گونه شیگلا شیگلا و اسهال خونی (شیگلوز). با مطالب دریافتی چه خواهیم کرد؟

اولین عامل ایجاد کننده اسهال خونی توسط A.V Grigoriev (1891) کشف شد و در سال 1898 دانشمند ژاپنی Shiga آن را بررسی و توصیف کرد. در سالهای بعد، سایر نمایندگان این جنس جدا و توصیف شدند: فلکسنر (1900)، سون (1915)، استوتزر-اشمیتز (1917)، لارج-ساکس (1934).

طبق طبقه بندی بین المللی، تمام باکتری هایی که باعث اسهال خونی می شوند به افتخار شیگا - شیگلا در یک جنس ترکیب می شوند.

مرفولوژی. شیگلا میله های کوچک (2-3 × 0.4-0.6 میکرومتر) با انتهای گرد هستند. آنها با سایر اعضای خانواده Enterobacteriaceae در غیاب تاژک متفاوت هستند. آنها هاگ یا کپسول ندارند. گرم منفی

کشت. شیگلا بی هوازی اختیاری است. بی تکلف به رسانه های مغذی. آنها در MPA و MPB در دمای 37 درجه سانتیگراد و pH 7.2-7.4 تولید مثل می کنند. رسانه های تشخیصی انتخابی و افتراقی برای آنها رسانه های Ploskirev، Endo و EMS هستند. آنها به شکل کلنی های کوچک، نیمه شفاف، خاکستری، گرد، به اندازه 15-2 میلی متر به شکل S رشد می کنند. استثنا Shigella Sonne است که اغلب جدا می شود و کلونی های بزرگ، مسطح، ابری و R شکل با لبه های دندانه دار تشکیل می دهد (شکل 44). در محیط های غذایی مایع، شیگلا کدورت یکنواختی ایجاد می کند، فرم های R یک رسوب تشکیل می دهند.

خواص آنزیمی. خواص آنزیمی شیگلا نسبت به سایر نمایندگان انتروباکتریاسه کمتر مشخص است: آنها کربوهیدرات ها را بدون تشکیل گاز تجزیه می کنند و لاکتوز و ساکارز را تجزیه نمی کنند. استثنا Shigella Sonne است که این کربوهیدرات ها را در روز 2-3 تجزیه می کند.

خواص پروتئولیتیک شیگلا چندان مشخص نیست - تشکیل ایندول و سولفید هیدروژن متناقض است، آنها شیر را خمیر می کنند و ژلاتین را مایع نمی کنند.

در رابطه با مانیتول، تمام شیگلاها به دو دسته تقسیم کننده مانیتول و غیر شکاف کننده تقسیم می شوند (جدول 37).

توجه داشته باشید. k - شکافتن با تشکیل اسید.

در حال حاضر شیگلا سون به چهار نوع آنزیمی تقسیم می شود. آنها در توانایی خود در تجزیه رامنوز و زایلوز متفاوت هستند (جدول 38).

توجه داشته باشید. + تقسیم؛ (+) تقسیم پس از 3-5 روز؛ - تغییر نمی کند.

تشکیل سم. شیگلا دارای اندوتوکسین است. یک استثناء شیگلا شیگا است که علاوه بر اندوتوکسین، یک اگزوتوکسین تولید می کند که اثر نوروتوکسیک دارد.

ساختار و طبقه بندی آنتی ژنی. شیگلا حاوی آنتی ژن های سوماتیکی است که شامل آنتی ژن های گروهی و نوع هستند. طبق طبقه بندی بین المللی، شیگلا به چهار گروه تقسیم می شود که با حروف بزرگ A، B، C، D مشخص می شوند.

گروه A S. dysenteriae: 1 - Grigorieva - Shigi; 2 - اشتوتزر - اشمیتز; 3-7 - بزرگ - ساکسا و 8-10 - موقت. نمایندگان این گروه فقط آنتی ژن های معمولی دارند که با اعداد عربی مشخص شده اند.

گروه B S. flexneri. میکروب های این گروه ساختار آنتی ژنی پیچیده تری دارند - آنها حاوی آنتی ژن های معمولی هستند که با اعداد رومی و آنتی ژن های گروهی با اعداد عربی تعیین می شوند. شیگلا فلکسنر دارای 6 سرووار است. شیگلا فلکسنر 6 قبلاً به عنوان زیرگونه S. newcastle تعیین شده بود.

گروه C S. boydii. فقط آنتی ژن های معمولی دارد. در این گروه 15 نوع سرولوژیکی وجود دارد.

گروه D S. sonnei آنتی ژن اختصاصی خود را دارد (جدول 39).

در بررسی میکروبیولوژیکی، پاسخ ها نشان دهنده سرواریانت و زیرسروی کشت جدا شده است. به عنوان مثال، کشت شیگلا فلکسنر 1a جدا شد.

مقاومت در برابر عوامل محیطی. دمای 100 درجه سانتیگراد شیگلا را فوراً از بین می برد. دمای 60 درجه سانتی گراد آنها را در 20-30 دقیقه از بین می برد. شیگلا در برابر دمای پایین مقاوم است - در آب رودخانه تا 3 ماه، روی سبزیجات و میوه ها - تا 10-15 ماه باقی می ماند. نور خورشید آنها را در 2-3 ساعت می کشد و شیگلا شیگا آنها را در 20 دقیقه می کشد. غلظت های رایج محلول های ضدعفونی کننده پس از 20-30 دقیقه آنها را از بین می برد. شیگلا گروه A کمترین مقاومت را در برابر عوامل خارجی دارد و شیگلا سون بیشترین مقاومت را دارد.

حساسیت حیوانات. حیوانات به جز میمون ها به پاتوژن های اسهال خونی حساس نیستند. عفونت تجربی خرگوش ها و موش های سفید باعث مستی و مرگ آنها می شود.

منابع عفونت. فردی که از اشکال حاد و مزمن اسهال خونی و ناقل باکتری رنج می برد.

مسیرهای انتقال. غذا. آبراه، سبزیجات، میوه ها، اشیاء مختلف آلوده به شیگلا و مگس ها از اهمیت بالایی برخوردار است.

پاتوژنز. شیگلا هنگامی که همراه غذا وارد روده می شود به سلول های اپیتلیال غشای مخاطی روده بزرگ نفوذ می کند و در آنجا تکثیر می شود. آنها تا حدی می میرند. اندوتوکسینی که در طی تخریب باکتری ها ایجاد می شود، غشای مخاطی را حساس می کند، نفوذپذیری رگ های خونی افزایش می یابد و اندوتوکسین جذب خون می شود و باعث مسمومیت می شود. آسیب به غشای مخاطی با تورم، نکروز و خونریزی همراه است. علاوه بر این، این سم بر سیستم عصبی مرکزی تأثیر می گذارد که منجر به اختلالات تغذیه ای می شود. بیماری ناشی از شیگلا شیگا که عمیقاً به غشای مخاطی روده بزرگ نفوذ می کند بسیار شدید است و باعث پرخونی شدید، تورم و اسهال خونی می شود. اگزوتوکسینی که تولید می کنند باعث مسمومیت شدید می شود.

میزان دوز عفونی برای بروز بیماری مهم است.

مصونیت. انسان در برابر عفونت اسهال خونی مقاومت طبیعی دارد. پس از یک بیماری، ایمنی ناپایدار است و پس از اسهال خونی Sonne، عملاً وجود ندارد. در صورت بیماری ناشی از شیگلا اسهال خونی 1 (Grigorieva - Shigi)، ایمنی ضد سمی پایدارتری ایجاد می شود.

جلوگیری. اقدامات عمومی بهداشتی و ضد اپیدمی: جداسازی، تشخیص زودهنگام، ضد عفونی.

پیشگیری خاصاستفاده گسترده ای پیدا نکرده است. به افرادی که با بیماران در تماس بوده اند یک باکتریوفاژ اسهال خونی چند ظرفیتی داده می شود.

رفتار. مجتمع، سولفونامیدها با آنتی بیوتیک. هیچ درمان خاصی وجود دارد.

کنترل سوالات

1. نمایندگان جنس Shigella - عوامل ایجاد کننده اسهال خونی را نام ببرید.

2. رابطه با کدام کربوهیدرات اساس تقسیم شیگلا به دو گروه را تشکیل می دهد؟ چه گونه هایی از شیگلا در هر یک از این گروه ها قرار می گیرند؟

3. راه های نفوذ شیگلا چیست و چه قسمتی از روده را تحت تاثیر قرار می دهد؟

4. چه نوع شیگلا اغلب به شکل R رشد می کند؟

5- کدام گونه شیگلا دارای آنتی ژن نوع و گروه است؟

بررسی میکروبیولوژیکی

هدف از مطالعه: تشخیص و شناسایی شیگلا برای تشخیص. شناسایی ناقلان باکتری؛ تشخیص شیگلا در محصولات غذایی

مواد برای تحقیق

1. حرکات روده.

2. مواد مقطعی.

3. محصولات غذایی.

