Shigella art. Shigella och dysenteri (shigellos). Vad ska vi göra med det mottagna materialet?

Det första orsakande medlet för dysenteri upptäcktes av A.V. Grigoriev (1891), och 1898 studerade och beskrev den japanska vetenskapsmannen Shiga. Under efterföljande år isolerades och beskrevs andra representanter för detta släkte: Flexner (1900), Sonne (1915), Stutzer-Schmitz (1917), Large-Sachs (1934).

Enligt den internationella klassificeringen kombineras alla bakterier som orsakar dysenteri till ett släkte för att hedra Shiga - Shigella.

Morfologi. Shigella är små (2-3 × 0,4-0,6 µm) stavar med rundade ändar. De skiljer sig från andra medlemmar av familjen Enterobacteriaceae i frånvaro av flageller. De har inga sporer eller kapslar. Gram negativ.

Odling. Shigella är fakultativa anaerober. Opretentiös till näringsmedia. De reproducerar på MPA och MPB vid en temperatur på 37°C och pH 7,2-7,4. Elektiva och differentialdiagnostiska medier för dem är Ploskirev-, Endo- och EMS-media. De växer i form av små, genomskinliga, gråaktiga, runda kolonier, 15-2 mm i storlek i en S-form. Undantaget är Shigella Sonne, som ofta dissocierar och bildar stora, platta, grumliga, R-formade kolonier med taggiga kanter (Fig. 44). I flytande näringsmedia ger Shigella en jämn grumlighet, R-former bildar ett sediment.

Enzymatiska egenskaper. De enzymatiska egenskaperna hos Shigella är mindre uttalade än hos andra representanter för Enterobacteriaceae: de bryter ner kolhydrater utan gasbildning och bryter inte ner laktos och sackaros. Undantaget är Shigella Sonne, som bryter ner dessa kolhydrater på 2-3:e dagen.

De proteolytiska egenskaperna hos Shigella är inte särskilt uttalade - bildningen av indol och svavelväte är inkonsekvent, de kurar mjölk och gör inte gelatin flytande.

I förhållande till mannitol är alla Shigella indelade i mannitol-splittrande och icke-klyvande (tabell 37).

Notera. k - splittring med bildning av syra.

För närvarande är Shigella Sonne uppdelad i fyra enzymatiska typer. De skiljer sig i sin förmåga att bryta ner ramnos och xylos (tabell 38).

Notera. + splittring; (+) splittring efter 3-5 dagar; - ändras inte.

Toxinbildning. Shigella har endotoxin. Ett undantag är Shigella Shiga, som förutom endotoxin producerar ett exotoxin som har en neurotoxisk effekt.

Antigen struktur och klassificering. Shigella innehåller somatiska antigener, som inkluderar grupp- och typantigener. Enligt den internationella klassificeringen är Shigella indelad i fyra grupper, betecknade med versaler A, B, C, D.

Grupp A S. dysenteriae: 1 - Grigorieva - Shigi; 2 - Stutzer - Schmitz; 3-7 - Stor - Saksa och 8-10 - provisorisk. Representanter för denna grupp har bara typiska antigener, betecknade med arabiska siffror.

Grupp B S. flexneri. Mikrober i denna grupp har en mer komplex antigenstruktur - de innehåller typiska antigener, betecknade med romerska siffror, och gruppantigener, betecknade med arabiska siffror. Shigella Flexner har 6 serovar. Shigella Flexner 6 betecknades tidigare som underart S. newcastle.

Grupp C S. boydii. Har bara typiska antigener. Det finns 15 serologiska typer i denna grupp.

Grupp D S. sonnei har sitt eget specifika antigen (tabell 39).

Under mikrobiologisk undersökning indikerar svaren den isolerade kulturens serovariant och subserovariant. Till exempel isolerades kulturen av Shigella Flexner la.

Motståndskraft mot miljöfaktorer. En temperatur på 100°C dödar Shigella omedelbart. En temperatur på 60°C dödar dem på 20-30 minuter. Shigella är resistent mot låga temperaturer - i flodvatten kvarstår de i upp till 3 månader, på grönsaker och frukter - i upp till 10-15 månader. Solljus dödar dem på 2-3 timmar, och Shigella Shiga dödar dem på 20 minuter. Vanligt använda koncentrationer av desinfektionsmedel förstör dem på 20-30 minuter. Shigella grupp A är minst motståndskraftig mot yttre faktorer, och Shigella Sonne är mest motståndskraftig.

Djurkänslighet. Djur är inte känsliga för dysenteripatogener, med undantag för apor. Experimentell infektion av kaniner och vita möss gör att de blir berusade och dör.

Smittkällor. En person som lider av akuta och kroniska former av dysenteri och en bakteriebärare.

Överföringsvägar. Mat. Av stor betydelse är vattenvägen, grönsaker, frukter, olika föremål angripna av Shigella och flugor.

Patogenes. Väl i tarmen med mat tränger Shigella in i epitelcellerna i tjocktarmens slemhinna, där de förökar sig. De dör delvis. Endotoxin som bildas under förstörelsen av bakterier sensibiliserar slemhinnan, blodkärlens permeabilitet ökar och endotoxin absorberas i blodet, vilket orsakar förgiftning. Skador på slemhinnan åtföljs av svullnad, nekros och blödning. Dessutom påverkar toxinet det centrala nervsystemet, vilket leder till trofiska störningar. Sjukdomen orsakad av Shigella Shiga, som tränger djupt in i slemhinnan i tjocktarmen, är särskilt allvarlig och orsakar svår hyperemi, svullnad och blodig diarré. Exotoxinet de producerar orsakar allvarlig förgiftning.

Storleken på den smittsamma dosen är viktig för uppkomsten av sjukdomen.

Immunitet. Människor har naturligt motstånd mot dysenteriinfektion. Efter en sjukdom är immuniteten instabil, och efter Sonne-dysenteri är den praktiskt taget frånvarande. Vid en sjukdom orsakad av Shigella dysenteri 1 (Grigorieva - Shigi) utvecklas en mer stabil antitoxisk immunitet.

Förebyggande. Allmänna sanitära och anti-epidemiåtgärder: isolering, tidig diagnos, desinfektion.

Specifik förebyggande har inte funnit någon utbredd användning. Personer som varit i kontakt med patienter ges en polyvalent dysenteribakteriofag.

Behandling. Komplexa, sulfonamider med antibiotika. Det finns ingen specifik behandling.

Kontrollfrågor

1. Nämn representanterna för släktet Shigella - de orsakande medlen för dysenteri.

2. Relationen till vilken kolhydrat ligger till grund för att dela upp Shigella i två grupper? Vilka arter av Shigella ingår i var och en av dessa grupper?

3. Vilka penetrationsvägar har Shigella och vilken del av tarmen påverkar det?

4. Vilken typ av Shigella växer ofta i R-form?

5. Vilka Shigella-arter har typ- och gruppantigener?

Mikrobiologisk undersökning

Syfte med studien: upptäckt och identifiering av Shigella för diagnos; identifiering av bakteriebärare; upptäckt av Shigella i livsmedel.

