2. - ص 12-14;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=31354 (تاریخ دسترسی: 13/12/2019). مجلات منتشر شده توسط انتشارات "آکادمی تاریخ طبیعی" را مورد توجه شما قرار می دهیم.