روشهای اساسی تحقیق

1. میکروبیولوژیک.

2. سرولوژیکی.

پیشرفت مطالعه

روز دوم مطالعه

فنجان های دانه دار از ترموستات خارج می شوند و با چشم غیر مسلح یا از طریق ذره بین بررسی می شوند. کلنی های مشکوک (بی رنگ) به مقدار 4-6 بر روی محیط راسل و مانیتول غربالگری می شوند. کاشت با ضربه روی سطح اریب و با سوراخ کردن در ستون آگار انجام می شود. محیط راسل تلقیح شده به مدت 18-24 ساعت در ترموستات قرار می گیرد (همزمان بذردهی مجدد از محیط سلنیت به محیط دیفرانسیل انجام می شود).

روز سوم مطالعه

محصولات تولید شده بر روی محیط راسل را از ترموستات خارج کنید. کشت هایی که لاکتوز را تجزیه نمی کنند، تحت مطالعه بیشتر قرار می گیرند: اسمیر ساخته می شود، رنگ آمیزی گرم و بررسی میکروسکوپی انجام می شود. در حضور میله های گرم منفی، تلقیح بر روی محیط هیس، آبگوشت با کاغذهای شاخص (برای تشخیص ایندول و سولفید هیدروژن) و شیر لیتموس انجام می شود. محیط های تلقیح شده به مدت 18-24 ساعت در ترموستات قرار می گیرند.

روز چهارم تحقیق

محصولات را از ترموستات خارج کنید و نتیجه را در نظر بگیرید. کشت هایی که به دلیل خواص آنزیمی و فرهنگی خود در رابطه با شیگلا مشکوک هستند (به جدول 37 مراجعه کنید) در معرض شناسایی سرولوژیکی قرار می گیرند. در صورت نبود چنین فرهنگ هایی پاسخ منفی داده می شود.

شناسایی سرولوژیکی

گونه، سرووار و زیرسروار کشت جدا شده با استفاده از سرم های جذب شده تعیین می شود. تجزیه و تحلیل ساختار آنتی ژنی با واکنش آگلوتیناسیون روی شیشه با مخلوط شماره 1 آغاز می شود. این مخلوط شامل سرم هایی با آنتی بادی های شیگلا سون، نیوکاسل و سرم چند ظرفیتی شیگلا فلکسنر است. اگر واکنش آگلوتیناسیون با مخلوط مثبت باشد، کشت جدا شده به طور جداگانه با هر سرم موجود در مخلوط آگلوتینه می شود.

واکنش آگلوتیناسیون مثبت با سرم جذب شده به شیگلا سون و نیوکاسل این حق را می دهد که پاسخ دهد. برای ایجاد سرووار و ساب سرووار شیگلا فلکسنر، علاوه بر این لازم است که واکنش های آگلوتیناسیون با سرم های استاندارد (I، II، III، IV، V) و گروه (1-3، 4-6-7، 8) انجام شود. به عنوان مثال، کشت جدا شده با سرم نوع II و سرم گروه 3، 4 واکنش مثبت نشان داد. پاسخ: شیگلا فلکسنر 2a ایزوله شد.

اگر با مخلوط شماره 1 آگلوتیناسیون وجود نداشته باشد، واکنش آگلوتیناسیون با سایر سرم های چند ظرفیتی انجام می شود.

هنگام انجام یک واکنش آگلوتیناسیون، باید رابطه فرهنگ مورد مطالعه با مانیتول را در نظر گرفت و بسته به این، از یک یا سرم دیگر استفاده کرد. بنابراین، کشت هایی که مانیتول را تجزیه نمی کنند با سرم های چند ظرفیتی در برابر شیگلا اسهال خونی Grigoriev-Shiga و Stutzer-Schmitz (1، 2)، Large-Sachs (3-7)، انواع موقت (8-10) آزمایش می شوند.

کشت هایی که مانیتول را تجزیه می کنند با مخلوط شماره 1 و سرم های چند ظرفیتی علیه شیگلای Boyd's آزمایش می شوند.

اگر آگلوتیناسیون کشت جدا شده یکی از این سرم ها وجود داشته باشد، آزمایش کشت با هر یک از سرم های موجود در سرم چند ظرفیتی انجام می شود. یک نتیجه مثبت با یکی از سرم ها، سرواریانت کشت جدا شده را تعیین می کند.

هنگام استفاده از سرم شیگلا بوید، آگلوتیناسیون با سرم سروواری که بیشتر در آن ناحیه رایج است آغاز می شود. در کشور ما، سرووارانت های 4، 5، 7، 9 و 12 شیگلا بوید اغلب جدا می شوند (شکل 44 را ببینید).

به عنوان روش های تسریع یافته تحقیقات میکروبیولوژیکی برای اسهال خونی، میکروسکوپ فلورسنت و آزمایش بیولوژیکی بر روی خوکچه هندی استفاده می شود. هنگامی که سویه های بدخیم شیگلا به کیسه ملتحمه (زیر پلک پایین) وارد می شوند، در پایان روز اول، حیوانات به ملتحمه مبتلا می شوند.

کنترل سوالات

1. برای بررسی باکتریولوژیک در تشخیص اسهال خونی از چه موادی استفاده می شود و چگونه جمع آوری می شود؟

2. تجزیه کدام کربوهیدرات حق پاسخ منفی را می دهد؟

3. برای تعیین گونه، زیرگونه، سرووار و ساب سرووار شیگلا فلکسنر از چه سرمی می توان استفاده کرد؟

4. در مخلوط شماره 1 چه سرم هایی وجود دارد؟

نمودار مطالعه اسهال خونی را به صورت روز مطالعه کنید.

رسانه فرهنگ

رسانه Ploskirev، Endo، EMS(به فصل 19 مراجعه کنید).

جنس اشرشیا.

اشریشیا شایع ترین باکتری هوازی روده ای است که تحت شرایط خاصی می تواند باعث ایجاد گروه وسیعی از بیماری های انسانی اعم از روده ای (اسهال) و خارج روده ای (باکتریمی، عفونت های ادراری و غیره) شود. گونه اصلی E. coli (Escherichia coli) است - شایع ترین عامل بیماری های عفونی ناشی از انتروباکتری ها. این پاتوژن نشانگر آلودگی مدفوع به خصوص در آب است. اگر - تیتر و اگر - شاخص اغلب به عنوان شاخص های بهداشتی استفاده می شد. اشرشیا بخشی از میکرو فلور روده بزرگ پستانداران، پرندگان، خزندگان و ماهی ها است.

املاک فرهنگیدر محیط های مایع، E. coli کدورت منتشر را در محیط جامد ایجاد می کند، کلنی های S و R را تشکیل می دهد. در اندو، محیط اصلی برای E. coli، مستعمرات تخمیرکننده لاکتوز با درخشندگی فلزی، مستعمرات صورتی کم رنگ یا بی رنگ با مرکز تیره تر تشکیل می دهند. در محیط لوین آنها آبی تیره با درخشندگی فلزی هستند.

خواص بیوشیمیاییدر بیشتر موارد، E. coli کربوهیدرات ها (گلوکز، لاکتوز، مانیتول، آرابینوز، گالاکتوز و غیره) را با تشکیل اسید و گاز تخمیر می کند، ایندول تولید می کند، اما سولفید هیدروژن را تشکیل نمی دهد و ژلاتین را مایع نمی کند.

ساختار آنتی ژنیکهیچ تفاوت مورفولوژیکی قابل توجهی بین اشریشیا کلی بیماری زا و غیر بیماری زا مشاهده نشد. تمایز آنها بر اساس مطالعه خواص آنتی ژنی است. در بین آنتی ژن های سطحی، آنتی ژن های O پلی ساکارید، آنتی ژن H تاژک دار و آنتی ژن K پلی ساکارید کپسولی متمایز می شوند. بیش از 170 نوع آنتی ژن O شناخته شده است (این مربوط به پاتوژن متعلق به یک خاص است. سروگروپ) و 57 - آنتی ژن H (متعلق به سرووار). قسمت اسهال زا(مشاهده اسهال) اشریشیا کلی شامل 43 گروه O و 57 نوع OH است.

عوامل اصلی بیماری زایی اشریشیاکلی اسهالی.

1. عوامل چسبندگی، کلونیزاسیون و تهاجم مرتبط با پیلی، ساختارهای فیمبریال و پروتئین های غشای خارجی. آنها توسط ژن های پلاسمید کدگذاری می شوند و باعث ایجاد کلونیزاسیون در قسمت تحتانی روده کوچک می شوند.

2. اگزوتوکسین ها: سیتوتونین ها (تحریک بیش از حد مایع توسط سلول های روده، متابولیسم آب-نمک را مختل می کنند و باعث ایجاد اسهال می شوند) و انتروسیتوتوکسین ها (روی سلول های دیواره روده و اندوتلیوم مویرگی عمل می کنند).

3. اندوتوکسین (لیپوپلی ساکارید).