Material för forskning

1. Tarmrörelser.

2. Sektionsmaterial.

3. Livsmedelsprodukter.

Grundläggande forskningsmetoder

1. Mikrobiologisk.

2. Serologiska.

Studiens framsteg

Andra dagen av studien

De fröade kopparna tas bort från termostaten och undersöks med blotta ögat eller genom ett förstoringsglas. Misstänkta kolonier (färglösa) i mängden 4-6 sållas bort på Russells medium och mannitol. Inokulering utförs med drag på en fasad yta och en injektion i en agarkolonn. Det inokulerade Russells medium placeras i en termostat i 18-24 timmar (samtidigt görs återsådd från selenitmediet till differentialmedium).

Tredje dagen av studien

Ta bort grödor som gjorts på Russells medium från termostaten. Kulturer som inte bryter ner laktos utsätts för ytterligare studier: utstryk görs, gramfärgas och mikroskopiskt undersöks. I närvaro av gramnegativa stavar, inokuleras på Hiss-media, buljong med indikatorpapper (för att detektera indol och vätesulfid) och lackmusmjölk. Det inokulerade mediet placeras i en termostat i 18-24 timmar.

Fjärde dagen av forskning

Ta bort skörden från termostaten och ta hänsyn till resultatet. Kulturer som är misstänkta för sina enzymatiska och kulturella egenskaper i förhållande till Shigella (se tabell 37) utsätts för serologisk identifiering. I avsaknad av sådana kulturer ges ett negativt svar.

Serologisk identifiering

Arten, serovaren och subserovaren för den isolerade kulturen bestäms med användning av adsorberade sera. Analys av den antigena strukturen börjar med en agglutinationsreaktion på glas med blandning nr 1. Denna blandning inkluderar sera med antikroppar mot Shigella Sonne, Newcastle och polyvalent serum mot Shigella Flexner. Om agglutinationsreaktionen med blandningen är positiv, agglutineras den isolerade kulturen separat med varje serum som ingår i blandningen.

En positiv agglutinationsreaktion med adsorberat serum till Shigella Sonne och Newcastle ger rätt att ge svar. För att fastställa Shigella Flexners serovar och subserovar är det nödvändigt att dessutom utföra agglutinationsreaktioner med standardsera (I, II, III, IV, V) och grupp (1-3, 4-6-7, 8). Till exempel gav den isolerade kulturen en positiv reaktion med typ serum II och gruppserum 3, 4. Som framgår av tabellen isolerades kulturen av Shigella Flexner, serovar 2, subserovar 1a. Svar: Shigella Flexner 2a isolerades.

Om det inte finns någon agglutination med blandning nr 1 utförs en agglutinationsreaktion med andra flervärda sera.

När man utför en agglutinationsreaktion bör man ta hänsyn till förhållandet mellan kulturen som studeras och mannitol och, beroende på detta, använda ett eller annat serum. Således testas kulturer som inte bryter ner mannitol med flervärda sera mot Shigella-dysenteri Grigoriev-Shiga och Stutzer-Schmitz (1, 2), Large-Sachs (3-7), provisoriska typer (8-10).

Kulturer som bryter ner mannitol testas med blandning nr 1 och polyvalenta serum mot Boyds Shigella.

Om det finns agglutination av den isolerade kulturen av ett av dessa sera, utförs ett odlingstest med vart och ett av serumen som ingår i det flervärda. Ett positivt resultat med ett av serumen bestämmer serovarianten för den isolerade kulturen.

Vid användning av Shigella Boyds serum börjar agglutinationen med det serum av serovaren som är vanligast i området. I vårt land är Shigella Boyds serovarianter 4, 5, 7, 9 och 12 oftast isolerade (se fig. 44).

Fluorescerande mikroskopi och biologiska tester på marsvin används som accelererade metoder för mikrobiologisk forskning inom dysenteri. När virulenta stammar av Shigella introduceras i konjunktivalsäcken (under det nedre ögonlocket) utvecklar djuren konjunktivit i slutet av den första dagen.

Kontrollfrågor

1. Vilket material används för bakteriologisk undersökning vid diagnos av dysenteri och hur samlas det in?

2. Fördelningen av vilken kolhydrat ger rätt att ge ett nekande svar?

3. Vilka sera kan användas för att bestämma art, underart, serovar och subserovar av Shigella Flexner?

4. Vilka serum ingår i blandning nr 1?

Studera dysenteristudiediagrammet för dagen.

Kulturmedia

Ploskirev, Endo, EMS media(se kapitel 19).

Släktet Escherichia.

Escherichia är den vanligaste aeroba tarmbakterien som under vissa förhållanden kan orsaka en bred grupp av mänskliga sjukdomar, både tarm (diarré) och extraintestinal (bakteremi, urinvägsinfektioner etc.) lokalisering. Den huvudsakliga arten är E. coli (Escherichia coli) - den vanligaste orsaken till infektionssjukdomar orsakade av enterobakterier. Denna patogen är en indikator på fekal kontaminering, särskilt i vatten. If - titer och if - index användes ofta som sanitära indikatorer. Escherichia är en del av mikrofloran i tjocktarmen hos däggdjur, fåglar, reptiler och fiskar.

Kulturfastigheter. På flytande media producerar E. coli diffus grumlighet på fasta medier, den bildar kolonier i S- och R-form. På Endo, det huvudsakliga mediet för Escherichia, bildar laktosjäsande E. coli intensivt röda kolonier med en metallisk glans, som bildar ljusrosa eller färglösa kolonier med ett mörkare centrum på Ploskirevs medium, de är röda med en gulaktig nyans; på Levin's medium är de mörkblå med en metallisk glans.

Biokemiska egenskaper. I de flesta fall jäser E. coli kolhydrater (glukos, laktos, mannitol, arabinos, galaktos, etc.) med bildning av syra och gas, producerar indol, men bildar inte vätesulfid och gör inte gelatin flytande.

Antigen struktur. Inga signifikanta morfologiska skillnader hittades mellan patogena och icke-patogena Escherichia coli. Deras differentiering är baserad på studiet av antigena egenskaper. Bland ytantigener särskiljs polysackarid O-antigener, flagellära H-antigener och kapselpolysackarid K-antigener. Mer än 170 varianter av O-antigener är kända (detta motsvarar patogenen som tillhör en viss serogrupp) och 57 - H-antigener (tillhör serovar). Del diarréframkallande(diarréorsakande) Escherichia coli inkluderar 43 O-grupper och 57 OH-varianter.

De viktigaste patogenicitetsfaktorerna för diarrégen E.coli.

1. Faktorer för vidhäftning, kolonisering och invasion associerade med pili, fimbriestrukturer och yttre membranproteiner. De kodas av plasmidgener och främjar kolonisering av den nedre tunntarmen.

2. Exotoxiner: cytotoniner (stimulerar hypersekretion av vätska från tarmceller, stör vatten-saltmetabolismen och främjar utvecklingen av diarré) och enterocytotoxiner (verkar på cellerna i tarmväggen och kapillärendotelet).

3. Endotoxin (lipopolysackarid).

Beroende på närvaron av olika patogenicitetsfaktorer delas diarrégena E. coli in i fem huvudtyper: enterotoxigen, enteroinvasiv, enteropatogen, enterohemorragisk, enteroadhesiv.