بسته به وجود عوامل بیماری زایی مختلف، E. coli اسهالی به پنج نوع اصلی تقسیم می شود: انتروتوکسیژنیک، انترو تهاجمی، انتروپاتوژن، انتروهموراژیک، انترو چسبنده.

4. E. coli بیماری زا با تولید باکتریوسین (کولیسین) مشخص می شود.

E.coli انتروتوکسیژنیکدارای یک سم حساس به حرارت با مولکولی بالا، شبیه به وبا، که باعث اسهال شبیه وبا می شود (گاستروانتریت در کودکان خردسال، اسهال مسافرتی، و غیره).

اشریشیا کلی تهاجمیقادر به نفوذ و تکثیر در سلول های اپیتلیال روده است. آنها باعث اسهال شدید مخلوط با خون و تعداد زیادی لکوسیت (شاخص یک فرآیند تهاجمی) در مدفوع می شوند. از نظر بالینی شبیه اسهال خونی است. سویه‌ها شباهت‌هایی با شیگلا دارند (ثابت، لاکتوز تخمیر نمی‌کنند و خاصیت تهاجمی بالایی دارند).

انتروپاتوژن E.coli- عوامل اصلی اسهال در کودکان. ضایعات بر اساس چسبندگی باکتری ها به اپیتلیوم روده با آسیب به میکروویلی است. با اسهال آبکی و کم آبی شدید مشخص می شود.

اشرشیاکلی انتروهموراژیکباعث اسهال مخلوط با خون (کولیت هموراژیک)، سندرم همولیتیک-اورمیک (کم خونی همولیتیک همراه با نارسایی کلیه). شایع ترین سروتیپ اشریشیاکلی انتروهموراژیک O157:H7 است.

انتروچسب E. coliسیتوتوکسین ها را تشکیل نمی دهند، که مطالعه ضعیفی دارند.

همهگیرشناسی.مکانیسم اصلی انتشار اشریشیاکلی اسهالی مدفوعی-دهانی است. عفونت می تواند از طریق غذا، آب و هنگام مراقبت از حیوانات رخ دهد. از آنجایی که اشریشیا در روده بسیاری از گونه های جانوری زندگی می کند، تعیین منبع خاص عفونت دشوار است. مسیر تماس عفونت می تواند در موسسات بسته باشد. E. coli انتروپاتوژن و انتروپاتوژن شایع ترین علل شیوع بیماری اشریشیوز در بیمارستان هستند.

تشخیص آزمایشگاهی.رویکرد اصلی جداسازی یک کشت خالص بر روی محیط‌های تشخیصی افتراقی و شناسایی آن توسط خواص آنتی ژنی است. RA با مجموعه ای از سرم های چند ظرفیتی OK (به آنتی ژن های O و K) قرار داده می شود، سپس سرم های O جذب می شود و کشت ها در 100 درجه سانتیگراد گرم می شوند (برای از بین بردن آنتی ژن های K).

تمایز بیوشیمیایی از اهمیت بیشتری برخوردار است. شناسایی انواع اسهالی با شناسایی نشانگرهای خاص امکان پذیر است (E.coli انتروهموراژیک سوربیتول را تخمیر نمی کند و سرووار O157:H7 فعالیت بتا گلوکورونیداز را نشان نمی دهد).

جنس شیگلا.

شیگلا یک پاتوژن روده ای انسان و پستانداران است که باعث اسهال خونی باسیلی یا شیگلوزیس می شود. با توجه به ساختار آنتی ژنی آنتی ژن O و خواص بیوشیمیایی، سروتیپ های شناخته شده شیگلا به چهار گونه یا سروگروه تقسیم می شوند - S.dysenteriae (گروه A)، S.flexneri (سروگروه B)، S.boydii (سرم گروه C) ) و S.sonnei (سروگروه D).

توسط ویژگی های مورفولوژیکیشیگلا هیچ تفاوتی با سایر انتروباکتری ها ندارد. اینها میله های گرم منفی بی هوازی اختیاری غیر اختصاصی هستند.

خواص بیوشیمیاییشیگلا در مقایسه با سایر باکتری های روده از نظر بیوشیمیایی غیر فعال است. آنها روی آهن آگار سه قندی سولفید هیدروژن تشکیل نمی دهند و اوره را تخمیر نمی کنند.

سویه های S.dysenteriae (گروه A) کمترین فعالیت آنزیمی را دارند و بر خلاف سایر شیگلاها، تنها گلوکز را تخمیر می کنند.

شیگلا فلکسنر مانیتول را تخمیر می کند و ایندول تولید می کند، اما لاکتوز، دولسیت و زایلوز را تخمیر نمی کند. سروتیپ نیوکاسل به سه نوع بیوشیمیایی تقسیم می شود. برای شیگلا فلکسنر، مسیر انتقال از طریق آب معمولی تر است.

Boyd's Shigella (سروگروه C) فعالیت بیوشیمیایی مشابهی دارد، اما دولسیت، زایلوز و آرابینوز را تخمیر می کند. آنها تعدادی سروتیپ دارند که هر کدام آنتی ژن نوع اصلی خود را دارند.

Shigella Sonne (سرم گروه D) قادر به تخمیر آهسته لاکتوز و ساکارز است و دارای انواع بیوشیمیایی و فاگوتیپ است. راه اصلی انتقال غذا (معمولاً از طریق شیر و فرآورده های لبنی) است.

ساختار آنتی ژنیکشیگلا دارای آنتی ژن های O و K است. آنتی‌ژن‌های O دارای اپی‌توپ‌هایی با ویژگی‌های متفاوت هستند - از آن‌هایی که در خانواده انتروباکتری‌ها تا نوع خاص دارند. طبقه بندی فقط گروه پایدار در برابر حرارت (چهار گروه یا نوع - A، B، C و D) و نوع خاص (تقسیم به سروتیپ ها) را در نظر می گیرد. آنتی ژن های حساس به حرارت شامل آنتی ژن های K (در گروه های A و C یافت می شوند) و آنتی ژن های فیمبریال (در شیگلا فلکسنر از نظر آنتی ژنی مشابه E.coli هستند). تعیین ساختار آنتی ژنی برای شناسایی نهایی ضروری است.

همهگیرشناسی.شیگلا در محیط خارجی کاملاً پایدار است. منبع عفونت فردی با اشکال مختلف تظاهرات بالینی شیگلوز است. مکانیسم عفونت مدفوعی-دهانی است. انواع مختلف شیگلا با راه های اصلی انتقال مشخص می شود (تماس با خانواده - برای S.dysenteriae، غذا - برای S.sonnei، آب - برای S.flexneri). روند اپیدمی با تغییر در ساختار جمعیت های در حال گردش پاتوژن ها مشخص می شود - تغییر در گونه های پیشرو، بیووارها، سرووارها، که هم با تغییر در ایمنی جمعیت و هم با تغییر در ویژگی های پاتوژن، به ویژه با اکتساب همراه است. پلاسمیدهای مختلف (R، F، Col و غیره). دوز عفونی حدود 200 - 300 شیگلا است. اسهال خونی ناشی از شیگلا سون سیر خفیف تری دارد.

عوامل بیماری زایی و پاتوژنز ضایعات.ویژگی اصلی بیولوژیکی شیگلا توانایی حمله به سلول های اپیتلیال، تکثیر در آنها و مرگ آنها است. تشکیل ضایعه در مخاط کولون نزولی (سیگموئید و رکتوم) چرخه ای است: چسبندگی، کلونیزاسیون، ورود شیگلا به سیتوپلاسم انتروسیت ها، تولید مثل، تخریب و رد سلول های اپیتلیال، انتشار شیگلا در لومن روده، چسبندگی دوباره و غیره

نقش عوامل چسبندگی و کلونیزاسیونتوسط پیلی، پروتئین های غشای خارجی، LPS، آنزیم ها - نورآمینیداز، موسیناز، هیالورونیداز (مخاط را از بین می برد) انجام می شود.

شیگلا دارای طیف وسیعی از عوامل تهاجم و مقاومتبه عملکرد مکانیسم های دفاعی (آنتی ژن K، LPS و غیره) که توسط ژن ها و پلاسمیدهای کروموزومی شیگلا کنترل می شود.

شیگلا متفاوت است سمومآنها اندوتوکسین و سیتوتوکسین های شیگا مانند (SLT-1، SLT-2) دارند. سیتوتوکسین ها باعث تخریب سلولی، انتروتوکسین باعث اسهال و اندوتوکسین باعث مسمومیت عمومی می شود. سم شیگاباعث اختلال در سنتز پروتئین، جذب یون های سدیم و آب و هجوم مایعات به محل التهاب می شود.

بارزترین علائم اسهال خونی اسهال است، تنسموس(اسپاسم دردناک راست روده) و اصرار مکرر، مسمومیت عمومی. ماهیت مدفوع با درجه آسیب به روده بزرگ تعیین می شود.

ایمنی پس از عفونی- بادوام، نوع خاص.

تشخیص آزمایشگاهی.روش اصلی تشخیصی باکتریولوژیک است. مدفوع بر روی محیط های تشخیص افتراقی Endo و Ploskirev تلقیح می شود تا کلنی های جدا شده به دست آید. کشت های خالص با توجه به خواص بیوشیمیایی آنها مورد مطالعه قرار می گیرند، شناسایی در RA با سرم های چند ظرفیتی و تک ظرفیتی انجام می شود. اگر کشت جدا شده دارای خواص بیوشیمیایی شیگلا باشد، اما سرم ها را به آنتی ژن های O آگلوتینه نکند، باید به مدت 30 دقیقه بجوشد تا آنتی ژن های K حساس به حرارت که اغلب از آگلوتیناسیون سروگروه های A و C شیگلا جلوگیری می کند (یعنی. ، داشتن آنتی ژن K) و دوباره تحقیق در RA.

برای تشخیص سرولوژیک از RPGA با تشخیص گروه گلبول قرمز استفاده می شود.

سخنرانی شماره 8. نمایندگان جنس Vibrio، Campylobacter، Helicobacter.

جنس ویبریو.

خانواده Vibrionaceae شامل باکتری های متحرک، خمیده، میله ای شکل با تاژک های قطبی است. به طور تکاملی از باکتری‌های آبزی مشتق شده‌اند، و به طور گسترده در آب شیرین و دریا، در میزبان‌های بی مهرگان و مهره‌داران توزیع می‌شوند. گونه های بیماری زا برای انسان به عنوان جنس طبقه بندی می شوند ویبریو، آئروموناسو پلسیوموناس.

جنس ویبریو با میله های گرم منفی کوتاه، مستقیم یا منحنی، متحرک، تشکیل نشدن هاگ یا کپسول و رشد خوب در محیط های معمولی مشخص می شود. آنها کربوهیدرات ها را با تشکیل اسید بدون گاز تخمیر می کنند و به عامل ویبریوستاتیک O/129 حساس هستند. قابل کشت در دماهای مثبت 18 تا 37 درجه سانتیگراد، pH 8.6-9.0.

نمایندگان جنس Vibrio با آزمایشات بیوشیمیایی از سایر جنس های خانواده متمایز می شوند. این جنس دارای بیش از 25 گونه است که اهمیت اصلی آنها می باشد ویبریوکلرا-عامل ایجاد کننده وبا، و همچنین V.parahaemolyticum، V.vulnificus.

ویبریوکلرا.

مرفولوژی. Vibrio cholerae یک تاژک قطبی دارد که اغلب شبیه کاما است ( کاما کخ). یک علامت تشخیصی مهم تحرک است (که با میکروسکوپ با استفاده از روش آویزان یا له شده تعیین می شود). از نظر مورفولوژی متغیر است. آنها به خوبی با فوشین آبی پففر و فوشسین کربولیک زیل لکه می شوند.

املاک فرهنگیبی هوازی اختیاری Vibrio cholerae نسبت به مواد مغذی بی تکلف است. این ماده در آب پپتون قلیایی 1٪ (با pH 8.6-9.0) به خوبی تکثیر می شود و از باکتری های گروه روده (محیط غنی کننده) پیشی می گیرد و یک لایه آبی ظریف و کدورت ایجاد می کند. برای سرکوب رشد پروتئوس و برخی میکروارگانیسم های دیگر از پپتون واتر با افزودن تلوریت پتاسیم استفاده می شود.

در محیط جامد، Vibrio cholerae کلنی‌های صاف، شیشه‌ای، شفاف و دیسکی شکل با رنگ مایل به آبی و قوام چسبناک تشکیل می‌دهد. از آگار قلیایی، آگار نمک صفراوی، آگار خون قلیایی، بهترین آگار TCBS (آگار با تیوسولفات، سیترات، نمک های صفراوی و ساکارز) استفاده کنید.

خواص بیوشیمیایی Vibrio cholerae بسیاری از کربوهیدرات ها (گلوکز، ساکارز، مانوز، مانیتول، لاکتوز، لوولوز، گلیکوژن، نشاسته) را با تشکیل اسید بدون گاز تخمیر می کند. در رابطه با سه قند ( سه گانه هایبرگ) - ساکارز، مانوز و آرابینوز، ویبریوها به هشت گروه بیوشیمیایی تقسیم می شوند، ویبریوکلرا به گروه اول تعلق دارد (ساکارز و مانوز را تجزیه می کند).

ویبریو کلرا ژلاتین، کازئین را تجزیه می کند، شیر را منعقد می کند و مواد پروتئینی را به ایندول و آمونیاک تجزیه می کند.

گونه V.cholerae به دو دسته تقسیم می شود بیوتیپ ها، سروگروپ هاو سرووارها. بیوتیپ های اصلی کلاسیک (V.cholerae asiaticae) و El Tor (V.cholerae eltor) هستند. سروگروپ ها با ساختار O-آنتی ژن ها در گروه اصلی O1 Vibrio cholerae متمایز می شوند.

ساختار آنتی ژنیکدر Vibrio cholerae، آنتی‌ژن‌های O مقاوم در برابر حرارت و آنتی‌ژن H حساس به گرما جدا می‌شوند. بر اساس ساختار آنتی ژن O، 139 سروگروپ شناسایی شده است، بیوتیپ های El Tor و کلاسیک در گروه 01 (تایپ شده توسط آنتی سرم 01) ترکیب می شوند. جدایه های El Tor با خواص همولیتیک (باعث همولیز گلبول های قرمز گوسفند)، توانایی لخته شدن گلبول های قرمز مرغ، مقاومت در برابر پلی میکسین و حساسیت به فاژها مشخص می شوند.

آنتی ژن O از گروه 01 ناهمگن است و شامل یک جزء مشترک A و دو جزء خاص - B و C است. سرووار Ogawa با توجه به وجود آنها دارای ترکیب AB، Inaba - AC، Hikojima - ABC است.

Vibrio cholerae می تواند از فرم S به R منتقل شود بدون اینکه توسط O- سرم آگلوتینه شود. با توجه به ساختار آنتی ژنی، از سرم O، سرم OR (برای شناسایی OR- و R- تفکیک شده)، سرم های نوع خاص Inaba (C) و Ogawa (B) برای شناسایی V.cholerae استفاده می شود. در دهه 90 سرووار جدیدی V.cholerae 0139 شناسایی شد که توسط سرم های فوق آگلوتینه نمی شود و از نظر خواص دیگر با گروه Vibrio cholerae 01 تفاوت کمی دارد.

ویبریوهایی که توسط سرم اصلی 01 تایپ نمی شوند (یعنی به گروه 01 تعلق ندارند) ویبریوهای غیر آگلوتینه کننده (NAG) - شبه وبا یا پاراکلرا نامیده می شوند. آنها یک آنتی ژن H مشترک با ویبریو کلرا دارند، اما در آنتی ژن O متفاوت هستند.

بر اساس آنتی ژن H، گروه های A و B، ویبریوهای وبا را در گروه A قرار می دهند.

عوامل بیماری زایی ویبریوکلرا.

1. تحرک(تاژک) و کموتاکسی.

2. آنزیم هاچسبندگی و کلونیزاسیون، تعامل با سلول های اپیتلیال - موسیناز (رقیق شدن مخاط)، نوتامینیداز (تعامل با میکروویلی، ایجاد محل فرود)، لسیتیناز و غیره را افزایش می دهد.

3. اندوتوکسین- لیپوپلی ساکارید مقاوم در برابر حرارت، از نظر ساختار و خواص مشابه سایر اندوتوکسین های باکتری های گرم منفی.

4. اگزوتوکسین - کلروژن ها- عامل اصلی بیماری زایی، یک پروتئین حساس به حرارت است. سنتز کلروژن مهمترین ویژگی ژنتیکی ویبریو کلرا است. مولکول کلروژن از دو قطعه A و B تشکیل شده است. عملکرد سمی واقعی توسط پپتید A 1 قطعه A انجام می شود. مولکول کلروژن گیرنده انتروسیت را می شناسد، به غشای سلولی نفوذ می کند، سیستم آدنیلات سیکلاز را فعال می کند، AMP حلقوی تجمعی باعث ترشح بیش از حد می شود. مایع، Na +، HCO 3 -، K +، Cl - از انتروسیت ها. این منجر به اسهال، کم آبی و نمک زدایی بدن می شود که مشخصه وبا است.

5. در بسیاری از ویبریوها، از جمله. متعلق به گروه 01 نیست، انواع مختلفی دارد انتروتوکسین ها.

6. در پاتوژنز تظاهرات وبا عاملی که باعث افزایش نفوذپذیری مویرگی می شود نیز مهم است.

برخی از ویژگی های اپیدمیولوژیوبا یک عفونت روده ای است. منبع اصلی یک فرد (بیمار یا حامل ارتعاش)، آب آلوده است. روش عفونت مدفوعی – دهانی است. حساسیت فردی به وبا بسیار متغیر است. با تعداد زیادی اشکال پنهان (پاک شده)، ارتعاشی مشخص می شود. تشخیص پاتوژن در آب با حضور بیماران یا ناقلان باکتری ارتباط مستقیم دارد. ویبریوهای وبا از گروه 01 می توانند برای مدت طولانی در اکوسیستم های آبی به شکل باقی بمانند. اشکال کشت نشده.