4. Patogena E. coli kännetecknas av produktionen av bakteriociner (coliciner).

Enterotoxigen E.coli har ett högmolekylärt värmelabilt toxin, som liknar kolera, vilket orsakar koleraliknande diarré (gastroenterit hos små barn, resenärers diarré, etc.).

Enteroinvasiv Escherichia coli kan penetrera och föröka sig i tarmepitelceller. De orsakar riklig diarré blandad med blod och ett stort antal leukocyter (en indikator på en invasiv process) i avföringen. Kliniskt liknar dysenteri. Stammarna har vissa likheter med Shigella (stationär, fermenterar inte laktos och har höga enteroinvasiva egenskaper).

Enteropatogen E.coli- de främsta orsakerna till diarré hos barn. Lesionerna är baserade på vidhäftning av bakterier till tarmepitelet med skada på mikrovilli. Kännetecknas av vattnig diarré och kraftig uttorkning.

Enterohemorragisk Escherichia coli orsaka diarré blandad med blod (hemorragisk kolit), hemolytiskt-uremiskt syndrom (hemolytisk anemi i kombination med njursvikt). Den vanligaste serotypen av enterohemorragisk Escherichia coli är O157:H7.

Enteroadhesiv E. coli bildar inte cellgifter, dåligt studerade.

Epidemiologi. Huvudmekanismen för spridning av diarrégen E. coli är fekal-oral. Smitta kan ske genom mat, vatten och när man tar hand om djur. Eftersom Escherichia lever i tarmarna hos många djurarter är det svårt att fastställa den specifika infektionskällan. Smittvägen kan vara i slutna anläggningar. Enteropatogen och enteroinvasiv E. coli är de vanligaste orsakerna till nosokomiala utbrott av escherichiosis.

Laboratoriediagnostik. Det huvudsakliga tillvägagångssättet är isoleringen av en ren kultur på differentialdiagnostiska medier och dess identifiering genom antigena egenskaper. RA placeras med en uppsättning polyvalenta OK-sera (till O- och K-antigener), sedan adsorberade O-sera och kulturer upphettade till 100 grader Celsius (för att förstöra K-antigener).

Biokemisk differentiering är av ytterligare betydelse. Identifiering av diarrégena typer är möjlig genom att identifiera specifika markörer (enterohemorragisk E. coli fermenterar inte sorbitol och serovar O157:H7 uppvisar inte beta-glukuronidasaktivitet).

Släktet Shigella.

Shigella är en tarmpatogen hos människor och primater som orsakar bacillär dysenteri eller shigellos. I enlighet med O-antigenets antigena struktur och biokemiska egenskaper är de kända serotyperna av Shigella indelade i fyra arter eller serogrupper - S.dysenteriae (serogrupp A), S.flexneri (serogrupp B), S.boydii (serogrupp C) ) och S. sonnei (serogrupp D).

Förbi morfologiska egenskaper Shigella skiljer sig inte från andra enterobakterier. Dessa är ospecifika fakultativa anaeroba gramnegativa stavar.

Biokemiska egenskaper. Shigella är biokemiskt inaktivt jämfört med andra tarmbakterier. De bildar inte vätesulfid på tre-socker järnagar och jäser inte urea.

Stammarna av S.dysenteriae (serogrupp A) har den minsta enzymatiska aktiviteten, och fermenterar endast glukos utan gasbildning, till skillnad från andra Shigella, är denna art mannitol-negativ.

Shigella Flexner jäser mannitol och producerar indol, men jäser inte laktos, dulcit och xylos. Newcastleserotypen är indelad i tre biokemiska typer. För Shigella Flexner är den vattenburna överföringsvägen mer typisk.

Boyd's Shigella (serogrupp C) har liknande biokemisk aktivitet, men fermenterar dulcit, xylos och arabinos. De har ett antal serotyper, som var och en har sin egen huvudtyp antigen.

Shigella Sonne (serogrupp D) kan långsamt fermentera laktos och sackaros och har biokemiska typer och fagotyper. Den huvudsakliga smittvägen är mat (vanligtvis genom mjölk och mejeriprodukter).

Antigen struktur. Shigella har O- och K-antigener. O-antigener har epitoper med varierande specificitet - från de som är vanliga för familjen enterobakterier till typspecifika. Klassificeringen tar endast hänsyn till termostabil grupp (fyra grupper eller typer - A, B, C och D) och typspecifik (indelning i serotyper). Värmelabila antigener inkluderar K-antigener (de finns i grupperna A och C) och fimbriaantigener (i Shigella Flexner liknar de antigeniskt E.coli). Bestämning av den antigena strukturen är nödvändig för slutlig identifiering.

Epidemiologi. Shigella är ganska stabil i den yttre miljön. Smittkällan är en person med olika former av kliniska manifestationer av shigellos. Infektionsmekanismen är fekal-oral. Olika typer av Shigella kännetecknas av de dominerande smittvägarna (kontakthushåll - för S.dysenteriae, mat - för S.sonnei, vatten - för S.flexneri). Epidemiprocessen kännetecknas av en förändring i strukturen hos cirkulerande populationer av patogener - en förändring av ledande arter, biovar, serovar, som är associerad både med förändringar i populationens immunitet och med förändringar i patogenens egenskaper, särskilt med förvärvet av olika plasmider (R, F, Col, etc.). Den smittsamma dosen är cirka 200 - 300 Shigella. Dysenteri orsakad av Shigella Sonne har ett mildare förlopp.

Patogenicitetsfaktorer och patogenes av lesioner. Den huvudsakliga biologiska egenskapen hos Shigella är förmågan att invadera epitelceller, föröka sig i dem och orsaka deras död. Bildandet av en lesion i slemhinnan i den nedåtgående tjocktarmen (sigmoid och rektum) är cyklisk: vidhäftning, kolonisering, införande av Shigella i cytoplasman av enterocyter, reproduktion, förstörelse och avstötning av epitelceller, frisättning av Shigella i tarmens lumen, vidhäftning igen osv.

Roll vidhäftnings- och kolonisationsfaktorer utförs av pili, yttre membranproteiner, LPS, enzymer - neuraminidas, mucinas, hyaluronidas (förstör slem).

Shigella har ett utbud av faktorer för invasion och motstånd till verkan av försvarsmekanismer (K-antigen, LPS, etc.) kontrollerade av Shigella kromosomala gener och plasmider.

Shigella har olika toxiner. De har endotoxin och Shiga-liknande cytotoxiner (SLT-1, SLT-2). Cytotoxiner orsakar celldestruktion, enterotoxin orsakar diarré och endotoxin orsakar allmän berusning. Shiga Toxin orsakar störningar av proteinsyntesen, absorption av natrium- och vattenjoner och vätskeinflöde till inflammationsplatsen.

De mest typiska tecknen på dysenteri är diarré, tenesmus(smärtsamma spasmer i ändtarmen) och frekventa drifter, allmän berusning. Avföringens natur bestäms av graden av skada på tjocktarmen.

Post-infektionsimmunitet- hållbar, typspecifik.

Laboratoriediagnostik. Den huvudsakliga diagnostiska metoden är bakteriologisk. Avföringen inokuleras på de differentialdiagnostiska medierna Endo och Ploskirev för att erhålla isolerade kolonier. Rena kulturer studeras genom deras biokemiska egenskaper, identifiering utförs i RA med poly- och monovalenta sera. Om den isolerade kulturen har de biokemiska egenskaperna hos Shigella, men inte agglutinerar sera till O-antigener, måste den kokas i 30 minuter för att förstöra värmelabila K-antigener, som ofta förhindrar agglutination av Shigella serogrupper A och C (dvs. har K-antigener), och återigen forskning i RA.

För serologisk diagnostik används RPGA med grupp erytrocytdiagnostik.

Föreläsning nr 8. Representanter för släktena Vibrio, Campylobacter, Helicobacter.

Släktet Vibrio.

Familjen Vibrionaceae inkluderar rörliga, krökta, stavformade bakterier med polära flageller. Evolutionärt härstammar från vattenlevande bakterier, de är brett spridda i sötvatten och havsvatten, i ryggradslösa och ryggradslösa värdar. Arter som är patogena för människor klassificeras som släkten Vibrio, Aeromonas Och Plesiomonas.

Släktet Vibrio kännetecknas av korta, raka eller krökta gramnegativa stavar, rörliga, bildar inte sporer eller kapslar och växer bra på vanliga medier. De fermenterar kolhydrater med bildande av syra utan gas och är känsliga för vibriostatiskt medel O/129. Kan odlas vid temperaturer från plus 18 till 37 o C, pH 8,6-9,0.

Representanter för släktet Vibrio skiljer sig från andra släkten i familjen genom biokemiska tester. Släktet innehåller mer än 25 arter, varav den huvudsakliga betydelsen är Vibrio cholerae- det orsakande medlet för kolera, såväl som V.parahaemolyticum, V.vulnificus.

Vibrio cholerae.

Morfologi. Vibrio cholerae har ett polärt flagellum, som ofta liknar ett kommatecken ( Koch kommatecken). Ett viktigt diagnostiskt tecken är rörlighet (bestäms genom mikroskopi med metoden hängande eller krossad droppe). Morfologiskt variabel. De färgas bra med Pffeffers vattenfuchsin och Ziehls karbolfuchsin.

Kulturfastigheter. Fakultativ anaerob. Vibrio cholerae är opretentiös för näringsmedia. Det förökar sig bra i 1% alkaliskt (pH 8,6-9,0) peptonvatten, överträffar bakterier i tarmgruppen (berikningsmedium), och bildar en delikat blåaktig film och grumlighet. För att undertrycka tillväxten av Proteus och vissa andra mikroorganismer används peptonvatten med tillsats av kaliumtellurit.

På fasta medier bildar Vibrio cholerae släta, glasiga, genomskinliga skivformade kolonier med en blåaktig nyans och en trögflytande konsistens. Använd alkalisk agar, gallsaltagar, alkalisk blodagar, det bästa är TCBS-agar (agar med tiosulfat, citrat, gallsalter och sackaros).

Biokemiska egenskaper. Vibrio cholerae fermenterar många kolhydrater (glukos, sackaros, mannos, mannitol, laktos, levulos, glykogen, stärkelse) med bildandet av syra utan gas. I förhållande till tre sockerarter ( Heibergs triad) - sackaros, mannos och arabinos, vibrios delas in i åtta biokemiska grupper, Vibrio cholerae tillhör den första gruppen (bryter ner sackaros och mannos).

Vibrio cholerae bryter ner gelatin, kasein, koagulerar mjölk och bryter ner proteinpreparat till indol och ammoniak.

Arten V.cholerae delas in i biotyper, serogrupper Och serovar.. De huvudsakliga biotyperna är klassiska (V.cholerae asiaticae) och El Tor (V.cholerae eltor). Serogrupper särskiljs av strukturen hos O-antigener i huvudgruppen O1 av Vibrio cholerae, serovarerna Ogawa, Inaba och Hikojima särskiljs.

Antigen struktur. I Vibrio cholerae isoleras termostabila O-antigener och termolabila H-antigener. Baserat på strukturen av O-antigener har 139 serogrupper identifierats, El Tor och klassiska biotyper kombineras till 01-grupp (typad av 01-antiserum). El Tor-isolat kännetecknas av hemolytiska egenskaper (orsakar hemolys av fårerytrocyter), förmågan att agglutinera kycklingerytrocyter, resistens mot polymyxin och känslighet för fager.

O-antigen i grupp 01 är heterogent och inkluderar en gemensam A-komponent och två typspecifika - B och C. Enligt deras närvaro har serovar Ogawa kombinationen AB, Inaba - AC, Hikojima - ABC.

Vibrio cholerae kan passera från S- till R-formen utan att agglutineras av O-serumet. På grund av den antigena strukturen används O-serum, OR-serum (för att identifiera OR- och R-dissociat), typspecifika sera Inaba (C) och Ogawa (B) för att identifiera V.cholerae. På 90-talet identifierades en ny serovar V.cholerae 0139, som inte agglutineras av ovanstående serum, och i andra egenskaper skiljer sig lite från Vibrio cholerae grupp 01.

Vibrios som inte är typade av huvud 01-serumet (dvs inte tillhör grupp 01) kallas icke-agglutinerande (NAG) vibrios - koleraliknande eller paracholera. De har H-antigenet gemensamt med Vibrio cholerae, men skiljer sig i O-antigenet.

Baserat på H-antigenet särskiljs grupperna A och B koleravibrios i grupp A. Grupp B-virioner (biokemiskt olika kolera) har en heterogen struktur av O-antigenet och är indelade i sex serologiska undergrupper.

Patogenicitetsfaktorer för Vibrio cholerae.

1. Rörlighet(flagella) och kemotaxi.

2. Enzymer främja vidhäftning och kolonisering, interaktion med epitelceller - mucinas (tunna slemmet), neutaminidas (interaktion med mikrovilli, skapande av en landningsplats), lecitinas och andra.

3. Endotoxin- Termostabil lipopolysackarid, liknande till struktur och egenskaper andra endotoxiner från gramnegativa bakterier.

4. Exotoxin - kolerogener- den huvudsakliga patogenicitetsfaktorn, ett värmelabilt protein. Kolerogensyntes är den viktigaste, genetiskt bestämda egenskapen hos Vibrio cholerae. Kolerogenmolekylen består av två fragment A och B. Den egentliga toxiska funktionen utförs av peptid A 1 av fragment A. Kolerogenmolekylen känner igen enterocytreceptorn, penetrerar cellmembranet, aktiverar adenylatcyklassystemet, den ackumulerande cykliska AMP orsakar hypersekretion av vätska, Na +, HCO 3 -, K + , Cl - från enterocyter. Detta leder till diarré, uttorkning och avsaltning av kroppen, karakteristiskt för kolera.

5. I många vibrios, inkl. inte tillhör grupp 01, det finns olika enterotoxiner.

6. I patogenesen av koleramanifestationer är en faktor som ökar kapillärpermeabiliteten också viktig.

Några drag av epidemiologi. Kolera är en tarminfektion. Huvudkällan är en person (sjuk eller vibrationsbärare), förorenat vatten. Infektionsmetoden är fekal-oral. Individuell känslighet för kolera är extremt varierande. Kännetecknas av ett stort antal dolda (raderade) former, vibriocarriage. Detekteringen av en patogen i vatten är direkt relaterad till närvaron av patienter eller bakteriebärare. Koleravibrios av grupp 01 kan förbli i akvatiska ekosystem under lång tid i formen oodlade former.