تشخیص آزمایشگاهی.وبا متعلق به گروه عفونت های به خصوص خطرناک است. روش اصلی تشخیصی باکتریولوژیکی است که شامل جداسازی و شناسایی پاتوژن است.

مواد برای تحقیق - مدفوع و استفراغ، مواد مقطعی از مردگان، نمونه های آب و سواب از اشیاء محیطی، مواد غذایی باقی مانده است.

برای تلقیح، از محیط های غنی کننده مایع، MPA قلیایی، محیط های تشخیصی انتخابی و افتراقی (ترجیحا TCBS) استفاده می شود. آب پپتون 1% به عنوان یک وسیله حمل و نقل راحت تر است. کلنی‌های شفاف شیشه‌ای مشکوک برای به دست آوردن یک کشت خالص که با ویژگی‌های مورفولوژیکی، فرهنگی، بیوشیمیایی، تحرک، خواص آنتی ژنیک و فاگوتیپ شناسایی می‌شود، زیر کشت می‌روند.

برای تشخیص سریع، روش ایمونولومینسانس، شناسایی بیوشیمیایی با مجموعه ای از دیسک های نشانگر، برای تشخیص ویبریوس وبا در مواد اولیه - RNGA با تشخیص آنتی بادی، برای تشخیص اشکال غیرقابل کشت - PCR، برای تعیین حدت و بیماری استفاده می شود. سنتز کلروژن - سنجش زیستی بر روی خرگوش های شیرده، الایزا، پروب های DNA (تشخیص قطعه کروموزوم حامل اپرون کلروژن).

پیشگیری خاصواکسن های مختلفی وجود دارد - از سرووارهای Inaba و Ogawa، سموم کلراژن، واکسن شیمیایی دو ظرفیتی کشته شده اند. واکسن ها فقط برای نشانه های اپیدمیولوژیک (ایمنی زایی کم) استفاده می شوند. پروفیلاکسی آنتی بیوتیکی (درمان پیشگیرانه) با تتراسایکلین و سایر آنتی بیوتیک ها می تواند انجام شود.

V. parahaemolyticus(Vibrio parahemolytic) نوعی هالوفیل است که در آب دریا (ژاپن، سیاه، خزر و سایر دریاهای جنوبی) یافت می شود. هنگام مصرف غذاهای دریایی که تحت عملیات حرارتی کافی قرار نگرفته اند، این پاتوژن باعث بیماری های ناشی از غذا و اسهال خونی - بیماری های مشابه - در افراد می شود. باعث همولیز در آگار خون با افزایش غلظت کلرید سدیم (7٪ NaCl - سویه هایی با خواص انتروپاتوژنیک) می شود.

V. vulnificus- بیماریزاترین گونه ویبریوهای غیر وبا برای انسان. در آب دریا و ساکنان آن شناسایی شده است. باعث عفونت زخم، سپتی سمی و سایر بیماری ها می شود. ساکارز و لاکتوز را تخمیر می‌کند و کلنی‌های زرد روی TCBS آگار تشکیل می‌دهد.

نمایندگان جنس کمپیلوباکتر و هلیکوباکتر.

میکروآئروفیل های گرم منفی این دو جنس، باکتری های میله ای شکل کوچک، متحرک، غیر اسپورساز، خمیده (S شکل یا بال مرغان) هستند. گونه هایی که جنس هلیکوباکتر را تشکیل می دهند، از جمله هلیکوباکتر پیلوری، عامل بیماری زخم پپتیک انسان، از جنس کمپیلوباکتر جدا شده اند.

جنس کمپیلوباکتر

این جنس شامل 13 گونه باکتری مارپیچی با یک یا چند فر است. کمپیلوباکترها میکروارگانیسم های متحرک با تاژک های قطبی (یا تاژک) و حرکت مارپیچ هستند. آنها کربوهیدرات ها، کاپروفیل ها و میکروآئروفیل ها را تخمیر یا اکسید نمی کنند، یعنی. نیاز به افزایش غلظت CO 2 و کاهش غلظت O 2 دارد.

این جنس شامل گونه های بیماری زا برای انسان و حیوانات خونگرم است. بیماری هایی که آنها ایجاد می کنند کمپیلوباکتریوز - بیماری های حاد روده ای است که با آسیب به دستگاه گوارش رخ می دهد. کمپیلوباکترها اغلب از روده ها، حفره دهان و اندام های ادراری تناسلی حیوانات خونگرم جدا می شوند.

یک گروه از C.jejuni (شامل این گونه، و همچنین C.coli، C.lari) یا کمپیلوباکتری گرمادوست وجود دارد. آنها با درجه حرارت بالا برای رشد (+42 0 C) متمایز می شوند.

در میان کمپیلوباکتری های مزوفیل با رشد بهینه در دمای 0+37 C.Fetus نقش مهمی در آسیب شناسی انسان ایفا می کند (باعث آرتریت، مننژیت، واسکولیت، سقط جنین) و همچنین تعدادی از گونه های بیماری زا مشروط (C.concisus و C) وجود دارد. .sputorum - در حفره های دهان، C.fennelliae، C.cinaedi و C.hyointestinalis - در روده بزرگ).

املاک فرهنگیکمپیلوباکترها برای ایجاد شرایط میکروآئروفیلیک، pH - 7.0-7.2، شرایط مزوفیلیک (+42 0 C برای گرما دوست، +37 0 C برای دیگران) به مخلوط‌های گازی خاصی نیاز دارند. آنها از مواد مغذی ویژه (گوشت، جگر، خون) با افزودن آنتی بیوتیک های انتخابی استفاده می کنند. برای به دست آوردن نمونه های خالص تر برای کشت (کمپروفیلترات ها اغلب مورد مطالعه قرار می گیرند!)، می توان از فیلتراسیون از طریق فیلترهای غشایی با قطر منافذ 0.65 میکرومتر استفاده کرد. در رسانه های متراکم آنها دو نوع کلنی تشکیل می دهند - "گسترش" با لبه های ناهموار یا محدب براق با لبه های صاف، کلنی های کوچک.

خواص بیوشیمیاییآنها نسبت به کربوهیدرات ها بی اثر هستند، نیترات ها را کاهش می دهند، اکسیداز مثبت هستند، انرژی از اسیدهای آمینه و اسیدهای تری کربوکسیلیک به دست می آید. تمایز گونه ها بر اساس خواص بیوشیمیایی بر اساس هیدرولیز هیپورات(C.jejuni و C.coli)، حساسیت به نالیدیکسیک اسید(C.jejuni و C.lari)، تشکیل سولفید هیدروژن و غیره.

ساختار آنتی ژنیککمپیلوباکترها دارای آنتی ژن های O-، H- و K هستند. آنتی‌ژن‌های O از نظر حرارتی پایدار برای سروتیپ‌سازی اهمیت اولیه دارند.

ویژگی های اپیدمیولوژیککمپیلوباکتر در گونه های مختلف پستانداران و پرندگان رایج است. راه اصلی انتقال غذا است. فصلی عمدتا تابستانی معمولی است.

عوامل بیماریزای اصلیکمپیلوباکترها با فعالیت چسبنده و تهاجمی بالا، کلونیزاسیون سریع قسمت های فوقانی روده کوچک مشخص می شوند. مهم ترین عوامل چسبندگی تاژک ها و چسب های سطحی خاص هستند. این باکتری ها دارای اندوتوکسین هستند که یک انتروتوکسین حساس به حرارت است.

تظاهرات بالینی- انتروکولیت

تشخیص آزمایشگاهی.روش میکروسکوپی - رنگ آمیزی با محلول آبی 1٪ فوشسین پایه به مدت 10-20 ثانیه - زنجیره های کوتاه S شکل "بال مرغان" را نشان می دهد. روش اصلی باکتریولوژیک است - کشت مدفوع. فرهنگ ها با مجموعه ای از ویژگی ها شناسایی می شوند.

هلیکوباکتر پیلوری.

زخم معده بیماری است که با وجود نقص اولسراتیو در مخاط معده یا دوازدهه مشخص می شود. کشف هلیکوباکتر پیلوری به انقلابی در ایده‌های مربوط به علت، پاتوژنز، درمان و پیشگیری از بیماری زخم پپتیک منجر شد. بیماری زخم پپتیک تقریباً 100٪ با هلیکوباکتر پیلوری مرتبط است. عوامل استرس زا و ویژگی های روانی بیماران و نیز عوامل ژنتیکی در بروز این بیماری نقش بسزایی دارند.

خواص مورفولوژیکی و فرهنگی- مشابه کمپیلوباکتر. شکلات آگار را ترجیح می دهد.

خواص بیوشیمیاییدارای اوره آز، اکسیداز و کاتالاز مثبت است.

خواص آنتی ژنیکدارای آنتی ژن O و H است.