Laboratoriediagnostik. Kolera tillhör gruppen av särskilt farliga infektioner, odling av dess patogen kräver överensstämmelse med en speciell biologisk säkerhetsregim. Den huvudsakliga diagnostiska metoden är bakteriologisk, vilket inkluderar isolering och identifiering av patogenen.

Material för forskning - avföring och spyor, sektionsmaterial från döda, vattenprover och svabbar från miljöföremål, matrester.

För inokulering används flytande anrikningsmedia, alkalisk MPA, selektiva och differentialdiagnostiska medier (företrädesvis TCBS). 1 % peptonvatten är lämpligast som transportmedium. Misstänkta glasartade transparenta kolonier subodlas för att erhålla en ren kultur, som identifieras av morfologiska, kulturella, biokemiska egenskaper, motilitet, antigena egenskaper och fagotypad.

För accelererad diagnostik används den immunoluminescerande metoden, biokemisk identifiering med en uppsättning indikatorskivor, för detektering av vibrios cholera i primärmaterial - RNGA med en antikroppsdiagnostik, för detektering av oodlingsbara former - PCR, för bestämning av virulens och koleragensyntes - bioanalyser på diande kaniner, ELISA, DNA - prober (detektion av ett kromosomfragment som bär ett kolerogen operon).

Specifik förebyggande. Det finns olika vacciner - dödade från serovarna Inaba och Ogawa, koleragen toxoid, kemiskt bivalent vaccin. Vacciner används endast för epidemiologiska indikationer (låg immunogenicitet). Antibiotikaprofylax (förebyggande terapi) med tetracyklin och andra antibiotika kan utföras.

V.parahaemolyticus(parahemolytisk vibrio) är en halofil som finns i havsvatten (japanska, svarta, kaspiska och andra södra hav). När man konsumerar skaldjursprodukter som inte har utsatts för tillräcklig värmebehandling, orsakar denna patogen livsmedelsburna sjukdomar och dysenteri - liknande sjukdomar - hos människor. Orsakar hemolys på blodagar med en ökad koncentration av natriumklorid (7% NaCl - stammar med enteropatogena egenskaper).

V. vulnificus- de mest patogena arterna av icke-kolera vibrios för människor. Upptäcks i havsvatten och dess invånare. Orsakar sårinfektioner, septikemi och andra sjukdomar. Det fermenterar sackaros och laktos och bildar gula kolonier på TCBS-agar.

Representanter för släktena Campylobacter och Helicobacter.

De gramnegativa mikroaerofilerna av dessa två släkten är små, rörliga, icke-sporbildande, krökta (S-formade eller måsvingeliknande) stavformade bakterier. Arter som utgör släktet Helicobacter, inklusive H. pylori, det orsakande medlet för human magsår, isoleras från släktet Campylobacter.

Släktet Campylobacter

Detta släkte inkluderar 13 arter av spiralbakterier med en eller flera lockar. Campylobacters är rörliga mikroorganismer med polära flageller (eller flagellum) och spiralformade rörelser. De jäser eller oxiderar inte kolhydrater, kaprofyler och mikroaerofiler, d.v.s. kräver en ökad koncentration av CO 2 och en minskad koncentration av O 2 .

Släktet inkluderar arter som är patogena för människor och varmblodiga djur. Sjukdomarna de orsakar är campylobacteriosis – akuta tarmsjukdomar som uppstår med skador på mag-tarmkanalen. Campylobacters isoleras ofta från tarmarna, munhålan och genitourinära organ hos varmblodiga djur.

Det finns en grupp C.jejuni (inkluderar denna art, såväl som C.coli, C.lari) eller termofila campylobakterier. De kännetecknas av en hög temperaturoptimum för tillväxt (+42 0 C).

Bland de mesofila campylobakterierna med optimal tillväxt vid +37 0 C, spelar C.fetus en betydande roll i mänsklig patologi (orsakar artrit, meningit, vaskulit, abort), och det finns också ett antal villkorligt patogena arter (C.concisus och C) .sputorum - i munhålorna, C.fennelliae, C.cinaedi och C.hyointestinalis - i tjocktarmen).

Kulturfastigheter. Campylobacters kräver speciella gasblandningar för att skapa mikroaerofila förhållanden, pH - 7,0-7,2, mesofila förhållanden (+42 0 C för termofiler, +37 0 C för andra). De använder speciella näringsmedier (kött, lever, blod) med tillägg av selektiva antibiotika. För att få renare prover för odling (koprofiltrater studeras ofta!) kan filtrering genom membranfilter med en pordiameter på 0,65 µm användas. På täta medier bildas två typer av kolonier - "spridning" med ojämna kanter eller glänsande, konvexa kolonier med släta kanter, små kolonier.

Biokemiska egenskaper. De är inerta mot kolhydrater, minskar nitrater, oxidas är positiva, energi erhålls från aminosyror och trikarboxylsyror. Differentiering av arter efter biokemiska egenskaper baseras på hydrolys av hippurat(C.jejuni och C.coli), känslighet för nalidixinsyra(C.jejuni och C.lari), bildning av vätesulfid, etc.

Antigen struktur. Campylobacters har O-, H- och K-antigener. Termiskt stabila O-antigener är av primär betydelse för serotypning.

Epidemiologiska egenskaper. Campylobacter är vanlig hos olika arter av däggdjur och fåglar. Den huvudsakliga smittvägen är mat. Övervägande sommarsäsong är typisk.

Huvudsakliga patogenetiska faktorer. Campylobacters kännetecknas av hög vidhäftande och invasiv aktivitet, snabb kolonisering av de övre delarna av tunntarmen. De viktigaste vidhäftningsfaktorerna är flageller och specifika ytadhesiner. Dessa bakterier har endotoxin, ett värmelabilt enterotoxin.

Kliniska manifestationer- enterokolit.

Laboratoriediagnostik. Mikroskopisk metod - färgning med en 1% vattenlösning av basiskt fuchsin i 10-20 sekunder - avslöjar S-formade korta kedjor, "måsvingar". Huvudmetoden är bakteriologisk - avföringskultur. Kulturer identifieras av en uppsättning egenskaper.

Helicobacter pylori.

Peptiskt sår är en sjukdom som kännetecknas av närvaron av en ulcerös defekt i magslemhinnan eller tolvfingertarmen. Upptäckten av H. pylori ledde till en revolution i idéer om etiologi, patogenes, behandling och förebyggande av magsår. Magsår är nästan 100 % associerad med Helicobacter pylori. Stressfaktorer och psykologiska egenskaper hos patienter, såväl som genetiska faktorer i utvecklingen av sjukdomen spelar också en betydande roll.

Morfologiska och kulturella egenskaper- liknande Campylobacter. Föredrar chokladagar.

Biokemiska egenskaper. Har ureas-, oxidas- och katalaspositiv.

Antigena egenskaper. Har O- och H-antigener.