پاتوژنز ضایعات.هلیکوباکتر از طریق لایه مخاطی (معمولاً در آنتروم معده و دوازدهه) نفوذ می کند، به سلول های اپیتلیال می چسبد و به کریپت ها و غدد غشای مخاطی نفوذ می کند. آنتی ژن های باکتریایی (عمدتاً LPS) مهاجرت نوتروفیل ها را تحریک کرده و باعث التهاب حاد می شوند. هلیکوباکتر در ناحیه مسیرهای بین سلولی قرار دارد که به دلیل کموتاکسی به اوره و هیمین (تخریب هموگلوبین گلبول قرمز در عروق ریز) است. تحت تأثیر هلیکوباکتر اوره آز، اوره به آمونیاک تجزیه می شود که عملکرد آن با آسیب به غشای مخاطی معده و دوازدهه همراه است. بسیاری از آنزیم ها (موسیناز، فسفولیپاز و غیره) نیز می توانند باعث ایجاد اختلال در یکپارچگی غشاهای مخاطی شوند.

عوامل بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری در درجه اول شامل عوامل کلونیزاسیون (چسبندگی، تحرک)، عوامل ماندگاری و عوامل ایجاد کننده بیماری می باشد. عوامل کلیدی در جهت گیری و بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری شامل مکانیسم های چسبندگی و ترشح سموم باکتریایی است. شواهدی برای نقش اصلی آنتی ژن لوئیس B به عنوان یک گیرنده چسبندگی ارائه شده است. علاوه بر آنها، موسین معده و سولفاتیدهای مخاط معده مهم هستند. پروتئین Bab A پاتوژن (آدهزین) شناسایی شده است که به میکروارگانیسم اجازه می دهد به آنتی ژن گروه خونی لوئیس B موجود در سطح سلول های اپیتلیال معده متصل شود. سایر عوامل بیماری زایی عبارتند از cag A (ژن مرتبط با سیتوتوکسین) و vac A (سیتوتوکسین واکوئل کننده). سویه‌هایی که این نشانگرهای حدت را بیان می‌کنند متعلق به سویه‌های نوع اول هستند که با افزایش پتانسیل زخم‌زایی و التهابی همراه هستند، برخلاف سویه‌های نوع دوم که این عوامل را ندارند.

وجود هر سه عامل (Bab A، cag A، vacA) برای تظاهر خواص بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری (سویه های سه گانه - مثبت) ضروری است. اثر مخرب روی مخاط می تواند هم با اثر مستقیم سموم باکتریایی و هم با اثرات غیر مستقیم از طریق سیستم ایمنی همراه باشد. تداوم طولانی مدت پاتوژن با تعدادی مکانیسم همراه است که به آن اجازه می دهد بر موانع محافظتی غشای مخاطی غلبه کند و توانایی تشکیل اشکال کوکالی که پتانسیل بیماری زایی ندارند را ایجاد کند.

هلیکوباکتر پیلوری همیشه منجر به ایجاد زخم معده نمی شود، اما در زخم های گوارشی این پاتوژن به طور مداوم شناسایی می شود. عواملی که زخم زایی هلیکوباکتر پیلوری را تعیین می کنند به شدت در حال مطالعه هستند.

تشخیص آزمایشگاهیباید جامع و بر اساس چندین آزمایش باشد. روش های تشخیص می توانند تهاجمی (همراه با نیاز به بیوپسی از غشای مخاطی) و غیر تهاجمی (غیر مستقیم) باشند.

روش های اساسی برای تشخیص هلیکوباکتر پیلوری در بیوپسی مخاطی.

1. روش های میکروسکوپی (رنگ آمیزی با هماتوکسیلین-ائوزین، آکریدین نارنجی، گرم، آب فوشین، نقره ای، میکروسکوپ فاز-کنتراست با تعیین تحرک).

2. تعیین فعالیت اوره آز.

3. جداسازی و شناسایی عامل بیماری زا در محیط جامد (معمولاً خون). کشت بر روی آگار خون، آگار خون با آمفوتریسین، اریتریتول - آگار با آمفوتریسین انجام می شود. به مدت 7-5 روز در دمای 37 درجه سانتی گراد در شرایط میکروآئروفیل، هوازی و بی هوازی کشت شود. وابستگی با مورفولوژی میکروارگانیسم ها و کلنی های آنها، تحرک مارپیچ، رشد در شرایط میکروآئروفیل و عدم رشد در شرایط هوازی و بی هوازی و در دمای 25+ و 42+ درجه سانتی گراد، با حضور اکسیداز، کاتالاز و اوره آز تعیین می شود. فعالیت.

4. تشخیص آنتی ژن های پاتوژن در الایزا.

5. تشخیص PCR حساس ترین و اختصاصی ترین تست است.

روش‌های غیرتهاجمی شامل آزمایش تنفس و الایزا برای تشخیص آنتی‌بادی‌های IgG و IgA است.

رفتارپیچیده، با استفاده از روش های بهداشتی (تابش عامل ایجاد کننده). De-NOL (بیسموت ساب سیترات کلوئیدی)، آمپی سیلین، تریکوپولوم (مترونیدازول) و غیره استفاده می شود.

محتوای مقاله

شیگلا

باکتری های جنس شیگلا عوامل ایجاد کننده اسهال خونی باکتریایی یا شیگلوز هستند. اسهال خونی یک بیماری پلی اتیولوژیک است. این بیماری توسط انواع مختلفی از باکتری ها ایجاد می شود که به افتخار A. Shiga به نام Shigella نامیده می شود. آنها در حال حاضر در جنس Schigella طبقه بندی می شوند که به چهار گونه تقسیم می شوند. سه مورد از آنها - S. dysenteriae، S. flexneri و S. boydii - به سرووارها و S. flexneri نیز به زیر سرووارها تقسیم می شوند.

مورفولوژی و فیزیولوژی

شیگلا از نظر خواص مورفولوژیکی با اشریشیا و سالمونلا تفاوت کمی دارد. با این حال، آنها فاقد تاژک هستند و بنابراین باکتری غیر متحرک هستند. بسیاری از سویه های شیگلا دارای پیلی هستند. انواع مختلف شیگلا از نظر خواص مورفولوژیکی یکسان هستند. عوامل ایجاد کننده اسهال خونی شیمی‌ارگانوتروف‌ها هستند که برای محیط‌های مغذی نیازی ندارند. در محیط جامد، زمانی که از بدن بیمار جدا می‌شود، معمولاً کلنی‌های شکل S تشکیل می‌شوند. گونه های شیگلا Schigella sonnei دو نوع کلنی تشکیل می دهند - فرم S (فاز I) و فرم R (فاز II). هنگامی که زیر کشت، باکتری های فاز I هر دو نوع کلنی را تشکیل می دهند. شیگلا نسبت به سایر انتروباکتری ها از نظر آنزیمی کمتر فعال است: هنگام تخمیر گلوکز و سایر کربوهیدرات ها، آنها محصولات اسیدی را بدون تشکیل گاز تشکیل می دهند. شیگلا لاکتوز و ساکارز را تجزیه نمی کند، به استثنای S. sonnei که به آرامی (در روز دوم) این قندها را تجزیه می کند. تشخیص سه گونه اول بر اساس ویژگی های بیوشیمیایی غیرممکن است.

آنتی ژن ها

شیگلا مانند اشریشیا و سالمونلا ساختار آنتی ژنی پیچیده ای دارد. دیواره سلولی آنها حاوی O- و در برخی گونه ها (Shigella Flexner) نیز آنتی ژن K است. ساختار شیمیایی آنها مشابه آنتی ژن های اشریشیا است. تفاوت ها عمدتاً در ساختار پیوندهای انتهایی LPS نهفته است که ویژگی ایمونوشیمیایی را تعیین می کند و این امکان را به شما می دهد تا آنها را از سایر انتروباکتری ها و بین خود متمایز کنید. علاوه بر این، شیگلا دارای روابط آنتی ژنی متقابل با بسیاری از سروگروه های اشریشی انتروپاتوژن است که عمدتاً باعث بیماری های شبه اسهال خونی می شوند و با سایر انتروباکتری ها.

بیماری زایی و بیماری زایی

حدت شیگلا با خاصیت چسبندگی آنها تعیین می شود. آنها به دلیل میکروکپسول خود به انتروسیت های کولون می چسبند. سپس با کمک موسیناز، آنزیمی که موسین را از بین می برد، به انتروسیت ها نفوذ می کنند. پس از استعمار انتروسیت ها، شیگلا وارد لایه زیر مخاطی می شود و در آنجا توسط ماکروفاژها فاگوسیتوز می شود. در این حالت مرگ ماکروفاژها اتفاق می افتد و تعداد زیادی سیتوکین آزاد می شود که همراه با لکوسیت ها باعث ایجاد یک فرآیند التهابی در لایه زیر مخاطی می شود. در نتیجه، تماس های بین سلولی مختل می شود و تعداد زیادی شیگلا به داخل انتروسیت های فعال شده توسط آنها نفوذ می کند و در آنجا تکثیر می شود و بدون خروج از محیط خارجی به سلول های همسایه پخش می شود. این منجر به تخریب اپیتلیوم غشای مخاطی و ایجاد کولیت اولسراتیو می شود. شیگلا یک انتروتوکسین تولید می کند که مکانیسم اثر آن مشابه انتروتوکسین حساس به حرارت اشریشیا است. شیگلا شیگا یک سیتوتوکسین تولید می کند که به انتروسیت ها، نورون ها و سلول های میوکارد حمله می کند. این نشان دهنده وجود سه نوع فعالیت است - انتروتوکسیک، نوروتوکسیک و سیتوتوکسیک. در همان زمان، هنگامی که شیگلا از بین می رود، اندوتوکسین آزاد می شود - LPS دیواره سلولی، که وارد خون می شود و بر سیستم عصبی و عروقی تأثیر می گذارد. تمام اطلاعات مربوط به عوامل بیماری زایی شیگلا در یک پلاسمید غول پیکر و سنتز سم شیگا در یک ژن کروموزومی کدگذاری می شود. بنابراین، پاتوژنز اسهال خونی با ویژگی های چسبنده پاتوژن ها، نفوذ آنها به انتروسیت های روده بزرگ، تولید مثل داخل سلولی و تولید سموم تعیین می شود.

مصونیت

با اسهال خونی، ایمنی موضعی و عمومی ایجاد می شود. در ایمنی موضعی، IgA ترشحی (SIgA) که در هفته اول بیماری در سلول های لنفاوی مخاط روده تشکیل می شود، ضروری است. این آنتی بادی ها با پوشاندن مخاط روده از چسبیدن و نفوذ شیگلا به سلول های اپیتلیال جلوگیری می کنند. علاوه بر این، در طول عفونت، تیتر آنتی بادی های سرمی IgM، IgA، IgG افزایش می یابد که در هفته دوم بیماری به حداکثر می رسد. بیشترین مقدار IgM در هفته اول بیماری تشخیص داده می شود. وجود آنتی بادی های اختصاصی سرم نشانگر قدرت ایمنی موضعی نیست.

اکولوژی و اپیدمیولوژی

زیستگاه شیگلا کولون انسان است که در انتروسیت های آن تکثیر می شوند. منبع عفونت بیماران، افراد و ناقلان باکتری هستند. عفونت با خوردن غذا یا آب آلوده رخ می دهد. بنابراین راه اصلی انتقال عفونت تغذیه است. با این حال، موارد انتقال تماسی-خانگی شرح داده شده است. مقاومت انواع مختلف شیگلا در برابر عوامل محیطی یکسان نیست - S. dysenteriae حساس ترین و S. sonnei کمترین حساسیت را دارند، به ویژه در فرم R. آنها بیش از 6-10 ساعت در مدفوع باقی می مانند.

اسهال خونی (شیگلوز)

اسهال خونی یک بیماری عفونی حاد یا مزمن است که با اسهال، آسیب به غشای مخاطی روده بزرگ و مسمومیت بدن مشخص می شود. این یکی از شایع ترین بیماری های روده ای در جهان است. این بیماری توسط انواع مختلف باکتری از جنس Shigella ایجاد می شود: S.dysenteriae، S.flexneri، S.boydii، S.sonnei. در سال های پس از جنگ در کشورهای صنعتی، اسهال خونی بیشتر توسط S.flexneri و S.sonne ایجاد می شود. در مجموع 44 سرووار شیگلا وجود دارد که روش اصلی تشخیص میکروبیولوژیک اسهال خونی است. طرح جداسازی پاتوژن کلاسیک است: تلقیح مواد روی محیط غنی‌سازی و آگار پلوسکیرو، به دست آوردن یک کشت خالص، مطالعه خواص بیوشیمیایی آن و شناسایی با استفاده از سرم‌های آگلوتینه چند ظرفیتی و تک ظرفیتی.

گرفتن مطالب برای تحقیق

نتیجه مثبت یک تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی تا حد زیادی به جمع آوری به موقع و صحیح مواد آزمایش بستگی دارد. در همه موارد و باکتری ها، اغلب مدفوع می کنند، کمتر - استفراغ می کنند و آب معده و روده را شستشو می دهند. مدفوع (1-2 گرم) با یک میله شیشه ای از تشتک یا پوشک، شامل تکه های مخاط و چرک (اما نه خون) گرفته می شود. بهتر است در طول کولونوسکوپی برای معاینه، مخاط (چرک) از نواحی آسیب دیده غشای مخاطی گرفته شود. هنگام جمع آوری و پرورش مواد، رعایت دقیق قوانین خاصی مهم است، در صورت امکان، باید قبل از شروع درمان اتیوتروپیک شروع شود. قبل از جمع آوری مدفوع، ظروف (ظروف، گلدان ها، کوزه ها) با آب جوش جوشانده می شوند و تحت هیچ شرایطی با محلول های ضد عفونی کننده درمان نمی شوند. مواد مورد مطالعه باید به سرعت (در کنار بالین بیمار) در محیط غنی‌کننده و به موازات آن روی آگار انتخابی در ظرف پتری کاشته شود. مدفوع را می توان بدون انتظار برای اجابت مزاج با استفاده از سواب پنبه ای یا لوله های رکتوم زیمن جمع آوری کرد. اگر کشت در بیمارستان و تحویل سریع مدفوع غیرممکن باشد، آنها را در یک ماده نگهدارنده (30٪ گلیسرول + 70٪ بافر فسفات) در دمای 4-6 درجه سانتیگراد نگهداری می کنند تا بیشتر از یک روز پاتوژن های اسهال خونی نفوذ نکنند خون و ادرار، و بنابراین این اشیاء معمولا کاشته نمی شود تجزیه و تحلیل باکتریولوژیکی مواد مقطعی باید در اسرع وقت پس از مرگ انجام شود (روده بزرگ، غدد لنفاوی مزانتریک، قطعاتی از اندام های پارانشیمی). در هنگام شیوع اسهال خونی، محصولات غذایی به ویژه شیر، پنیر و خامه ترش نیز مورد بررسی قرار می گیرند.