Patogenes av lesioner. Helicobacter penetrerar genom slemskiktet (vanligtvis i antrum av magsäcken och tolvfingertarmen), fäster på epitelceller och penetrerar krypterna och körtlarna i slemhinnan. Bakteriella antigener (främst LPS) stimulerar neutrofilmigrering och orsakar akut inflammation. Helicobacter är lokaliserade i området för intercellulära passager, vilket beror på kemotaxi till urea och hemin (förstörelse av erytrocythemoglobin i mikrovaskulaturen). Under påverkan av Helicobacter-ureas bryts urea ned till ammoniak, vars verkan är förknippad med skador på slemhinnan i magen och tolvfingertarmen. Många enzymer (mucinas, fosfolipas, etc.) kan också stimulera störningar av slemhinnornas integritet.

Patogenicitetsfaktorerna för H. pylori inkluderar främst kolonisationsfaktorer (adhesion, motilitet), persistensfaktorer och sjukdomsalstrande faktorer. Nyckelfaktorer i tropism och patogenicitet av H. pylori inkluderar mekanismer för vidhäftning och utsöndring av bakteriella toxiner. Bevis presenteras för Lewis B-antigenets ledande roll som adhesionsreceptor. Utöver dem är magslemhinnor och sulfatider i magslemhinnan viktiga. Bab A-proteinet från patogenen (adhesin) har identifierats, vilket gör att mikroorganismen kan binda till Lewis B-blodgruppsantigenet som finns på ytan av magepitelceller. Andra patogenicitetsfaktorer inkluderar cag A (cytotoxin-associerad gen) och vac A (vakuolerande cytotoxin). Stammar som uttrycker dessa virulensmarkörer tillhör den första typen av stammar, som är associerade med ökad ulcerogen och inflammatorisk potential, i motsats till den andra typen av stammar, som inte har dessa faktorer.

Närvaron av alla tre faktorerna (Bab A, cag A, vacA) är väsentlig för manifestationen av de patogena egenskaperna hos H. pylori (triplettpositiva stammar). Den skadliga effekten på slemhinnan kan associeras både med den direkta effekten av bakteriella toxiner, och med indirekta effekter genom immunsystemet. Långvarig beständighet av patogenen är associerad med ett antal mekanismer som gör det möjligt för den att övervinna slemhinnans skyddande barriärer och förmågan att bilda kokkalformer som inte har patogen potential.

H. pylori leder inte alltid till utveckling av magsår, men i magsår upptäcks denna patogen ständigt. Faktorer som bestämmer ulcerogeniciteten hos H. pylori studeras intensivt.

Laboratoriediagnostik bör vara heltäckande, baserat på flera tester. Detektionsmetoder kan vara invasiva (förknippade med behovet av att ta en biopsi av slemhinnan) och icke-invasiva (indirekta).

Grundläggande metoder för att detektera H. pylori i slemhinnebiopsier.

1. Mikroskopiska metoder (färgning med hematoxylin-eosin, akridin orange, Gram, vattenfuchsin, silverinpregnation; faskontrastmikroskopi med bestämning av rörlighet).

2. Bestämning av ureasaktivitet.

3. Isolering och identifiering av patogenen på fasta medier (vanligtvis blod). Kulturer utförs på blodagar, blodagar med amfotericin, erytritol - agar med amfotericin. Odla i 5-7 dagar vid 37 o C under mikroaerobiska, aeroba och anaeroba förhållanden. Tillhörighet bestäms av morfologin hos mikroorganismer och deras kolonier, spiralformad rörlighet, tillväxt under mikroaerofila förhållanden och frånvaron av tillväxt under aeroba och anaeroba förhållanden och vid temperaturer på +25 och +42 o C, av närvaron av oxidas, katalas och ureas aktivitet.

4. Detektion av patogenantigener i ELISA.

5.PCR-diagnostik är det mest känsliga och specifika testet.

Icke-invasiva metoder inkluderar ett "andningstest" och ELISA för att detektera IgG- och IgA-antikroppar.

Behandling komplex, med användning av sanitetsmetoder (orsakande strålning). De-NOL (kolloidalt vismutsubcitrat), ampicillin, trichopolum (metronidazol) etc. används.

Innehållet i artikeln

Shigella

Bakterier av släktet Shigella är orsakerna till bakteriell dysenteri eller shigellos. Dysenteri är en polyetiologisk sjukdom. Det orsakas av olika typer av bakterier, som heter Shigella för att hedra A. Shiga. De är för närvarande klassificerade i släktet Schigella, som är uppdelat i fyra arter. Tre av dem - S. dysenteriae, S. flexneri och S. boydii - är indelade i serovarer, och S. flexneri är också indelade i subserovarer.

Morfologi och fysiologi

I sina morfologiska egenskaper skiljer sig Shigella lite från Escherichia och Salmonella. De saknar dock flageller och är därför icke-rörliga bakterier. Många stammar av Shigella har pili. Olika typer av Shigella är identiska i sina morfologiska egenskaper. De orsakande medlen för dysenteri är kemoorganotrofer, föga krävande för näringsmedia. På fasta medier, när de isoleras från en patients kropp, bildas vanligtvis S-formade kolonier. Shigella-arter Schigella sonnei bildar två typer av kolonier - S-form (I-fas) och R-form (II-fas). Vid subodling bildar fas I-bakterier båda typerna av kolonier. Shigella är mindre enzymatiskt aktiv än andra enterobakterier: vid fermentering av glukos och andra kolhydrater bildar de sura produkter utan gasbildning. Shigella bryter inte ner laktos och sackaros, med undantag för S. sonnei, som långsamt (på den andra dagen) bryter ner dessa sockerarter. Det är omöjligt att särskilja de tre första arterna baserat på biokemiska egenskaper.

Antigener

Shigella, liksom Escherichia och Salmonella, har en komplex antigen struktur. Deras cellväggar innehåller O-, och hos vissa arter (Shigella Flexner) även K-antigener. Deras kemiska struktur liknar Escherichia-antigener. Skillnaderna ligger främst i strukturen av de terminala länkarna av LPS, som bestämmer immunokemisk specificitet, vilket gör det möjligt att skilja dem från andra enterobakterier och sinsemellan. Dessutom har Shigella korsantigena relationer med många serogrupper av enteropatogen Escherichia, som främst orsakar dysenteriliknande sjukdomar, och med andra enterobakterier.

Patogenicitet och patogenes

Shigellas virulens bestäms av deras adhesiva egenskaper. De vidhäftar till kolon enterocyter på grund av deras mikrokapsel. Sedan penetrerar de enterocyter med hjälp av mucinas, ett enzym som förstör mucin. Efter att ha koloniserat enterocyter går Shigella in i det submukosala lagret, där det fagocyteras av makrofager. I detta fall inträffar makrofagernas död och ett stort antal cytokiner frigörs, som tillsammans med leukocyter orsakar en inflammatorisk process i det submukosala lagret. Som ett resultat avbryts intercellulära kontakter och ett stort antal Shigella tränger in i enterocyterna som aktiveras av dem, där de förökar sig och sprider sig till närliggande celler utan att komma ut i den yttre miljön. Detta leder till förstörelse av epitelet i slemhinnan och utvecklingen av ulcerös kolit. Shigella producerar ett enterotoxin, vars verkningsmekanism liknar det värmelabila enterotoxinet från Escherichia. Shigella Shiga producerar ett cellgift som angriper enterocyter, neuroner och myokardceller. Detta indikerar närvaron av tre typer av aktivitet - enterotoxisk, neurotoxisk och cytotoxisk. Samtidigt, när Shigella förstörs, frigörs endotoxin - LPS från cellväggen, som kommer in i blodet och har en effekt på nerv- och kärlsystemen. All information om Shigellas patogenicitetsfaktorer kodas i en gigantisk plasmid, och syntesen av Shigatoxin kodas i en kromosomal gen. Således bestäms patogenesen av dysenteri av patogenernas vidhäftningsegenskaper, deras penetration i tjocktarmens enterocyter, intracellulär reproduktion och produktion av toxiner.