تحقیقات باکتریولوژیک

تلقیح مدفوع به صورت موازی بر روی محیط انتخابی Ploskirev برای به دست آوردن کلنی های جدا شده و همیشه در آبگوشت سلنیت به منظور تجمع شیگلا انجام می شود، در صورتی که تعداد کمی از آنها در مواد مورد مطالعه وجود داشته باشد. قطعات موکوپورولنت با یک حلقه باکتریولوژیک انتخاب می شوند، در 2-3 لوله آزمایش با محلول کلرید سدیم ایزوتونیک کاملاً شسته می شوند، روی محیط Ploskirev اعمال می شوند و در یک منطقه کوچک با یک کاردک شیشه ای در آگار مالیده می شوند. سپس کاردک از محیط خارج می شود و مواد باقیمانده به صورت خشک به سطح تلقیح نشده باقی مانده مالیده می شود. هنگام کاشت در 2-3 فنجان، بخش جدیدی از بذر به هر یک از آنها اعمال می شود. تکه های مخاط و چرک بدون شستشو در آبگوشت سلنیت کاشته می شوند، در صورت عدم وجود قطعات مخاطی، مدفوع در 10-5 میلی لیتر محلول کلرید سدیم امولسیون می شود و 1-2 قطره از مایع رویی در محیط Ploskirev کاشته می شود. مدفوع غیر امولسیون شده در آبگوشت سلنیت به نسبت 1:5 کاشته می شود. هنگام تلقیح استفراغ و آبکشی از آبگوشت سلنیت با غلظت مضاعف استفاده می شود و نسبت تلقیح به محیط 1:1 است. محیط کشت تلقیح شده در بالین بیمار مستقیماً در ترموستات قرار می گیرد. همه محصولات در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 18-20 ساعت رشد می کنند. در روز دوم، با چشم غیر مسلح یا با استفاده از ذره بین 5x-10x، الگوی رشد را در محیط Ploskirev بررسی کنید، جایی که Shigella ستون های کوچک، شفاف و بی رنگ را تشکیل می دهد. Shigella Sonne می تواند دو نوع ستون تولید کند: برخی از آنها صاف با لبه های دندانه دار، برخی دیگر گرد، محدب و با براقی مرطوب هستند. 3-4 مستعمره به صورت میکروسکوپی بررسی می شوند، همه چیز از بین می رود و دوباره در مرکز اولکنیتسکی کاشته می شود تا یک فرهنگ خالص جدا شود. اگر روی آگار Ploskirev رشدی نداشت یا کلنی شیگلا مشخصی وجود نداشت، از براث سلنیت روی Ploskirev یا Endo agar بکارید. در صورت وجود تعداد کافی کلنی معمولی، واکنش آگلوتیناسیون تقریبی روی شیشه با مخلوطی از سرم های فلکسنر و سون در روز سوم، الگوی رشد در محیط اولکنیتسکی در نظر گرفته می شود. شیگل ها تغییرات مشخصی را در آگار سه ذرت ایجاد می کنند (ستون زرد می شود، رنگ ذره کج تغییر نمی کند، سیاه شدن وجود ندارد). برای تعیین خواص بیوشیمیایی، کشت مشکوکی در محیط کشت هیس کاشته می‌شود، یا از آنتروتست‌ها استفاده می‌شود که با استفاده از واکنش آگلوتیناسیون شیشه‌ای، ابتدا مخلوطی از سرم‌ها علیه گونه‌های Flexner و Sonne که اغلب یافت می‌شوند، استفاده می‌شود. سپس با تک گونه ها و سرم های تک گیرنده. اخیراً سرم های تجاری چند ظرفیتی و تک ظرفیتی علیه انواع پاتوژن های اسهال خونی تولید شده است. برای تعیین نوع شیگلا از واکنش انعقادی نیز استفاده می شود. نوع پاتوژن با واکنش مثبت با پروتئین A استافیلوکوکوس اورئوس تعیین می شود که روی آن آنتی بادی های خاص علیه شیگلا جذب می شود. یک قطره پروتئین حساس به آنتی بادی A روی یک کلنی معمولی ریخته می شود، ظرف تکان داده می شود و بعد از 15 دقیقه ظاهر آگلوتینات زیر میکروسکوپ مشاهده می شود. در صورت وجود تعداد کافی کلنی لاکتوز منفی در محیط کشت، واکنش انعقادی را می توان در روز دوم مطالعه انجام داد تا سریع و مطمئن شیگلا شناسایی شود، واکنش های مستقیم و غیرمستقیم ایمونوفلورسانس و آنتی بادی های آنزیمی نیز انجام می شود. . دومی در اسهال خونی بسیار اختصاصی است و به طور فزاینده ای در تشخیص آزمایشگاهی بیماری برای تشخیص آنتی ژن ها در خون بیماران، از جمله به عنوان بخشی از کمپلکس های ایمنی در گردش، واکنش تجمع هماگلوتیناسیون و روش الایزا (سیستم تست تشخیصی Shigelaplast) می تواند استفاده شود. مورد استفاده قرار گیرد. آنتی ژن های شیگلا در مدفوع و ادرار با استفاده از RNGA، RSK و کواگلوتیناسیون شناسایی می شوند. این روش‌ها برای تشخیص زودهنگام بسیار موثر، خاص و مناسب هستند کیسه مهم است که قرنیه آسیب نبیند. عفونت های جدید شیگلا 2-5 روز پس از معرفی کشت باعث کراتیت شدید می شوند. سالمونلا همچنین می تواند باعث ورم ملتحمه شود، اما قرنیه را تحت تأثیر قرار نمی دهد. با این حال، باید به خاطر داشت که اشریشیا کلی (EIEC) به ویژه سرووارهای 028، 029، 0124، 0143 و غیره نیز باعث ایجاد کراتوکونژکتیویت تجربی در خوکچه هندی می‌شوند بر اساس صلاحیت های باکتری شناسان و تکنسین های آزمایشگاهی) تنها 50-70٪ نتایج مثبت می دهد. علاوه بر تشخیص بیماری ها، آزمایش های باکتریولوژیک نیز برای شناسایی ناقلان باکتری، به ویژه در میان کارکنان شرکت های مواد غذایی، موسسات مراقبت از کودکان و موسسات پزشکی انجام می شود. به منظور تعیین منابع عفونت، شیگلا فاگوار و کولیسینوار تعیین می شود.

تشخیص سرولوژیکی

تشخیص سرولوژیک اسهال خونی به ندرت انجام می شود. روند عفونی با تحریک آنتی ژنی قابل توجهی همراه نیست، بنابراین تیتر آنتی بادی در سرم بیماران و دوران نقاهت پایین است. آنها در روزهای 5-8 بیماری شناسایی می شوند. آنتی بادی های بیشتری در هفته 2-3 تشکیل می شود واکنش آگلوتیناسیون حجمی با تشخیص میکروبی مانند واکنش Widal برای تب حصبه و تب پاراتیفوئید انجام می شود. سرم خون از 1:50 تا 1:800 رقیق می شود. تیتر تشخیصی آنتی بادی های S.flexneri در بیماران بالغ 1:200، در S.dysenteriae و S.sonnei - 1:100 در نظر گرفته شده است (به ترتیب در کودکان - 1:100 و 1:50). هنگام مرحله بندی RNGA، به ویژه هنگام استفاده از روش سرم جفتی، به دست می آیند. افزایش 4 بار یا بیشتر در تیتر اهمیت تشخیصی دارد. تشخیص گلبول های قرمز عمدتاً از آنتی ژن های S.flexneri و S.sonnei انجام می شود. یک آزمایش داخل جلدی آلرژیک با دیسانترین Tsuverkalov (محلولی از فراکسیون های پروتئینی Shigella Flexner و Sonne) نیز برای تشخیص ارزش کمکی دارد. در بیماران مبتلا به اسهال خونی از روز چهارم مثبت می شود. واکنش پس از 24 ساعت ثبت می شود. هنگامی که پرخونی و تورم پوست با قطر 35 میلی متر یا بیشتر ظاهر می شود، واکنش به شدت مثبت، در 20-34 میلی متر - متوسط ​​و در 10-15 میلی متر - مشکوک ارزیابی می شود.

پیشگیری و درمان خاص

دریافت واکسن های مختلف (حرارت، فرمالین، شیمیایی) مشکل پیشگیری خاص از اسهال خونی را حل نکرد، زیرا همه آنها اثربخشی پایینی داشتند. برای درمان از فلوروکینولون ها و کمتر آنتی بیوتیک ها استفاده می شود. فهرست مطالب موضوع "شیگلا. اسهال خونی. سالمونلا. سالمونلوز.":

با توجه به خصوصیات مورفولوژیکی شیگلاغیر قابل تشخیص از سایر اعضای خانواده انتروباکتریاسه. باکتری های اسهال خونیآنها کپسول ندارند روی محیط جامد مستعمرات صاف (S-) و خشن (R-) تشکیل می دهند. مستعمرات S گرد، گنبدی شکل، صاف، در نور عبوری نیمه شفاف هستند.

اسهال خونی کلونی Rشکل نامنظم، مسطح، کسل کننده، با سطح ناهموار و لبه های ناهموار. در محیط مایع شکل S اسهال خونیکدورت یکنواخت ایجاد می کند، R-شکل رسوب پایین را تشکیل می دهد، محیط شفاف باقی می ماند.

جدول 18-1. ویژگی‌های بیوشیمیایی اولیه باکتری‌های خانواده Enterobactenaceae با اهمیت پزشکی

خواص بیوشیمیایی اسهال خونی

در مقایسه با سایر باکتری های روده، از نظر بیوشیمیایی شیگلابی اثر (به جدول 18-1 مراجعه کنید). همه شیگلا H 2 S تولید نمی کنند و لاکتوز را روی آگار کلیگلر تخمیر نمی کنند. تولید ایندول متغیر است (توسط بیش از نیمی از سویه های S. dysenteriae، S. flexneri و S. boydii تولید می شود). در برخی موارد، تعیین ویژگی‌های باکتری با استفاده از یک سری حداقل تمایز نیز می‌تواند ایده‌ای تقریبی از گونه را به دست دهد.

کمترین فعالیت آنزیمی را دارد S. dysenteriae ( گرز گریگوریف-شیگا-کروس). باکتری ها فقط گلوکز را بدون تولید گاز تخمیر می کنند. از آنجایی که آنها مانیتول را تجزیه نمی کنند، در حالی که گونه های دیگر آن را تخمیر می کنند، به نام شیگلای مانیتول منفی نیز شناخته می شوند.

S. flexneri ( چوب فلکسنر) لاکتوز، دولسیت و زایلوز را تخمیر نمی کند. تقریباً همه میله ها ایندول را تشکیل می دهند. باکتری های گروه سرولوژیکی 6 (همچنین به نام شیگلا منچستر و نیوکاسل نیز شناخته می شوند) هنگام تخمیر گلوکز و سایر کربوهیدرات های قابل تخمیر، مقدار کمی گاز تولید می کنند.

بسیار شبیه فعالیت بیوشیمیایی S. boydii نیز آنها را دارد، اما آنها زایلوز، دولسیت و آرابینوز را نیز تخمیر می کنند (معمولاً در 24 ساعت اول). برخی از شیگلا بوندا همچنین قادر به تخمیر مالتوز (در روزهای 6-20) هستند که در شناسایی فرهنگ ها اهمیت عملی دارد.

S. sonnei تخمیر نمی شودسوربیتول و دولسیت ایندول را تشکیل نمی دهند، اما زایلوز و آرابینوز را تجزیه می کنند که آنها را شبیه شیگلا بوندا می کند. یک ویژگی متمایز توانایی رشد در دمای 45 درجه سانتیگراد، تخمیر رامنوز و همچنین لاکتوز و ساکارز در تاریخ بعدی است.