Immunitet

Med dysenteri utvecklas lokal och allmän immunitet. Vid lokal immunitet är sekretoriskt IgA (SIgA), som bildas under den första veckan av sjukdomen i lymfoidcellerna i tarmslemhinnan, väsentligt. Genom att täcka tarmslemhinnan förhindrar dessa antikroppar fastsättning och penetration av Shigella i epitelceller. Dessutom, under infektionen, ökar titern av serumantikroppar IgM, IgA, IgG, vilket når ett maximum under den andra veckan av sjukdomen. Den största mängden IgM detekteras under den första sjukdomsveckan. Närvaron av specifika serumantikroppar är inte en indikator på styrkan av lokal immunitet.

Ekologi och epidemiologi

Livsmiljön för Shigella är den mänskliga tjocktarmen, i vilkas enterocyter de förökar sig. Smittkällan är patienter, människor och bakteriebärare. Infektion uppstår genom att inta förorenad mat eller vatten. Sålunda är den huvudsakliga vägen för överföring av infektion näringsmässig. Fall av kontakt-hushållsöverföring har dock beskrivits. Motståndskraften hos olika typer av Shigella mot miljöfaktorer är inte densamma - S. dysenteriae är känsligast, S. sonnei är minst känslig, speciellt i R-form. De förblir i avföring i högst 6-10 timmar.

Dysenteri (shigellos)

Dysenteri är en akut eller kronisk infektionssjukdom som kännetecknas av diarré, skador på slemhinnan i tjocktarmen och förgiftning av kroppen. Detta är en av de vanligaste tarmsjukdomarna i världen. Det orsakas av olika typer av bakterier av släktet Shigella: S.dysenteriae, S.flexneri, S.boydii, S.sonnei. Under efterkrigsåren i industrialiserade länder orsakas dysenteri oftare av S.flexneri och S.sonne. I Ukraina används en internationell klassificering av dessa bakterier, som tar hänsyn till deras biokemiska egenskaper och egenskaper hos den antigena strukturen. Det finns totalt 44 serovar av Shigella. Den huvudsakliga metoden för mikrobiologisk diagnos av dysenteri är bakteriologisk. Systemet för isolering av patogener är klassiskt: ympning av materialet på anrikningsmedium och Ploskirev-agar, erhållande av en ren kultur, studier av dess biokemiska egenskaper och identifiering med hjälp av polyvalenta och monovalenta agglutinerande sera.

Ta material för forskning

Ett positivt resultat av en mikrobiologisk analys beror till stor del på en snabb och korrekt insamling av testmaterialet. I alla fall och bakterier tar de ofta avföring, mer sällan - kräks och sköljer vatten från mage och tarmar. Avföring (1-2 g) tas med en glasstav från ett täcke eller blöja, inklusive bitar av slem och pus (men inte blod). Det är bäst att ta slem (pus) från de drabbade områdena av slemhinnan under en koloskopi för undersökning. Vid insamling och odling av material är det viktigt att strikt följa vissa regler, om möjligt, bör bakteriologisk forskning påbörjas innan etiotropisk behandling. Innan man samlar avföring skållas disken (kärl, krukor, burkar) med kokande vatten och behandlas under inga omständigheter med desinfektionslösningar. Shigella är mycket känslig. Materialet som ska studeras måste snabbt (vid patientens säng) sås i anrikningsmediet och parallellt på selektiv agar i en petriskål. Avföringen kan samlas upp utan att vänta på avföring med en bomullspinne eller Ziemann rektalrör. Det uppsamlade materialet eller inokulerade mediet måste omedelbart levereras till laboratoriet. Om det är omöjligt att odla på sjukhuset och snabbt leverera avföringen, förvaras de i ett konserveringsmedel (30% glycerol + 70% fosfatbuffert) vid 4-6 ° C i högst en dag Dysenteripatogener tränger mycket sällan in blodet och urinen, och därför är dessa föremål vanligtvis inte sugga Bakteriologisk analys av snittmaterial måste utföras så snart som möjligt efter döden (tjocktarm, mesenteriska lymfkörtlar, bitar av parenkymala organ). Vid utbrott av dysenteri undersöks även livsmedelsprodukter, särskilt mjölk, ost och gräddfil.

Bakteriologisk forskning

Inokulering av avföring utförs parallellt på Ploskirevs selektiva medium för att erhålla isolerade kolonier och alltid i selenitbuljong för att ackumulera Shigella, om det finns få av dem i materialet som studeras. Mukopurulenta bitar väljs med en bakteriologisk slinga, sköljs noggrant i 2-3 provrör med isotonisk natriumkloridlösning, appliceras på Ploskirevs medium och gnids in i agar i ett litet område med en glasspatel. Därefter avlägsnas spateln från mediet och det återstående materialet gnids torrt på den återstående oinokulerade ytan. När man sår i 2-3 koppar appliceras en ny portion frön på var och en av dem. Bitar av slem och pus sås i selenitbuljong utan sköljning I frånvaro av mukopurulenta bitar emulgeras avföring i 5-10 ml 0,85% natriumkloridlösning och 1-2 droppar av supernatanten sås på Ploskirevs medium. Icke-emulgerad avföring sås i selenitbuljong i förhållandet 1:5. Vid inympning av kräks och sköljvatten används selenitbuljong med dubbel koncentration och förhållandet mellan inokulum och medium är 1:1. Odlingsmedier som ympats vid patientens säng placeras direkt i termostaten. Alla grödor odlas vid 37 ° C i 18-20 timmar Under den andra dagen, med blotta ögat eller med ett 5x-10x förstoringsglas, undersök växtmönstret på Ploskirevs medium, där Shigella bildar små, genomskinliga, färglösa kolumner. Shigella Sonne kan producera kolumner av två typer: vissa är platta med taggiga kanter, andra är runda, konvexa, med en fuktig glans. 3-4 kolonier undersöks mikroskopiskt, allt förstörs och återplanteras på Olkenitsky-centret för att isolera en ren kultur. Om det inte finns någon tillväxt på Ploskirev-agar, eller det inte finns några karakteristiska Shigella-kolonier, så från selenitbuljong på Ploskirev- eller Endo-agar. Om det finns ett tillräckligt antal typiska kolonier, utförs en ungefärlig agglutinationsreaktion på glas med en blandning av Flexner och Sonne-serum. På den tredje dagen tas hänsyn till tillväxtmönstret på Olkenitskys medium. Shigel orsakar karakteristiska förändringar i tredelad agar (kolonnen blir gul, färgen på den lutande partikeln ändras inte, det finns ingen svärtning). En misstänkt kultur sås i Hiss-medium för att bestämma biokemiska egenskaper, eller så används enterotester. Serologisk identifiering av isolerade kulturer utförs med en glasagglutinationsreaktion, först med en blandning av sera mot Flexner- och Sonne-arter, som ofta påträffas. sedan med monospecies och monoreceptorsera. Nyligen har kommersiella polyvalenta och monovalenta sera producerats mot alla typer av dysenteripatogener. För att bestämma typen av Shigella används också en koaglutinationsreaktion. Typen av patogen bestäms av en positiv reaktion med protein A från Staphylococcus aureus, på vilken specifika antikroppar mot Shigella adsorberas. En droppe antikroppsensibiliserat protein A appliceras på en typisk koloni, skålen skakas och efter 15 minuter observeras uppkomsten av aglutinat under ett mikroskop. Koaglutinationsreaktionen kan utföras redan den andra dagen av studien om det finns ett tillräckligt antal laktosnegativa kolonier i mediet. För att snabbt och tillförlitligt identifiera Shigella utförs även direkta och indirekta reaktioner av immunfluorescens och enzymantikroppar. . Den senare inom dysenteri är mycket specifik och används i allt högre grad vid laboratoriediagnostik av sjukdomen För att identifiera antigener i blodet hos patienter, inklusive som en del av cirkulerande immunkomplex, kan hemoch ELISA-metoden (Shigelaplasts diagnostiska testsystem). användas. Shigella-antigener i avföring och urin detekteras med RNGA, RSK och koaglutination. Dessa metoder är mycket effektiva, specifika och lämpliga för tidig diagnos För att fastställa om de isolerade kulturerna tillhör släktet Shigella, utförs också ett keratontest på marsvin. En slinga av agarkultur eller en droppe buljong sätts in säck. Det är viktigt att inte skada hornhinnan. Nya Shigella-infektioner orsakar svår keratit 2-5 dagar efter införandet av kulturen. Salmonella kan också orsaka konjunktivit, men det påverkar inte hornhinnan. Man bör dock komma ihåg att enteroinvasiv Escherichia coli (EIEC), särskilt serovar 028, 029, 0124, 0143, etc., också orsakar experimentell keratokonjunktivit hos marsvin. Den bakteriologiska metoden för att diagnostisera dysenteri är tillförlitlig, men i olika laboratorier på bakteriologers och laboratorieteknikers kvalifikationer) ger det bara 50-70% positiva resultat. Förutom att diagnostisera sjukdomar, utförs även bakteriologiska tester för att identifiera bakteriebärare, särskilt bland anställda vid livsmedelsföretag, barnomsorgsinstitutioner och medicinska institutioner. För att fastställa infektionskällorna bestäms Shigella phagovars och colicinovars.

Serologisk diagnos

Serologisk diagnos av dysenteri utförs sällan. Den infektiösa processen åtföljs inte av signifikant antigen irritation, därför är antikroppstitrarna i serum hos patienter och konvalescent låga. de upptäcks på dag 5-8 av sjukdomen. Fler antikroppar bildas i 2-3:e veckan Volumetrisk agglutinationsreaktion med mikrobiell diagnostik utförs på samma sätt som Widal-reaktionen för tyfoidfeber och paratyfus. Blodserum späds från 1:50 till 1:800. Den diagnostiska titern av antikroppar mot S.flexneri hos vuxna patienter anses vara 1:200, i S.dysenteriae och S.sonnei - 1:100 (hos barn - 1:100 respektive 1:50). erhålls vid iscensättning av RNGA, speciellt när man använder den parade serummetoden. En ökning av titern med 4 eller fler gånger har diagnostisk betydelse. Erytrocytdiagnostik görs huvudsakligen från S.flexneri- och S.sonnei-antigener. Ett allergiskt intradermalt test med Tsuverkalovs dysenterin (en lösning av proteinfraktioner av Shigella Flexner och Sonne) är också av hjälpvärde för diagnos. Det blir positivt hos patienter med dysenteri från och med den 4:e dagen. Reaktionen registreras efter 24 timmar. När hyperemi och svullnad av huden med en diameter på 35 mm eller mer uppträder, bedöms reaktionen som starkt positiv, vid 20-34 mm - måttlig och vid 10-15 mm - tveksam.

Specifik förebyggande och behandling

Mottagandet av olika vacciner (uppvärmda, formaliniserade, kemiska) löste inte problemet med specifikt förebyggande av dysenteri, eftersom de alla hade låg effektivitet. Fluorokinoloner och, mindre vanligt, antibiotika används för behandling. Innehållsförteckning för ämnet "Shigella. Dysenteri. Salmonella. Salmonellos.":

Enligt de morfologiska egenskaperna hos Shigella omöjlig att skilja från andra medlemmar av familjen Enterobacteriaceae. Dysenteri bakterier De har inga kapslar, på fasta medier bildar de släta (S-) och grova (R-) kolonier. S-kolonier är runda, kupolformade, släta, genomskinliga i genomsläppt ljus.

R-koloni dysenteri oregelbundet formad, platt, matt, med en grov yta och ojämna kanter. I flytande media S-form av dysenteri ger jämn grumlighet, R-former bildar bottensediment, mediet förblir transparent.

Tabell 18-1. Grundläggande biokemiska egenskaper hos bakterier i Enterobactenaceae-familjen av medicinsk betydelse

Biokemiska egenskaper hos dysenteri

Jämfört med andra tarmbakterier, biokemiskt shigella inert (se tabell 18-1). Alla Shigella producerar inte H 2 S och fermenterar inte laktos på Kligler-agar. Indolproduktionen varierar (den produceras av mer än hälften av stammarna av S. dysenteriae, S. flexneri och S. boydii). I vissa fall kan bestämning av bakteriers egenskaper med hjälp av en minsta differentieringsserie också ge en ungefärlig uppfattning om arten.

Har minst enzymaktivitet S. dysenteriae ( Grigoriev-Shiga-Kruse trollstav). Bakterier fermenterar bara glukos utan att producera gas. Eftersom de inte bryter ner mannitol, medan andra arter jäser det, är de också kända som mannitol-negativa Shigella.

S. flexneri ( Flexner sticka) fermenterar inte laktos, dulcit och xylos; nästan alla stavar bildar indol. Bakterier i serologisk grupp 6 (även känd som Shigella Manchester och Newcastle) producerar små mängder gas vid fermentering av glukos och andra fermenterbara kolhydrater.

Väldigt lik biokemisk aktivitet S. boydii har dem också, men de fermenterar också xylos, dulcite och arabinos (vanligtvis under de första 24 timmarna). Vissa Shigella Bonda kan också jäsa maltos (dag 6-20), vilket är av praktisk betydelse för att identifiera kulturer.

S. sonnei jäser inte sorbitol och dulcite bildar inte indol, utan bryter ner xylos och arabinos, vilket gör att de liknar Shigella Bonda. En utmärkande egenskap är förmågan att växa vid 45 C, fermentera ramnos, samt laktos och sackaros vid ett senare tillfälle.